7. Основные задачи по технологии производства

 Изготовление лечебных белков из плазмы крови человека происходит путем разделения плазмы на белковые фракции и дальнейшей тонкой очистки до концентрированных белковых препаратов, подвергшихся процессам вирус-инактивации.

В этих целях необходимы следующие технологические единицы оборудования:

комплект емкостей объемом от 60 литров до 4 куб.м.;

фильтрационные установки;

сепараторы и центрифуги;

хроматографические установки;

контрольно-аналитическое оборудование.

Процесс производства протекают последовательно, поэтапно. Базовое фракционирование (пул плазмы для получения промежуточных продуктов из заготовленной сырьевой плазмы) составляет  1,2 – 1,5 тонн. Величина партии или серии на выходе получается исходя из требований руководящих предписаний, текущих издержек производства, технических условий и осуществленных инвестиционных затрат.

 

Описание технологического процесса

 

Основным методом фракционирования и изготовления полупродуктов является технология по Кону с фильтрацией и последующей лиофилизацией (для определенных продуктов).  Получение очищенных целевых продуктов осуществляется с использованием методов хроматографирования.

Поставка плазмы:

Доставка замороженной плазмы осуществляется в изолированных транспортных емкостях. Доставленная плазма проверяется по внешнему виду, наличию этикеток и их содержанию, далее из нее составляются партии. По истечении 60-дневного срока карантина кратные партии выпускаются в производство.

Оттаивание:

Процесс оттаивания начинается с предварительного оттаивания доставленных на производство партий. Затем предварительно оттаявшая плазма извлекается из упаковки и подается на линию непрерывного оттаивания. Получившаяся жидкая плазма подвергается центрифугированию для выделения криопасты.

После выделения криопасты, она подвергается мгновенному замораживанию и дальнейшей очистке для получения конечного продукта. До начала дальнейшей обработки криопаста хранится при низких температурах.

Базовое фракционирование:

После приема жидкой плазмы с участка оттаивания осуществляется фракционирование происходит по методу Кона. Выделение отдельных белковых фракций происходит при определенных концентрациях этилового спирта, pH, ионной силе и отрицательной температуре. Получаются фракции I; II/III; IV; V. Для отделения фракции V и получения пасты V используется фильтр-пресс. Осажденные белковые фракции отделяются на специальных центрифугах при отрицательной температуре. Полученные пасты подвергают замораживанию и дальнейшей очистке. До дальнейшей обработки пасты хранятся при низких температурах. Ненужные пасты отбраковываются для последующей утилизации.

Тонкая очистка альбумина:

Очистка альбумина начинается с растворения замороженной пасты V. Затем раствор альбумина очищается в несколько этапов фильтрации и концентрируется. В препарате осуществляется доведение рН, концентрации NaCl и добавка стабилизаторов до нормированных значений. Проводится промежуточный и конечный контроль качества полупродуктов и целевого продукта на соответствие нормативным требованиям. При производстве используются соответствующие способы инактивации вирусов.

Тонкая очистка иммуноглобулина:

Для получении очищенного иммуноглобулина используется фракция II/III. После осветляющей фильтрации фракция из фракции проходит очистку путем хроматографического разделения. Элюированная фракция, обогащенная очищенным иммуноглобулином IgG, подвергается нанофильтрации. Инактивация вирусов проводится сольвент-детергентным методом.  Концентрирование растворов иммуноглобулина осуществляется ультрафильтрацией. Раствор иммуноглобулина изготавливается с конечными концентрациями 5%, 10% или 16%. В препарате осуществляется доведение рН, концентрации необходимых ингредиентов до нормированных значений. Готовый раствор подвергается стерилизующей фильтрации и подается на участок розлива. Проводится промежуточный и конечный контроль качества полупродуктов и целевого продукта на соответствие нормативным требованиям.

Тонкая очистка фактора VIII:Очистка фактора VIII начинается с растворения замороженной криопасты. После растворения полупродукт подвергается сепарации. Полупродукт подвергается инактивации вирусов с помощью соответствующего метода. Для дальнейшей очистки полупродукт подвергается хроматографическому разделению. При этом из полупродукта отделяются нежелательные белки. Элюированная фракция, обогащенная очищенным фактором VIII, подвергается ультрафильтрации.  Проводится промежуточный и конечный контроль качества полупродуктов и целевого продукта на соответствие нормативным требованиям. Готовый раствор подвергается стерилизующей фильтрации и подается на участок розлива.

Тонкая очистка фактора IX:Очистка суспензии продукта начинается с хроматографического разделения сырья. При этом из суспензии продукта выделяются нежелательные фракции белка. Затем элюированная фракция продукта подвергается ультрафильтрации. При этом из полупродукта отделяются нежелательные белки. Элюированная фракция, обогащенная очищенным целевым продуктом, подвергается ультрафильтрации. Проводится промежуточный и конечный контроль качества полупродуктов и целевого продукта на соответствие нормативным требованиям. Полупродукт подвергается инактивации вирусов с помощью соответствующего метода. Затем полупродукт подвергается очистке с помощью еще одной операции хроматографического разделения. Одна из фракций, полученных в результате хроматографического разделения, содержит фактор II. Это фракция подвергается дальнейшей переработке для производства тромбина.

 Хроматографическая фракция, содержащая фактор IX, также элюируется с хроматографической колонки. Затем очищенный раствор фактора IX концентрируется с помощью ультрафильтрации. После этой операции производится установка рецептуры до нормированных значений при 1000 IU/флакон. Готовый раствор подвергается стерилизующей фильтрации и подается на участок розлива.

Очистка тромбина:Очистка тромбина начинается с двух последовательных операций хроматографического разделения фракции, полученной при очистке фактора IX. При этом из полупродукта отделяются нежелательные сопутствующие белки. Затем элюироанная фракция, обогащенная протромбином, подвергается активации протромбина в тромбин. После этого проводится инактивация вирусов соответствующим способом. Для дальнейшей очистки полупродукт подвергается еще одной операции хроматографического разделения. При следующей технологической операции элюированная очищенная фракция целевого продукта концентрируется с помощью системы ультрафильтрации. Готовый раствор тромбина подвергается стерилизующей фильтрации и подается на участок розлива.

Асептический розлив:На участке розлива готовые продукты в асептических условиях фасуются в первичную упаковку (флаконы).

Розлив во флаконы:

Перед использованием пустых флаконов их моют и стерилизуют. После подачи на дозировочную машину флаконы заполняются продуктом и закрываются резиновой пробкой и алюминиевой отбортованной крышкой.

В случае сублимационной сушки продуктов, флаконы после розлива неплотно закрывают лиофилизированными пробками. Затем флаконы помещают в сублимационную сушилку и подвергают сушке сублимацией. После сушки флаконы автоматически закрываются в сублимационной сушилке. В завершение процесса первичной упаковки устанавливается алюминиевая крышка.

Упаковка:Фасованная продукция после выдачи отделом контроля качества разрешения на использование проверяется, этикетируется и упаковывается в соответствующие картонные коробки. В завершение продукция подается на отгрузочный склад и далее по заявкам потребителей (больниц, медцентров и т.д.) осуществляется их отгрузка с соответствующими отгрузочными документами.