Электрокондуктометрический анализатор количества форменных элементов крови. (Электрокондуктометрический гематологический газоанализатор).
Был впервые предложен в 1957г. Коолтером. Принцип действия: Воснове работы этого анализатора измерение электрического сопротивления диафрагмы, заполненной физиологическим раствором, через отверстия которого движутся форменные элементы крови.
В предложенном Коолтером анализаторе используется диафрагма 1, установленная в потоке физиологического раствора, которым предварительно разбавляется кровь. В потоке раствора 2 расположены металлические электроды 3 и 4, подключенные к источнику питания через резисторы R1 и R. Отверстие диафрагмы очень мало и составляет 20-150 мкм. Электрическое поле, создаваемое электродами, полностью концентрируется в отверстии диафрагмы, тогда по внешней цепи протекает ток, а на резисторе R создается некоторое падение напряжения U0. (см график)
Когда в отверстие диафрагмы попадает очередная частица крови электрическое сопротивление отверстия диафрагмы резко увеличивается за счет уменьшения площади проходного сечения, так и за счет того сопротивление частиц больше, чем сопротивление раствора, следовательно, ток уменьшается во времени и, поэтому- уменьшение падения напряжения на резисторе R.
Таким образом при протекании частицы крови через отверстие формируется импульс, амплитуда, которая определяется формулой 1 .
U=kfVч
K – коэффициент пропорциональности;
f – фактор формы частицы крови;
Vч – объем частицы
Возникающий импульс усиливается эл. усилителем 5, выходной сигнал которого посылается на электронный счетчик импульсов 6.
Для предотвращения слипания форменных элементов крови между собой кровь предварительно разбавляют. Обычно диаметр диафрагмы выбирают из соотношения:
D/d=0.08-0.15;
Время подсчета частиц τ = (3-100) с
Коэффициент усиления электронного усилителя составляет 10000.
Схема и работа электрокондуктометрического гематологического анализатора.
В данном анализаторе предварительно разбавленная проба крови, размещается в емкости 10, которую вручную подставляют под ячейку16, снабженную диафрагмой 1. Элементы 1-5 идентичны рассмотренным выше. В ячейке 16, а также в линиях 9 и 17 находится физиологический раствор от предыдущего анализатора. Затем открывается управляющий клапан 8, включается устройство вакуумирования ВУ (на рис. нет ) и жидкость из ячейки 16 по трубоотводам 9 и 17 начинает поступать в емкость 15.
Error: Reference source not found
Одновременно, в U – образном ртутном манометре 11 уровень ртути 12 поднимается вверх за счет разности атмосферного давления , поступающего в левую трубку манометра и давления в трубопроводе 17. В этот момент частично через отверстие 1 в ячейку 16 поступает порция анализируемой среды 2, содержащая форменные элементы крови. В этот момент подсчет количества элементов не осуществляется.
Затем, закрывается клапан 8, а ртуть в манометре 11 начинает перемещаться вниз под действием силы тяжести. За счет этого через отверстие 1 продолжает поступать анализируемая среда. Когда ртуть в манометре 11 (его левой трубке) достигает электрода Б, за счет электропроводности ртути замыкаются электроды С и Б. При этом вырабатывается сигнал временного селектора 13, который включает в работу счетчик импульсов 14. Эти импульсы проникают в счетчик 14 от дискриминатора амплитуды импульса 6. Он обеспечивает подачу импульсов в заранее заданные амплитуды. Начинается подсчет числа импульсов заданной амплитуды. Когда ртуть в левой трубке манометра 11 достигает электрода С вырабатывается импульс и временной селектор перестает передавать сигналы от дискриминатора 6 в счетчике 14.
Таким образом, за время счета τ в счетчике накапливается информация о числе частиц i - того типа n.
Импульсы, создаваемые частицами, можно наблюдать на экране осциллографа 7.
Анализ эритроцитов происходит при разбавлении крови в физиологическом растворе. Rэ =(50-100)*103 и осуществляется с диафрагмами, имеющими диаметр отверстия 50-100мкм. При этом лейкоциты подсчитываются как эритроциты. Это вызывает методическую погрешность 1,1%.
При анализе лейкоцитов кровь предварительно обрабатывают специальным веществом – гемолитиком , который разлагает эритроциты; разбавление полученной субтанции Rл = 50-100 мкм.
При анализе тромбоцитов предварительно кровь отстаивается или разделяется в центрифуге на 2 части. Причем, на анализ берут только верхнюю субстанцию, образовавшуюся при разделении. Она содержит только тромбоциты.
Затем, отобранную пробу, содержащую тромбоциты, разбавляют
Rт = (5-10)*103. Определение осуществляется с использованием диафрагмы 20- 40 мкм.