Методы исследования микрофлоры воздуха

Седиментационный метод применяется обычно для качественной характеристики микробного загрязнения воздуха

(на чашку Петри в течение 5 мин оседают частицы биологического аэрозоля из 10 л воздуха)

чашки Петри с элективными средами без крышек помещают на горизонтальные поверхности и выдерживают установленное время:

10—30 мин чашки с МПА для определения ОМЧ,

15 мин чашки с ЖСА для выявления стафилококков,

до 2 ч — для выделения НГОБ.

В месте забора используют не менее 2 чашек с одной питательной средой. После экспозиции чашки помещают в термостат при 37±1°С в течение 24±2 ч. После инкубации проводят учет количества колоний выросших микроорганизмов и при необходимости идентификацию микроорганизмов до рода и вида.

Методы исследования микрофлоры воздуха

Аспирационный метод — наиболее точный метод по сравнению с седиментационным.

Для выбора проб воздуха пользуются пробоотборными устройствами (пробоотборниками).

Они обеспечивают отбор проб биологического аэрозоля с величиной частиц диаметром до 1,4 мкм на питательную среду.

Типы пробоотборниковИмпакторы - приборы, в которых происходит принудительное осаждение микроорганизмов из прокачиваемого через прибор воздуха на поверхность плотной питательной среды (прибор Кротова, ПАБ-1, ПАБ-2 и др.).

Импинджеры - группа приборов, в которых воздух проходит через жидкость (питательную среду, стерильную воду, физиологический раствор), в результате чего микроорганизмы задерживаются в ней и могут быть обнаружены.

Аспирационный метод

Объем исследуемого воздуха составляет от 50 до 1000 л при скорости прохождения до 250 л/мин.

Отбор проб воздуха в помещениях стационара производят на уровне дыхания лежащего больного или на высоте рабочего стола.

Для определения общего количества бактерий в 1 м воздуха отбор производят на МПА.

Для определения золотистого стафилококка используют ЖСА

Для определения плесневых и дрожжевых грибов — среду Сабуро.

После отбора проб чашки термостатируют при 37±1°С в течение 24±2 ч, посевы на среде Сабуро инкубируют при температуре 20—22°С в течение 3—4 сут. После инкубации проводят учет количества колоний выросших микроорганизмов.

Пробоотборники воздуха микробиологические

Фильтрационный метод

Используются мембранные фильтры из нитроцеллюлозы или ацетата целлюлозы.

При отборе пробы, проходя через фильтр, воздух вызывает его электризацию, поэтому улавливание микроорганизмов происходит только в самом поверхностном слое фильтра толщиной около 0,3 мкм.

Это не только обеспечивает высокую эффективность улавливания, но и позволяет элюировать (десорбировать) задержанные частицы, бактерии и вирусы для дальнейшего исследования

СПМ воздухаОбщее количество микроорганизмов воздуха (общее микробное число – ОМЧ).

Staphylococcus aureus (золотистый стафилококк)

Грамотрицательные бактерии. При исследовании воздуха ЛПУ дополнительно рекомендуется определять принадлежность выявленных микроорганизмов к родам Escherichia, Pseudomonas, Proteus, Klebsiella, Serratia, Enterobacter.

СПМ воздухаГемолитическая микрофлора – количество микроорганизмов, образующих на 5% кровяном агаре в течение 24 ч. при 37°С колонии, окруженные зонами альфа- или бета-гемолиза. Основную массу гемолитической микрофлоры воздуха составляют гемолитические стрептококки.

Грибы (дрожжеподобные и плесневые) – количество дрожжей и плесневых грибов, вырастающих на питательном агаре или на агаре Сабуро за 96 ч. инкубации при 22 —28°С.

По эпидемиологическим или специальным показаниям в воздухе ЛПУ определяют наличие и количество патогенных микроорганизмов (Salmonella spp., Mycobacterium spp.), а также вирусную (чаще энтеровирусную) контаминацию.

Воздух в ЛПО

Большое значение имеет чистота воздуха в операционных, реанимационных и перевязочных отделениях хирургических стационаров.

Общее количество микробов в операционной до операции не должно превышать 500 в 1 м³, а после операции — 1000 в 1 м³.

Исследование воздуха в ЛПО

проводят один раз в квартал при текущем санитарном надзоре центром Государственного санитарно-эпидемиологического надзора;

один раз в месяц бактериологическими лабораториями больниц и по эпидемиологическим показаниям.

В системе гигиенических и противоэпидемических мероприятий при текущем санитарном надзоре определяют количество СПМ в 1 м³ воздуха.

При текущем надзоре к СПМ относят золотистый стафилококк, стрептококки, грамотрицательные бактерии и грибы (в аптеках).

ОМЧ— нормируемый, но всё-таки относительный показатель.

Бактериологические показатели, рекомендуемые для санитарно-гигиенической оценки воздуха ЛПО

В воздухе больничных помещений

доминируют золотистый стафилококк и стрептококки. Соотношение микроорганизмов составляет в среднем 70 и 30% соответственно. При этом в 1 м³ воздуха операционных залов, послеоперационных палат, перевязочных, отделениях реанимации, родильных залов они должны отсутствовать.

В связи с ростом частоты заболеваний, вызываемых грамотрицательными бактериями, в нормативы включено определение их количества в 1 м³ воздуха помещений ЛПО.

Воздух аптечных помещений

из-за наличия антимикробных препаратов могут быстро погибать бактерии, но сохраняться грибы, поэтому их обязательно необходимо выявлять при исследовании воздуха аптек.

Дополнительные критерии

Показатель запылённости и отсутствия влажной уборки - присутствие спорообразующих палочек

Показатель повышенной влажности — плесневые грибы.

Показатель плохой освещённости — отсутствие пигментообразующих форм бактерий (иногда этот показатель может быть определён по заданию фтизиатров).

Способы очистки и обеззараживания воздуха

Физические

химические

Физические способы очистки и обеззараживания воздуха

вентиляция,

фильтрация,

ультрафиолетовое облучение.

Вентиляция — высокоэффективный способ снижения микробного обсеменения воздуха. Загрязненный воздух удаляется из помещений, а на его место поступает более чистый воздух из атмосферы.

Фильтрация повышает эффективность вентиляции. Фильтры, пропитанные специальной пылесвязывающей жидкостью, задерживают до 90—95% микробов и частиц пыли, содержащихся в воздухе.

Свет губительно действует на микроорганизмы.

Наибольшей бактерицидностью обладают лучи с короткой волной и сильным фотохимическим действием (ультрафиолетовая часть спектра).

Высокое бактерицидное действие УФ широко используют для обеззараживания воздуха производственных цехов, холодильных камер на предприятиях мясной, молочной, биологической и бродильной промышленности, для стерилизации воздуха в операционных, боксах и других больничных помещениях. Для этого применяют бактерицидные увиолевые лампы разной мощности.