- •Лф, фиу, пф. Занятие № 27
- •27А. Основные положения
- •27В. Теоретический материал Методы лабораторной диагностики микозов
- •Общая классификация микозов
- •Рубромикоз (руброфития)
- •Эпидермофития паховая (крупных складок)
- •Эпидермофития стоп
- •Трихофития
- •Микроспория
- •Фавус (парша)
- •Общая характеристика микозов, вызываемых условно-патогенными грибами
- •Аспергиллез
- •Кандидоз
- •Фикомикоз
- •Пневмоцистоз
- •Общая характеристика патогенных простейших
- •Факторы вирулентности простейших
- •Антигенная структура простейших
- •Инвазии
- •Особенности иммуно-, химиопрофилактики и химиотерапии протозойных инвазий
- •Методы лабораторной диагностики инвазий
- •Малярия
- •Токсоплазмоз
- •Криптоспоридиоз
- •Амёбиаз
- •Лямблиоз
- •Мочеполовой трихомоноз
- •Ассоциативные инфекции простейших с хламидиями, микоплазмами, гонококком
- •27Г. Тестовые вопросы по теме занятия
27В. Теоретический материал Методы лабораторной диагностики микозов
Микотическая диагностика проводится с использованием микроскопического, культурального, и иммунологических методов исследования.
Микроскопия является одним из основных методов выявления возбудителя при микозах.
Часто прибегают к микроскопии неокрашенных препаратов. Микроскопия методом раздавленной или висячей капли позволяет выявить структуры грибов в клинических образцах жидкой консистенции. Для визуализации структур возбудителя в фрагментах кожи, ногтях, волосах и других клинических образцах с большим количеством клеток, содержащих кератин, исследуемый материал предварительно обрабатывают 10% КОН. Едкий кали разрушает кератин, оставляя неизменёнными клетками грибов.
В ряде случаев применяют различные методы окраски мазков из патологического материала: по Граму (при грибы представлены грамположительными клетками), по Романовскому-Гимзе, с использованием реактива Шиффа (для выявления полисахаридов клеточных стенок грибов) и т.д.
Проводят также прямую РИФ для выявления в гистологических препаратах антигенов возбудителя.
При выделении культур грибов используют среды с кислым рН, на которых рост бактерий затруднён. Чаще всего используют среду Сабуро (пептонный агар с большим содержанием мальтозы или глюкозы). Для придания питательным средам селективных свойств в них добавляют антибиотики (пенициллин, стрептомицин, гентамицин, левомицетин). Обычно делают парные посевы (при 25°С и 37°С) для выявления возможного диморфизма. Идентификацию возбудителя проводят по морфологическим и биохимическим признакам. Культуральный метод диагностики микозов требует для своего осуществления нескольких недель.
Иммунологические методы при диагностике микозов используют для обнаружения антител или антигенов возбудителя, а также для выявления состояния специфической сенсибилизации.
К результатам серологических реакций при микозах следует относиться осторожно, так как грибы содержат большое количество перекрёстно реагирующих антигенов. Тем не менее обнаружение специфических антител в сыворотке крови или антигенов возбудителя в крови, ликворе и моче позволяет установить диагноз до получения результатов посевов. Чаще используется латекс-агглютинация (выявляет IgM), РСК (выявляет IgG) и ИФА.
Диагностическую ценность ранее очень популярных при диагностике микозов кожно-аллергических проб ограничивает их неспецифичность. Однако их до сих пор применяют, например, для анализа иммунных популяций при эпидемиологических исследованиях.
Для диагностики системных микозов в настоящее время разработан метод определения нуклеиновых кислот. С этой целью из культуры возбудителя экстрагируется РНК и смешивается с молекулами одноцепочечной ДНК, меченой флюоресцеином. В положительном случае происходит гибридизация соответствующей ДНК с РНК патогена и образуется легко обнаруживаемый комплекс.
Общая классификация микозов
Микозы можно классифицировать на четыре основные группы: системные (или глубокие) микозы, субкутанные (или подкожные) микозы, поверхностные микозы (для обозначения этой группы микозов используются также термины: дерматомикозы, дерматофитии), микозы, вызываемые условно-патогенными грибами.
Системные (глубокие) микозы встречаются в определённых географических зонах, в которых многие люди инфицированы данными возбудителями. Однако клинические симптомы заболевания у большинства из них не проявляются или выражены слабо. И лишь у небольшого процента инфицированных заболевание прогрессирует, развиваются его тяжёлые формы, а системные поражения могут даже вызвать летальный исход. Возбудители системных микозов – почвенные грибы, которые могут обитать также на разрушающихся органических остатках.
При субкутанных (подкожных) микозах основные поражения локализуются в подкожной клетчатке. Выделение этих микозов в самостоятельную группу не общепринято.
При поверхностных микозах (дерматомикозах, дерматофитиях) поражаются преимущественно кожа и её придатки – волосы и ногти. Встречаются повсеместно. Именно эта группа грибковых поражения составляет основную массу диагностируемых в Беларуси микозов.
Поверхностные микозы классифицируются, в свою очередь на кератомикозы, эпидермомикозы и трихомикозы.
При кератомикозах поражаются поверхностные отделы рогового слоя эпидермиса без видимой воспалительной реакции со стороны нижележащих слоёв дермы.
При эпидермомикозах поражаются роговой слой эпидермиса, ногти и, как правило, присоединяется аллергическое воспаление в дерме. К эпидермомикозам относятся рубромикоз (руброфития), паховая эпидермофития (или эпидермофития крупных складок), эпидермофития стоп. В литературе встречается термин «микоз стоп», которым объединяют эти три нозологические формы грибковой инфекции.
При трихомикозах поражаются не только эпидермис, дерма и ногти, но и волосы. К трихомикозам относятся трихофития, микроспория и фавус (парша).
И, наконец, к микозам, вызываемым условно-патогенными грибами, относятся аспергиллез, кандидоз, фикомикоз, пневмоцистоз.