Ситуационные задачи.

1. На препарате мазка крови видны две крупные клетки со слабо базофильной цитоплазмой. У одной клетки ядро бобовидной, у другой – округлой формы. Назовите эти клетки.

2. У больного в крови обнаружено увеличенное содержание эритроцитов. Как называется это состояние?

Задание к следующему занятию: подготовиться к опросу по теме «Гемоцитопоэз. Макрофагальная система».

Лабораторная работа №4

Тема: Гемоцитопоэз. Макрофагальная система.

Цель: изучить гистогенез клеток крови и макрофагальную систему организма.

Задачи:

1. детально разобрать постэмбриональное кроветворение от стволовой клетки по шести направлениям миелопоэза и двум направлениям лимфопоэза;

2. рассмотреть особенности строения центральных органов кроветворения (красного костного мозга и тимуса);

3. ознакомиться с макрофагальной системой лимфоузла.

Оснащение:

1. Микроскопы.

2. Микропрепараты.

3. Атласы.

Кроветворная система в целом представляет собой открытую систему, находящуюся в стационарном состоянии, при котором в ней поддерживается определенное соотношение между разными клеточными популяциями. Основные признаки системы:

1. Исходной кровяной клеткой является малодифференцированная стволовая клетка.

2. Существуют факторы, индуцирующие дифференцировку стволовых клеток - эритропоэтин, гранулопоэтин, тромбоцитопоэтин.

3. Установлена роль тимуса и антигенов в дифференцировке и пролиферации элементов лимфоидного ряда.

Для гемоцитопоэза характерны четыре популяции клеток:

1. Самоподдерживающаяся стволовая клетка (СКК) - малодифференцированный полипотентный предшественник всех типов клеток. Обычно СКК редко делятся, хотя при некоторых условиях их пролиферативная активность может быть усилена. Они способны как бы ощущать величину популяции, поддерживая ее на определенном уровне. Часть этих клеток все время переводится в следующую популяцию.

Таким образом, эта популяция не имеет «входа», но снабжена «выходом». Существенную роль в регуляции объема популяции играют механизмы обратной связи. СКК возникают в эмбриональный период и сохраняются в течение всей жизни.

2. Делящаяся транзитная популяция - не является исходной и не может существовать без пополнения ее извне. Ее клетки способны к митозу. Пополнение идет за счет стволовых клеток.

Таким образом, эта популяция снабжена «входом» и «выходом». К этой популяции относятся гемоцитобласты, промиелоциты, эритробласты. После определенного числа делений клетки переходят в следующую популяцию.

3. Простая, или неделящаяся транзитная популяция - клетки претерпевают существенные изменения, связанные с дифференцировкой. Они готовятся к функционированию. Не способны к самоподдержанию, так как в этот период они не делятся. Могут переходить в следующую популяцию.

Пополнение третьей популяции происходит за счет клеток предшествующей популяции. К третьей популяции относятся нормобласты и т.д.

4. Популяция дифференцированных клеток - клетки находятся в кровяном русле, пополняются только за счет предшествующей популяции. В конечном итоге - гибнут (эритроциты, лейкоциты, лимфоциты).

Родоначальные кроветворные клетки в наибольшем количестве находятся в красном костном мозге. Их морфология: очень похожи на малые лимфоциты, но имеют более рыхлые ядра, несколько больше цитоплазмы, очень мало митохондрий, практически нет ЭПС.

СКК - полипотентны, т.е. для всех ростков кроветворения существует общая стволовая клетка, выбирающая направление дифференцировки, в зависимости от конкретных условий, в которые она попадает.

Органы кроветворения и иммуногенеза развиваются из мезенхимы, делятся на центральные и периферические.

1. Центральные (иммунопоэз): красный костный мозг (кроветворение); тимус (антигеннезависимое размножение лимфоцитов).

2. Периферические (лимфоидные): лимфоузлы, селезенка, узелки ЖКТ (размножение приносимых сюда из центральных органов Т- и В-лимфоцитов и дифференцировка их под влиянием антигенов в эффекторные клетки; гибель клеток крови).

В основе органов кроветворения лежит ретикулярная или эпителиальная ткань, которая образуют строму и играет роль специального микроокружения. Располагается: по ходу лимфососудов (лимфоузлы), по ходу кровеносных сосудов (красный костный мозг, селезенка). Функции: кроветворение; депо крови; защита (фагоцитоз, иммуногенез).

Главными клетками, осуществляющими контроль и иммунологическую защиту в организме, являются лимфоциты, плазмоциты, макрофаги. Постоянно перемещаясь, они осуществляют «иммунный надзор» - узнают чужие макромолекулы и осуществляют специфическую защитную реакцию.

Задание: рассмотреть рисунок. Найти и обозначить:

ц ентральные органы кроветворения

• красный костный мозг эпифизов трубчатых костей;

• тимус;

периферические органы кроветворения

• лимфоидную систему слизистых оболочек миндалин, тонкой кишки, аппендикса, воздухоносных путей;

• лимфатические узлы;

• селезенку.

Обратите внимание, что до 12-18 лет красный костный мозг диафизов трубчатых костей также является центральным органом кроветворения.

Задание: рассмотреть и зарисовать препараты по теме занятия.

Препарат 1. Красный костный мозг.

Перед изучением препарата ознакомиться со схемой «Строение красного костного мозга» в атласе. Рассмотреть незрелые клетки эритропоэтического и гранулоцитопоэтического островков, а также прочих гемопоэтических клеток и других компонентов красного костного мозга. Затем перейти к изучению в атласе мазков красного костного мозга. После можно приступать к рассмотрению и зарисовке микропрепарата.

Сначала при малом, а затем при большом увеличении рассмотреть препарат и найти: заполненные кровью широкие синусоидные капилляры (1) и в них эндотелиальные клетки (2), миелоидную ткань и в ней темно-фиолетовые ядра гемопоэтических клеток (3). Различить среди них отдельные виды клеток обычно весьма трудно. Исключение составляют мегакариоциты (4) – легко заметные крупные многоядерные клетки.

Препарат 2. Тимус.

На малом увеличении микроскопа хорошо видна капсула тимуса (1), образованная плотной волокнистой соединительной тканью и отходящие от капсулы соединительнотканные перегородки (2) в виде белых прослоек. Они отграничивают дольки тимуса (3), в которых хорошо заметно корковое и мозговое вещество.

Корковое вещество (4) лежит на периферии и выглядит более темным, т.к. заселено лимфоцитами. Мозговое вещество (5) более светлое и находится в центре дольки. На большом увеличении рассмотреть и зарисовать в подкапсулярной области коркового вещества Т-лимфобласты (6) (более крупные и светлые, чем зрелые Т-клетки) и созревающие Т-лимфоциты (7), занимающие основную часть коркового вещества. Также отметить кровеносные капилляры (8). Они участвуют в образовании гематотимусного барьера, который оберегает созревающие клетки от контакта с антигенами. Значительная часть созревающих Т-клеток погибает, оставшиеся поступают в капилляры на границе с мозговым веществом и разносятся по периферическим лимфоидным органам.

В мозговом веществе содержатся рециркулирующие Т-лимфоциты (9), которые попадают в тимус повторно из крови.

Препарат 3. Накопление краски в лимфоузле. Инъекция красителя.

Животному in vivo введен краситель и через некоторое время после этого приготовлен препарат лимфоузла.

На малом увеличении микроскопа найти мозговые тяжи лимфоузла (1), окрашенные красителем в розовый цвет и мозговые синусы (2), заполненные клетками, накопившими частички краски синего цвета.

Перевести микроскоп на большое увеличение и зарисовать участок синуса лимфоузла с крупными макрофагами (3), находящимися в просветах синуса и береговыми клетками и макрофагами (4), выстилающими стенки синусов. В отличие от макрофагов, заполненных частичками краски, лимфоциты (5) не содержат частиц краски.

Задание: 1) Нарисовать в альбоме и начать заполнять таблицу 3.

2) Нарисовать в альбоме схему постэмбрионального кроветворения, используя схему, приведенную в атласе.

Схема должна обязательно включать:

1. единый источник происхождения всех клеток крови – стволовые клетки;

2. 6 направлений миелопоэза (образование эритроцитов, моноцитов, тромбоцитов и трех видов гранулоцитов) и 2 направления лимфопоэза (образование Т- и В-лимфоцитов);

3. в каждом из этих путей дифференцировки должны быть изображены 6 классов клеток:

   1. стволовые клетки,

   2. полустволовые клетки,

   3. унипотентные клетки,

   4. бласты,

   5. созревающие клетки,

   6. зрелые клетки.

Таблица 3. Структурная и функциональная характеристика тканей внутренней среды

Название ткани	Особенности строения				Функция
	Клетки	Межклеточное вещество
		количество	консистенция	волокна
Кровь
Лимфа
Ретикулярная
РВСТ
ПВСТ
Гиалиновый хрящ
Эластический хрящ
Волокнистый хрящ
Костная грубо-волокнистая
Костная пластинчатая

Задание к следующему занятию: подготовиться к опросу по теме «Волокнистые соединительные ткани. Ткани со специальными свойствами».