- •Билет №3
- •Билет №4
- •Билет №5
- •Билет №7
- •Билет №8
- •Тимоловая проба
- •Билет №11
- •Высаливание белков
- •Исследование денатурации белков
- •Билет №12
- •Билет №13
- •Биуретовая реакция
- •Ксантопротеиновая реакция
- •Реакция Миллона
- •Билет №14
- •Тимоловая проба
- •Билет №15
- •Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы
- •Билет №16
- •Билет №17
- •Билет №18
Билет №13
1)
Сущность действия ферментов, так же, как неорганических катализаторов за-
ключается:
1) в активации молекул реагирующих веществ
2) в разбиении реакции на несколько этапов, энергетический барьер каждого из
которых ниже такового исходной реакции.
N.B. Однако энергетически невозможные реакции ферменты катализировать не
будут, они ускоряют только те реакции, которые могут идти самопроизвольно в дан-
ных условиях.
1. Кислотно-основной катализ – в ак-
тивном центре фермента находятся группы
специфичных аминокислотных остатков,
которые являются хорошими донорами или
акцепторами протонов. Такие группы пред-
ставляют собой мощные катализаторы
многих органических реакций.
2. Ковалентный катализ – ферменты реагируют со своими субстратами, образуя
очень нестабильные, ковалентно связанные, фермент-субстратные комплексы, из
которых в ходе последовательных реакций образуются продукты.
Сходство и отличия ферментов и неорганических катализаторов
2)
Суточная потребность
Около 2 мг.
Источники
• филлохиноны – капуста, крапива, рябина, шпинат, тыква, арахисовое масло,
печень;
• нафтохиноны – образуются микрофлорой в тонком кишечнике.
Гиповитаминоз
Наблюдается кровоточивость, снижение свертываемости крови, легкое возник-
новение подкожных гематом,.у женщин отмечаются обильные mensis.
Лекарственные формы
Викасол, настои крапивы
Антивитамины К:
Вещества варфарин и дикумарол связыва-
ются с ферментом редуктазой и блокируют
восстановление неактивной формы витамина К
в активную (см схему в «Биохимические функ-
ции» витамина К).
3)
Биуретовая реакция
Универсальная реакция на обнаружение пептидной связи в белках и пептида^. Биуретовую реакцию дают вещества, содержащие не менее двух пептидных группировок.
Принцип реакции Пептидная группа образует в щелочной среде с ионами Си21" комплексное соединение фиолетового цвета с красным или синим оттенком в зависимости от числа пептидных связей. Интенсивность окрашивания пропорциональна количеству пептидных групп.
Проведение анализа В пробирку с раствором белка вносят 3 капли 10% NaOH и 1 каплю CuS04.
Ксантопротеиновая реакция
Это реакция на ароматические аминокислоты (фенилаланин, тирозин, триптофан).
Принцип метода
Ароматическое кольцо при взаимодействии с концентрированной азотной кислотой образует динитросоединение желтого цвета.
Проведение анализа К раствору белка добавляют 2 капли концентрированной азотной кислоты и осторожно нагревают. Наблюдают за появлением желтого окрашивания переходящее при добавлении 30% NaOH в оранжевое.
Реакция Миллона
Эта реакция позволяет выявить фенольное кольцо тирозина.
Принцип метода При нагревании с реактивом Миллона образуется ртутная соль нитротирозина пурпурно-красного цвета.
Проведение анализа В раствор белка добавляют 3 капли реактива Миллона (раствор нитратов ртути (I) и (II) в HN03 с примесью HN02). Осторожно нагревают. Белый осадок белка при нагревании окрашивается в кроваво-красный цвет.