- •1. Микрофлора полости рта, её состав и характеристика, Методы изучения
- •1.1. Полость рта как экологическая ниша организма
- •Характеристика микрофлоры полости рта
- •Основные группы резидентной флоры полости рта по морфологии и типу дыхания
- •1.2. Изменения микробной флоры полости рта в зависимости от возраста. Влияние протезов на состав микрофлоры полости рта
- •1.3. Дисбактериоз полости рта
- •Изменение состава микрофлоры
- •Механизмы резистентности полости рта
- •2.1.Факторы неспецифической и специфической защиты Полости рта
- •2.2. Противовирусная резистентность
- •Микробиологическое исследование материала из полости рта
- •3.1. Способы забора материала для исследования микрофлоры полости рта
- •Исследование зубной бляшки
- •Методика взятия материала зубной бляшки
- •Методика дисперсии материала бляшки
- •Микроскопический подсчет, подсчет выживаемости микробов при культивировании
- •Бактериологический метод исследования материала при патологии полости рта и челюстно-лицевой области
- •I этап бактериологического исследования - получение изолированных колоний.
- •II этап бактериологического метода –выделение чистой культуры
- •III этап бактериологического метода – идентификация чистой культуры.
- •4. Условно-патогенные грамположительные микроорганизмы как возбудители Гнойно-воспалительных процессов полости рта.
- •4.1. Стафилококки
- •I этап
- •II этап
- •III этап
- •Определение чувствительности к антибиотикам Идентификация чистой культуры
- •4.2. Cтрептококки
- •Стрептококки группы в
- •Энтерококки
- •I этап Бактериоскопическое Бактериологическое исследование исследование
- •II этап
- •III этап
- •4.3. .Коринебактерии
- •5. Условно-патогенные грамотрицательные микроорганизмы как возбудители гнойно-воспалительных процессов полости рта
- •Эндотоксин
- •Термолабильные и термостабильные энтеротоксины
- •6. Анаэробные микроорганизмы полости рта. Их роль в патологии, принципы выделения и идентификации.
- •Грамотрицательные неспорообразующие облигатно-анаэробные бактерии
- •Дифференциальные биохимические свойства видов рода Fusobacterium
- •Микроорганизмы рода Veillonella.
- •Микроорганизмы рода Prevotella
- •Микроорганизмы рода Actinomyces
- •7. Заболевания слизистой оболочки полости рта вирусной, бактериальной и грибковой этиологии микробная флора при стоматитах
- •Кандидоз
- •Герпангина
- •Туберкулез
- •Скарлатина.
- •Сифилис.
- •Микробиологическая диагностика сифилиса
- •Дифференциальные признаки кариесогенных стрептококков
- •9. Микробиология заболеваний пародонта. Роль микробной флоры полости рта при заболеваниях пародонта
- •Микрофлора здорового пародонта
- •Микрофлора при гингивите
- •Микрофлора при пародонтите
- •10. Микробная флора при одонтогенном воспалении
- •Основные возбудители
- •Микробная флора при пульпитах Основные возбудители - зеленящие стрептококки (s.Milleri), неспорообразующие анаэробы: Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp., Actinomyces spp.
- •Микробная флора при периодонтитах
- •Микробная флора при абсцессах, флегмонах и фасциитах челюстно-лицевой области
- •Буккальный целлюлит
- •Лимфаденит лица и шеи
- •11. Хронические очаги инфекции в полости рта
- •Антигенное воздействие микробов на организм
- •12. Принципы обработки инструментария в стоматологии
- •12.1. Организация текущих санитарно-гигиенических мероприятий в стоматологических терапевтических кабинетах и отделениях
- •Дезинфекция и стерилизация стоматологического инструментария и оборудования
- •Дезинфекция
- •Предстерилизационная очистка
- •Стерилизация
- •Контроль качества проведения дезинфекционно- стерилизационных мероприятий.
- •12.2. Современные технологии дезинфекции и стерилизации стоматологического инструментария
- •12.3. Дезинфекция, предстерилизационная обработка и стерилизация в ортопедической стоматологии
- •Отметить особенности антибиотикочувствительности микроорганизмов рода Porphyromonas:
- •Микроорганизмы рода Porphyromonas представляют собой:
- •Тема: стоматиты грибковой, вирусной и бактериальной природы.
- •Укажите характерные морфологические свойства грбов рода Сandida
- •Грибы относят к
- •Отметить характерные свойства грибов
- •Материалом для проведения микробиологической диагностики кори
- •Какими молекулярно-биологическими исследованиями можно
- •Оглавление
- •Микрофлора полости рта, её состав и характеристика, Методы изучения ………………………………………………………..
- •Оглавление
- •1. Микрофлора полости рта, её состав и характеристика, Методы изучения ………………………………………………………..4
- •1.1. Полость рта как экологическая ниша организма 4
- •12.2. Современные технологии дезинфекции и стерилизации стоматологического инструментария ……163
II этап бактериологического метода –выделение чистой культуры
Выполняется на жидких (тиогликолевая среда, среда Китта-Тароцци, сердечно-мозговой бульон) или полужидких средах (с добавлением 0,5% агар-агара). Материал из изолированной колонии переносят в пробирку с одной из указанных сред, которые затем желательно поместить в анаэростат. Чистые культуры получают через 3-5 дней культивирования при температуре 37° С.
III этап бактериологического метода – идентификация чистой культуры.
Для определения вида выделенной при анаэробном культивировании чистой культуры используется определение комплекса морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических и других фенотипических свойств.
4. Условно-патогенные грамположительные микроорганизмы как возбудители Гнойно-воспалительных процессов полости рта.
4.1. Стафилококки
Стафилококки относят к семейству Microсоссасеае, роду Staphylococcus. Бактерии распространены повсеместно; колонизируют кожные покровы и поверхности слизистых оболочек человека и животных.
Морфология.
В мазках расположены одиночно, парами или гроздьями, неподвижными клетками диаметром 0,5-1,5 мкм, образуют скопления, напоминающие гроздья винограда в результате деления во взаимно перпендикулярных плоскостях, грамположительны.
Культуральные свойства.
Стафилококки устойчивы к повышенному содержанию хлорида натрия и хорошо растут на средах с содержанием 5-10% NaCl. На плотных средах через 18-24 ч культивирования в аэробных условиях бактерии формируют мутные круглые ровные колонии кремового, жёлтого или оранжевого цвета. Стафилококки каталаза-положительны, оксидаза отрицательны.
По наличию коагулазы все стафилококки разделяют на две группы. Среди коагулаза-положительных стафилококков поражения у человека вызывает лишь S. aureus; среди коагулаза-отрицательных видов — S. epidermidis и S. saprophyticus
Биохимические свойства Бактерии проявляют высокую биохимическую активность: восстанавливают нитраты, вырабатывают H2S, разлагают мочевину и ферментируют многие углеводы с образованием кислоты.
Антигеннные свойства У стафилококков выделяют более 50 антигенных субстанций, разделяемых на родовые, видовые и типовые Аг. Видоспецифичными Аг стафилококков могут служить тейхоевые кислоты. Для S. aureus видоспецифичным Аг также является белок А.
Резистентность к факторам внешней среды. Стафилококки хорошо переносят высушивание, сохраняя вирулентность; погибают при прямом воздействии солнечного света в течение 10-12 ч., довольно устойчивы к нагреванию— при 70-80 °С погибают за 20-30 мин, при 150 °С — за 10 мин; сухой жар убивает их за 2 ч. Бактерии менее устойчивы к действию дезинфицирующих средств, но резистентны к чистому этанолу.
Роль в патологии
Золотистый стафилококк (S. aureus) вызывает кожные гнойничковые инфекции, раневые инфекции, бактериемию, эндокардиты, пневмонии, остеомиелиты, перитониты, инфекции мочевыводящей системы, пищевые токсикоинфекции, инфекции глаз, инфицирование сосудистых протезов.
S. saprophyticus колонизирует кожные покровы половых органов и слизистую оболочку мочеиспускательного канала. Колонизацию эпителия мочевыводящих путей обусловливают поверхностные рецепторы, а также ферменты патогенности, вызывают циститы, пиелонефриты и эндокардиты.
Факторы патогенности
Адгезины — поверхностные белки, взаимодействующие с различными веществами слизистых оболочек, протеогликанами соединительной ткани, белками внеклеточного матрикса и др.
Капсула защищает бактерии от комплемент-опосредованного поглощения полиморфно-ядерными фагоцитами, способствует адгезии микроорганизмов.
Компоненты клеточной стенки стимулируют развитие воспалительных реакций: усиливают синтез ИЛ-1 макрофагами, активируют систему комплемента и служат мощными хемоаттрактантами для нейтрофилов.
Тейхоевые кислоты активируют систему комплемента по альтернативному пути, свёртывающую и калликреин-кининовую системы, а также облегчают адгезию бактерий к эпителиальным поверхностям.
Белок А неспецифически связывает Fc-фрагменты молекул IgG , активирует систему комплемента по классическому и альтернативному путям, усиливает активность естественных киллеров.
Ферменты
Каталаза разрушает Н202, защищая бактерии от действия токсических кислородных радикалов.
- лактамазы разрушают молекулы β-лактамных антибиотиков.
Липазы облегчают адгезию и проникновение в ткани.
Коагулаза вызывает свёртывание плазмы крови, образуется фибриновая плёнка, защищающая микроорганизм.
Ферменты патогенности - гиалуронидаза, дезоксирибонуклеаза, фибринолизин, стафилокиназа, лецитиназа и др.
Токсины
Мембранотоксины (стафилолизины, или гемолизины). Стафилолизины обусловливают гемолитическую активность стафилококков на средах с кровью.
α-токсин имеет наибольшее значение, его часто выявляют у бактерий, выделенных из клинических образцов, взаимодействует с клеточной мембраной, разрушая её.
β-токсин (сфингомиелиназа), холодовой гемолизин.
µ-токсин — двухкомпонентный гемолизин.
δ-токсин — агрегат низкомолекулярных соединений, проявляющих детергентные свойства; последние обусловливают цитотоксичность широкого спектра.
ЭксфолиатиныАиВ. Эксфолиатины вызывают разрушение эпидермиса и отслойку рогового слоя. Синтез токсина А (термостабильного) контролируют хромосомные, а токсина В (термолабильного) — плазмидные гены.
Токсин синдрома токсического шока— энтеротоксин F) — экзотоксин, обусловливающий развитие специфического симптомокомплекса. Синтез токсина кодируют гены умеренных фагов.
Лейкоцидин. Мишени действия токсина — нейтрофилы и макрофаги. Он нарушает водно-электролитный баланс в клетке, повышает внутриклеточное содержание циклического АМФ.
Энтеротоксины А, В, С, D, Е — термостабильные низкомолекулярные белки. Основные продуценты — бактерии III фагогруппы. Токсины ответственны за развитие пищевых отравлений. Наиболее часто регистрируют интоксикации, вызываемые энтеротоксинами А и D.
Роль в патологии
Бактерии способны поражать практически любые ткани организма человека. Инфекции, вызываемые S. aureus, включают более 100 нозологических форм.
Внебольничные пневмонии, вызванные S. aureus, регистрируют достаточно редко, но в стационарах этот микроорганизм — второй по значимости возбудитель после синегнойной палочки.
Стафилококковые бактериемии у госпитализированных больных развиваются при проникновении S. aureus через катетеры, из ран или очагов кожных поражений. Циркуляция возбудителя в кровотоке приводит к развитию метастатических поражений различных органов.
Золотистый стафилококк — основной возбудитель инфекций опорно-двигательного аппарата (остеомиелиты, артриты и др.); в частности, он вызывает 70-80% септических артритов у подростков, реже у взрослых (особенно страдающих ревматизмом или с протезированными суставами).
Приблизительно у 10% больных с бактериемией может развиться эндокардит. В результате инфекций придаточных пазух носа, носоглотки, уха и сосцевидного отростка, а также бактериемии возбудитель может проникать в ЦНС и вызывать образование эпидуральных абсцессов и гнойных внутричерепных флебитов.
Синдром токсического шока — эндотоксиновая инфекция, развивающаяся при заражении штаммами, синтезирующими токсин TSST-1 и энтеротоксины В и С, пищевые отравления.
Микробиологическая диагностика
Бактериологический метод - выделение возбудителя и его идентификация. Посев биоматериала проводят на простые питательные среды, обычно на тиогликолевую среду и кровяной агар. Используют молочно-солевой (или молочно-желточно-солевой) агар и солевой агар с маннитом, на них рост контаминирующей микрофлоры угнетает высокая концентрация NaCl. На молочно-солевом агаре (МСА) хорошо проявляется способность к пигментообразованию и разложению лецитина (лецитовителазная активность), используют дифференциально-диагностическую среду - агар с колистином и налидиксовой кислотой.
Через 18-24 ч S. aureus образует гладкие выпуклые мутные колонии диаметром около 4мм. Бактерии синтезируют жёлтый пигмент, цвет колоний варьирует от белого до оранжевого, на кровяном агаре колонии S. aureus окружены зоной полного гемолиза.
Стафилококки хорошо растут на бульоне, сначала вызывая его равномерное помутнение, на среде с желатином вызывают через 24-28 ч разжижение среды.
Для внутривидовой дифференцировки S. aureus применяют коагулазный тест, cпособность ферментировать маннит в анаэробных условиях, лецитовителазную активность, способность синтезировать ДНКазу, способность агглютинировать сенсибилизированные эритроциты барана.
Для экспресс-идентификации применяют тест латекс-агглютинации с использованием коммерческих наборов частиц латекса, нагруженных антителами к антигенам стафилококков.
Рис. 1
Микробиологическое исследование при стафилококковой инфекции
Гной, раневое отделяемое, экссудат, мокрота, моча и др.
Характер колоний
|
Мазок,
|
Лецитиназная активность (ЖСА)
|
Гемолиз (кровяной агар)
|
|
Предварительный ответ
|
4; —— ——
Бактериоскопическое исследование
Мазок, окраска по методу Грама
|
|