- •Вопрос №1 «история вирусологии. Роль вирусов в инфекционной патологии животных человека».
- •Вопрос №2 «предмет и задачи общей и частной ветеринарной вирусологии. История открытия вирусов. Достижения отечественной вирусологии».
- •Вопрос №3 «принципы современной классификации вирусов, основные группы вирусов».
- •Вопрос №4 «химически состав и физическая структура вирусов. Понятие о вирионе, капсиде, капсомере. Тип симметрии.
- •Химический состав вирусов.
- •Особенности вирусных белков:
- •Вопрос №5 «устойчивость вирусов к физико-химическим факторам. Практическое испольование этих свойств».
- •Вопрос №6 «вирусные нуклеиновые кислоты. Их разновидности, структуры, основные свойства.
- •Вопрос №7 «белки вирусов, их особенности (характеристика свойств нейраминидаз и антигенов миксовирусов)».
- •Вопрос №8 «периоды и этапы репродукции вирусов. Типы взаимодействия».
- •Вопрос №9 «особенности биосинтеза днк-содержащих вирусов. Понятие транскрипции и трансляции».
- •Вопрос №10 «типы взаимодействия, основные исходы взаимодействия вируса с клеткой».
- •Вопрос №13 «правила взятия патматериала от больных и павших животных при подозрении на вирусные болезни. Транспортировка и подготовка его для вирусологических исследований.
- •Вопрос №14 «методы консервирования вирусов и их практическое значение».
- •Вопрос №15 «правила работы в вирусологической лаборатории. Техника безопастности при работе с вирусосодержащим материалом».
- •Вопрос №16 «схема лабораторной диагностики вирусных инфекций».
- •Вопрос №17 «клинико-эпизоотологическая диагностика вирусных болезней животных, сущность, значение».
- •Вопрос №18 «методы обнаружения вируса в патматериале».
- •Вопрос №23, 25 «ртга и ее использование в вирусологии. Достоинства и недостатки».
- •Вопрос №26 «рдп. Иммунологическая основа меода, постановка и учет результатов. Достоинства и недостатки».
- •Вопрос №27 «рск. Иммунологическая основа и характеристика компонентов реакции».
- •Вопрос №28 «титр вирусов и принципы его определения в единицах 50%-ого инфекционного действия».
- •Вопрос №29 «биологическая характеристика вируса ящура. Принцип диагностики»
- •Вопрос №32 «современная классификация иммунитета. Структура ат характеристика различных классов иммуноглобулинов и их строение».
- •Вопрос №33 «особенности противовирусного иммунитета».
- •Вопрос №34 «роль лимфоидных клеток в противовирусном иммунитете (характеристика т и в лимфоцитов)».
- •Вопрос №35 «роль клеточных факторов в противовирусном иммунтитете».
- •Вопрос №36 «роль гуморальных факторов в противовирусном иммунитете»
- •Вопрос №37 «противовирусные ат, их свойства, биологическая роль, методы обнаружения и титрования».
- •Вопрос №38 «интерферон и его роль в противовирусном иммунитете».
- •Вопрос №39 «принцип получения бактериофагов. Определение активности и практическое использование фагов».
- •Вопрос №40 «пассивная специфическая профилактика вирусных болезенй. Принцип получения».
- •Вопрос №41 «специфическая профилактика вирусных болезней. Виды вакцин и методы их введения».
- •Вопрос №42 «инактивированные противовирусные вакцины, их получение, свойства, применение, отличие от живых вакцин».
- •Вопрос №43 «факторы противовирусного иммунитета, их характеристика».
- •Вопрос №44 «живые противовирусные вакцины, их свойства, применение и отличия от инактивированных вакцин».
- •Вопрос №45 «бактериофаги, их значение и основные свойства».
- •Вопрос №46 «лабораторыне животные, цели и методы их использования в вирусологии».
- •Вопрос №47 «строение развивающегося куриного эмбриона. Основные задачи, решаемые методом заражения кэ и его преимущества перед культивированием вирусов на лабораторных животных.
- •Вопрос №48 «виды культур клеток и их использование в вирусологии. Краткая характеристика каждого вида».
- •Вопрос №49 « первично-трипсинизированные культуры клеток. Их достоинсва и недостатки. Применение в вирусологических исследованиях».
- •Вопрос №50 «питательные среды и растворы, используемые в вирусовлогии. Требования к посуде для культивирования кк, ее обработка».
- •Вопрос №51 «принцип заражения культур клеток вируссодержащим материалом. Индикация вирусов в культуре клеток».
- •Вопрос №52 «методы обнаружения вирионов вирусов и вирусных телец-включений, их практическе значение».
Вопрос №27 «рск. Иммунологическая основа и характеристика компонентов реакции».
Реакция связывания комплемента (РСК) — одна из традиционных серологических реакций, применяемых для диагностики многих вирусных болезней. Само название в значительной мере отражает суть метода, состоящего из двух отдельных этапов. На первом этапе участвуют антиген и антитело (один из этих ингредиентов заранее известен), а также определенное количество предварительно оттитрованного комплемента. При соответствии антигена и антитела их комплекс связывает комплемент, что выявляют на втором этапе с помощью индикаторной системы (смесь бараньих эритроцитов и антисыворотки к ним — гемолизина). Если комплемент связался при взаимодействии антигена и антитела, то лизиса эритроцитов не происходит (положительная РСК). При отрицательной РСК несвязанный комплемент способствует гемолизу эритроцитов (рис. 80).
РСК часто используют в диагностической практике для обнаружения и идентификации вирусов, обнаружения и титрования антител в сыворотках крови.
Основными компонентами РСК служат антигены (известные или выявляемые), антитела (известные антисыворотки или исследуемые сыворотки), комплемент, гемолитическая сыворотка и эритроциты барана; в качестве разбавителя используют изотонический раствор хлорида натрия (рН 7,2—7,4) или различные буферные растворы. Антигены и сыворотки могут обладать антикомплементарностью, т. е. способностью адсорбировать комплемент, что задерживает гемолиз и искажает результаты реакции. Чтобы избавиться от антикомплементарности, антигены очищают различными методами: ацетоном, фреоном, эфиром, хлороформом и т. д. в зависимости от вида ткани, используемой в качестве антигена и вируса. Сыворотки освобождают от антикомплементарности путем прогревания, обработкой комплемента и другими методами.
Антигены для РСК готовят из органов зараженных животных, из аллантоисной или амниотической жидкости зараженных куриных эмбрионов, а также из жидкой среды инфицированных культур клеток.
значительно отличается от его подготовки при бактериальных инфекциях. Это обусловлено рядом специфических свойств вирусов.
Во-первых, для освобождения вирусного антигена из клетки приходится часто дополнительно обрабатывать инфекционный материал с целью разрушения клеток и освобождения антигена.
Во-вторых, большой термолабильностью вирусных антигенов по сравнению с бактериальными. У большинства вирусов комплементфиксирующий антиген связан с инфекционной частицей, и разрушение его идет параллельно с потерей инфекционное™. Поэтому материалы для получения антигена необходимо брать от павших животных только в первые часы после гибели их, а лучше при жизни. Консервирование вируссодержащего материала различными дезинфицирующими средствами часто не дает положительных результатов, так как многие из них вызывают разрушение вирусного антигена.
В-третьих, неравномерностью фиксации комплемента при различном ношениях их; при избытке антител фиксация комплемента резко снижается, так как активный комплекс антиген + антитело представлен в основном в форме антител и активная поверхность комплемента незначительна. То же самое наблюдается и в зоне избытка антигена, где подавление фиксации комплемента происходит еще быстрее. Поэтому для установления оптимальной зоны фиксации комплемента необходимо предварительное титрование антигена и антител.
В-четвертых, незначительным объемом комплекса антиген + антитело. Размер вирусных частиц, вступающих в комплекс, очень ничтожен, и поэтому площадь фиксации комплемента незначительна. С увеличением объема комплекса антиген + антитело путем удлинения периода фиксации комплемента (до 18ч при 4 °С) повышается чувствительность реакции, но снижается ее специфичность, так как при продолжительном периоде фиксации увеличивается фиксация комплемента неспецифическими антигенами (тканевыми).
И наконец, в-пятых, высокой прокомплементарной активностью вирусного антигена. Для исключения неспецифической фиксации комплемента необходима более полная очистка вирусного антигена от тканевых фрагментов.
Большой помехой для использования РСК в диагностике вирусных болезней животных и человека является неравномерное накопление вирусного антигена в различные периоды болезни и особенно при разных инфекциях.
РСК применяют для определения типов и подтипов (вариантов) вируса ящура, вызывающих заболевание животных, для проверки производственных штаммов вируса ящура при изготовлении вакцин и лабораторных штаммов в научно-исследовательской работе.