Оспа кур
.rtfМосковская Государственная Академия Ветеринарной Медицины и Биотехнологии им. К.И.Скрябина
Москва-2007
СОДЕРЖАНИЕ:
ВВЕДЕНИЕ
ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ
ДИАГНОСТИКА
ЭМ
РДП
ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА
ОСПА ПТИЦ
Variola avium, Epitheliosis contagiosa cutis et mucosae avium, Epithelioma et diptheriae avium (лат.); Fowl pox, Bird or chicken pox and avian diphtheria, Avian pox, Contagious epithelioma, Borreliota avium (англ.); Vogelpocken, Geflugelpocken und Geflugrldiph-
therie (нем.); Variole aviaire (франц.)
ВВЕДЕНИЕ
Оспа птиц (ОП) - контагиозная болезнь кyp, голубей, канареек, скворцов, индюков, фазанов. У кур проявляется в 2-х формах: оспенной и дифтеритической. Возможно смешанное течение болезни.
Болезнь распространяется повсеместно, проявляется во все времена года, но чаще весной и осенью. Экономический ущерб заключается в резком и продолжительном снижении яйценоскости, вынужденном, убое больных и переболевших птиц.
Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Инкубационный период длится 15-20 дней, при экспериментальном заражении - 10-14 да. Общее состояние больной птицы ухудшается, аппетит исчезает, появляется вялость; у кур-несушек резко снижается яйценоскость. В дальнейшем на коже гребня, бородок, углов рта, век, иногда на оперенных частях головы, шеи, затылка, живота, конечностей, окружности клоаки, появляются бледно-желтые пятнышки. Вскоре оспинки покрываются желто-серым или красно-бурым кровянистым струпом, становятся очерченными и твердыми. Рядом расположенные оспины сливаются друг с другом, образуя небольшие бугры-бородавки. Процесс высыхания и образования струпа длится 2-3 недели. Больные куры часто склевывают друг у друга оспинки, способствуя распространению инфекции.
Дифтеритическая форма ОП проявляется поражением слизистых оболочек ротовой и носовой полости, подглазничной ямки. На слизистой оболочке ротовой полости вначале возникают мелкие, ясно очерченные округлые желтовато-белые возвышающиеся пятна величиной от чечевицы до 10-копеечнои монеты, которые, разрастаясь, сливаются в ложные перепонки – мягкие, иногда кашицеобразные (особенно у голубей), легко снимающиеся или сухие плотные творожистые, трудно снимающиеся. Дифтерические пленки появляются главным образом под языком или по краям его, на щеках, в углах рта, вдоль небной щели, в зеве, окружности гортани или даже трахее. Для пленок оспенного характера типично глубокое их врастание в слизистую оболочку. Гортань поражается наиболее часто. Дыхание сильно затруднено, больные птицы вытягивают шею, дышат с открытым клювом. Приём пищи затруднён, рот часто открыт. При распространении дифтеритического процесса на носовую полость появляется насморк. Из ноздрей вытекает серозная или слизистая, впоследствии гнойная жидкость грязно-желтого цвета, которая, подсыхая, заклеивает носовые ходы. При поражении носоглотки в процесс вовлекается слёзный канал и подглазничная ямка. Последняя заполняется воспалительным экссудатом и выпячивается под глазом в виде горячей болезненной припухлости плотной консистенции величиной с лесной орех.
Часто отмечается поражение глаз. Появляется светобоязнь, покраснение и отечность их. Слизисто-гноиный экссудат высыхает у краев век и склеивает их. При искусственном раскрывании глазной щели на роговице видно гнойно-творожистое наложение, а на поздних стадиях процесса обнаруживается засохший беловатый гной. Чаще поражаются оба глаза ("совиная голова"). Воспаление может распространиться на склеру и роговицу.
При кожной форме оспы обычно обнаруживают бородавчатые образования, покрытые бурым кровянистым струпом, чаще на гребне, бородках, сережках, у основания клюва, на щеках, иногда на коже по всему туловищу. Течение болезни преимущественно хроническое. Оспа, протекающая без осложнений, заканчивается в течение 5-6 недель. Кожная форма чаще протекает доброкачественно. Нередко отмечают стертые формы ОП. Переболевшие куры становятся истощенными, многие слепнут на один или оба глаза. Летальность среди взрослых кур достигает 10-20%, среди молодняка, особенно в холодное время года - 50-70%.
Прогноз при дифтеритической форме в общем неблагоприятный.
Сообщалось об изменении клинического проявления ОП, наблюдаемой с 1973-1974 гг. Тяжелые поражения были только в трахее: сильное воспаление и обширное набухание слизистой оболочки трахеи с некротическими наслоениями вызывали сужение и закупорку прохода, что вызывало высокую смертность птицы (10-35%) вследствие удушья.
Трахеальную форму ОП наблюдали в Новой Зеландии, Южной Америке. Ею поражались только куры-несушки, содержащиеся в клетках.
Описаны и атипичные случаи ОП у молодых несушек в зимний период. Процесс протекал атипично и характеризовался незначительным снижением яйценоскости, ломкостью печени и казеозными наложениями в верхней части трахеи.
ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ
Формы болезни известны давно. Вначале их считали различными инфекциями. После того, как Маркс и Штиккер в 1902 г. доказали, что кожная форма вызывается вирусом, а в 1907 г. Карноут показал, что вируссодержащими эпителиомами можно вызвать оспенное поражение слизистых оболочек, установилось единое представление о возбудителе оспы и дифтерита птиц. За последние 10-15 лет в отечественной и зарубежной литературе опубликован ряд сообщений о биологических свойствах полевых и вакцинных штаммах вируса оспы кур, диагностики инфекции и её эпизоотологических особенностях.
Строение вириона вируса оспы при рассечении в плоскости АОВ:
1-фрагмент цитоплазматической оболочки;
3,4,5 – внешняя, средняя и внутренняя осмиофильная мембраны;
6- боковое тело;
8-гранула;
11-вирусоплазма;
12,13,14 – внешняя средняя и внутренняя оболочки нуклеоида;
15 – нуклеоидоплазма;
16,19,20 – компоненты S-структуры нуклеоида.
Устойчивость. Вирус чувствителен к высокой температуре. Высушивание и холод консервируют его. В оспенных корочках при температуре -15°С он выживает до 2х лет и более. В лиофилизированном виде при хранении под вакуумом оспенный материал остаётся вирулентным до 8ми лет. Чувствителен к этиловому спирту, быстро погибает в гниющем субстрате.
АГ структура. В составе очищенного вируса ОП обнаружено 29 полипептидов с молекулярной массой 14-138 кД. Наивысшей и иммуногенной активностью обладают полипептиды с молекулярной массой 35 и 37 кД. За индукцию ВНА вируса ОП ответственны АГ, расположенные на поверхности наружной оболочки вириона и прежде всего белок 58кД, являющийся основным структурным компонентом трубочек(ворсинок). Антисыворотка к этому белку нейтрализует инфекционность вируса и предотвращает образование синцития в культуре клеток. Этот белок ответственен за выбаботку иммунитета. Выявлен 21 белок, кодирующий вирус оспы птиц. Эти белки можно разделить на пререпликативные и пострепликативные по аналогии с вирусом осповакцины.в первую группу входит белок 70кД.
Внеклеточные вирионы вируса ОП покрыты дополнительной наружной оболочкой отсутствующей у внутриклеточных вирионов. Она играет важную роль в индукции синтез! ВНА. Используются рекомбинантные вакцины на основе вируса ОП. Размер генома вируса допускает встраивание нескольких генов, позволяя получить мультивалентные вакцины, а также вакцины. Эффективными вакцинами показали себя экспрессируемые с рекомбинантным вирусом ОП антигены вируса НБ, гриппа птиц, ИББ, БМ. Приведены данные разных лабораторий по получению и испытанию этих препаратов. Пока не ясно, можно ли с их помощью решить проблему вакцинации в 1-й день жизни, при наличии у вылупляющихся птенцов высокого уровня материнских AT.
Антигенная вариабельнось и родство. Между вирусами оспы кур, голубей и индеек имеется родство. Вирус оспы канареек в иммунологическом отношении отличается от возбудителей оспы кур и голубей (табл. 1. 1).
Таблица 1. 1. Сравнительная патогенность и иммунологическое
родство между вирусами оспы птиц
Вирус |
Реакция |
Иммунитет |
|||||
оспы |
кур |
голубей |
канареек |
кур |
голубей |
канарек |
|
Кур |
+ |
± |
|
+ |
+ |
- |
|
Голубей |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
|
Канареек |
+ |
+ |
- |
- |
- |
+ |
АГ вариабельность у вируса оспы кур не установлена. Шт. существенно различаются по спектру патогенности и степени вирулентности. С помощью РСК, РН и РДП установлено антигенное родство вируса оспы кур с вирусами оспы овец и коз. Антигены ВОП, миксома-тоза кроликов, эктромелии мышей и оспы коров идентичны. Вирус оспы перепелов иммуно-логически отличен от вирусов оспы голубей и кур и защищает цыплят, голубей и индеек только против себя. Также иммунологически отличен вирус оспы попугаев.
Локализация вируса. В естественных условиях у больной птицы вирус локализуется в оспинах. В период предшествующей генерализации оспенного процесса (на 17-20-й день после инфицирования), вирус можно обнаружить в крови, почках, яичниках, селезенке, головном мозге и других органах. Однако он чаще обнаруживается в бесперьевых участках кожи головы и на слизистой оболочке глотки, гортани, трахеи. В органах и тканях переболевших кур вирус выживает до 487 дней (срок наблюдения). Наружу вирус выделяется с вируссодержащим корочковым материалом больных птиц.
АГ активность. В сыворотках крови больных и экспериментально зараженных кур с 4-7-го дня появляются анти-ГА в титре 1:10- 1:80 и достигающие к 22-30 дней. титра 1:160 - 1:640, далее идет снижение титра. РЗГА специфична, ее можно использовать для диагностики оспы. У гипериммунизированных вирусом оспы кур выявляются специфические AT -преципитины. Преципитирующая сыворотка при 4°С сохраняет активность до 300 дней. АТ в сыворотке крови кур после 1-кратного введения им оспенного вируса реагируют только с полипептидами молекулярной массы 37 и 35 кД, тогда как AT после вторичной инокуляции курам вируса оспы реагируют ещё с 6-ю другими структурными белками вируса ОП. Иногда полевые вирулентные изоляты вызывают образование анти-ГА в высоком титре, но ВНА – в низком.
Экспериментальная инфекция. Легко воспроизводится ВОК у неиммунных цыплят и кур при заражении в скарифицированную кожу гребня, бородки, сережек и обнаженные перьевые фолликулы. Вирусы оспы кур и голубей хорошо размножаются на ХАО КЭ, различаясь между собой по характеру поражения мембраны и степени генерализации. Штаммы, относящиеся к куриному вирусу оспы, как правило поража.т ХАО и обнаруживаются в тканях и органах зародыша, а голубиный вирус оспы обычно не вызывает генерализованного процесса в эмбрионе и размножается преимущественно в зоне отслоенного участка ХАО.
Кроме эмбрионов, вирус оспы кур культивируются в клетках фибробластов КЭ, вызывая ЦПИ(округление и вакуолизацию клеток, образование гигантских клеток с 5-7 ядрами). Максимум инфекционной активности наблюдается к 72 ч. Вирус хорошо репродуцируется в перевиваемой линии клеток QT-35. вирус оспы перепёлок размножается в культуре фибробластов. В первых пассажах он не вызывает ЦПД.
ГА свойства. Вирус способен АГ эритроциты кур пород белой русской и леггорн. Оптимальными условиями реакции ГА являются: 0,5%-ная взвесь эритроцитов, РН физиологического р-ра 7,2-7,4 и температура 37°С. Адсорбированные ГА с эритроцитов не элюируют их удается отделить специфической иммунной сывороткой. Суспензия вируса оспы консервированная 0,5%-ным формалином, при хранении в темном месте при 4°С сохраняет свою ГА активность более 8 месяцев и может быть использована в РГА и РЗГА. Все шт. вируса проявляют одинаковую ГА-активность. За ГА-активность вируса ОП ответствен полипептид 85 кД и гликопептид 41 кД. Внутриклеточные вирионы (без дополнительной оболочки) не содержат полипептида 85 кД. Неструктурный ГА формируется на цитоплазматических мембранах. С его образованием инфицированные клетки приобретают способность адсорбировать эритроциты (5).
ГАд свойства не изучены.
ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ
Источники и пути передачи инфекции. Основной источник - больная птица. Переносчиками могут быть насекомые. Доказана передача вируса оспы кур посредством Guliceides arakawae. Механические носители ВОП - клещи A. persicus, D. gallina, S. bipectinatus и клопы Cimex lectularius. Вирус оспы кур в организме зараженных в естественных условиях клещей A. persicus сохраняет активность до 730 дней, передается в последующее поколение трансовариально, в организме клещей D.gallinae - соответственно до 300 и 240 дней. Однако чаще птицы заражаются при контакте с больной птицей, через загрязненные вирусом корма, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. В организм вирус проникает через поврежденные кожу и слизистые оболочки.
Спектр патогенности в естественных условиях. Большинство выделяемых полевых штаммов вируса оспы кур патогенны для птиц этого вида. Однако в экспериментальных условиях некоторые штаммы могут вызвать раздражение норок, уток, ястребов, канареек. Встречаются так назваемые бипатогенные и трипатогенные штаммы оспы кур; они заражают кур и голубей или кур, голубей и индеек. Штаммы Никано и Хоккей обладают широким спектром патогенной активности; вызывают оспенную реакцию цыплят, голубей и кроликов. По спектру патогенности ВОП могут быть расположены в таком порядке: голуби, индейки, куры, канарейки. Вирус оспы перепелов вызывает гибель перепелов-цыплят. При кожном заражении у голубей развивается слабовыраженная фолликулярная реакция. Вирус оспы выделен из бородавкоподобных поражений у 3х видов автралийских диких птиц: сороки, белоглазки и птичьего жаворонка. Все 3 вируса не вызывали ЦПД в культуре фибробластов КЭ. В РН, РДП показана АГ близость этих вирусов с вирусами оспы кур и голубей, но они не давали антигенных перекрёстов с вирусом осповакцины.
ДИАГНОСТИКА
Диагноз на ОП ставят на основании эпизоотологических данных, результатов клинического обследования птиц, вирусологических и серологических исследований. Если имеются тичные оспенные поражения кожи, гребня, сережек и лицевой части головы, диагноз поставить не трудно. Если же поражения локализуются только в ротовой и носовой полостях диагностировать болезнь значительно труднее.
Выделение вируса
Выделение вируса на КЭ. Из 10%-нои суспензии, свободной от микрофлоры, готовят разведения 10-2 и 10-3 на физиологическом растворе. Каждым разведением (по 0,2 мл) заражают на ХАО по 4 10-12-дн КЭ, которые инкубируют в течение 6 дней. КЭ, погибшие на 3-й сутки и позже, а также оставшиеся живыми на 6-е сутки после заражения охлаждают и вскрывают. В положительных случаях на ХАО обнаруживают отдельно расположенные или слившиеся оспины. Под влиянием вируса оспы голубей возникают наиболее крупные, толстые, компактные, с выпуклой серединой очаги оспенных поражений диаметром 5-6 мм, не имеющие признаков некроза. При высокой заражающей дозе наблюдается значительное утолщение и железообразный отек всей оболочки (вид медузы).
От вируса оспы кур появляются более мелкие (3-5 мм в диаметре) плоские поражения, иногда с неровными краями. При большой заражающей дозе наблюдаются обширные утолщения оболочки, которая имеет беловатую окраску. Вирус оспы индеек дает беловатые слабо выраженные очаги поражения диаметром 2-3 мм, часто окруженные кольцеобразной зоной. Вирус оспы канареек образует дифференцированные очаги. Первичные очаги средней величины, разлитые и напоминают поражения, вызываемые оспой голубей. Вторичные очаги имеют вид мелких беловатых точек. От вируса осповакцины появляются хорошо видимые очаги уже на 3-й день после инфицирования. Они плоские, диаметром 2-3 мм, с отчетливо видимым центральным некрозом в первичных очагах. Из оспенных поражений ХАО делают тонкие мазки или отпечатки на предметных стеклах и окрашивают по Морозову или Пашену для выявления элементарных оспенных телец (вирионов). Выделение вируса на КЭ проводят до 3-х пассажей.
Биопроба. Биопробу проводят на неиммунных к вирусу оспы цыплятах 3-4-мес возраста. Для этого используют 10%-ную суспензию материала, полученного от естественно больной птицы, или суспензию ХАО зараженных КЭ. В том и другом случаях испытуемый материал осторожно втирают стеклянной палочкой или зубной щеткой в скарифицированную поверхность гребня, бородок, а также в освобожденные от перьев фолликулы голени. При наличии в материале вируса оспы на месте втирания на 5-6-й день развиваются оспенные поражения: припухание и покраснение фолликулов, появление на поверхности их гнойных пробочек, затем струпьев, которые в дальнейшем, сливаясь, дают общий струп коричневого цвета. Специфичность оспенных поражений у экспериментально зараженной птицы в каждом случае может быть подтверждена при помощи вирусоскопии мазков. У кур, зараженных вирусом оспы голубей в перьевые фолликулы, развивается доброкачественный фолликулит (без некроза), который к 10-12-му дню исчезает. Вирус оспы кур после нескольких пассажей на индейках может вызывать оспенный процесс у голубей, а после нескольких пассажей через них ослабить свою вирулентность по отношению к курам и индейкам.
Индикация вируса
Вирусоскопия. Готовят мазки из воспаленных фолликулов голени экспериментально зараженных кур или голубей или из свежих оспенных бородавок естественно больной птицы. Окрашивают их методом серебрения по Морозову, на присутствие элементарных телец можно окрашивать также по методу Герцберга или Пашена.
При иммерсионной микроскопии элементарные тельца Борреля просматриваются в виде мелких (200-300 нм) округлых образований темно-коричневого или черного цвета, расположенных поодиночке, парами, короткими цепочками, в виде скоплений. Присутствие оспенного вируса считается подтверждением только при обнаружении характерных телец в массовом количестве. Достоинством метода вирусоскопии следует считать быстроту ответа /0 5-1 ч после доставки материала в лабораторию), простоту и доступность. Однако есть и некоторые недостатки? наиболее четкие результаты при вирусоскопии можно получить при использовании срезов от свежих везикул (до нагноения) или везикулярной жидкости; при исследовании пустулезной жидкости, особенно корок, возможность обнаружения элементарных телец и достоверность полученных результатов значительно снижаются. Вирусоскопические исследования могут быть проведены также с использованием техники фазово-контрастной микросколии.
ЭМ. В эпителии оспин можно найти вирус ЭМ методом после адсорбции на коллодие-вую пленку. При этом выявляются' как незрелые пузырьковидные вирусные частицы размером от 60 до 200 нм, так и типичные кирпичеобразные и овальные зрелые вирионы. При негативном контрастировании видны филаментозные структуры вирионов. Диагноз считают установленным при наличии в препаратах одиночных или расположенных группами оспенных вирионов (Рис. 108), Метод позволяет определить не только размеры исследуемых вирусов, но и форму и структуру их.
Обнаружение телец-включений. В цитоплазме инфицированных клеток обнаруживают 2 типа телец-включений (телец Боллингера): первые представляют собой волокнистый материал, соответствующий зрелым вирионам (тельца-включения типа В), вторые - зрелые вирионы (тельца-включения типа А), имеют структуру, идентичную структуре других штаммов вируса оспы кур. Предложен метод определения телец Боллингера в раздавленных срезах, изготовление которых доступно каждому ветеринарному специалисту непосредственно в производственных условиях. Для этого лезвием безопасной бритвы срезают верхушку оспины, следующий, предназначенный для исследования срез, делают как можно тоньше. Со слизистой оболочки срез производят ножницами. Полученный срез в расправленном состоянии кладут в капле воды между двумя предметными стеклами, которые для удобства микроскопии смещают продольно относительно друг друга на 1,5-2 см. Раздавленный срез осторожно снимают с предметного стекла, красят Суданом III10-15 мин, после чего промывают в воде и в капле воды накрывают покровным стеклышком (1).
Быстрый и простой метод гистологических исследований (18) позволяет в течение нескольких часов обнаружить цитоплазматические тельца-включения и дифференцировать оспенную инфекцию от ИЛТ кур.
Серологическая идентификация
РДП. При оспенной форме болезни для приготовления AT ex tempore используют кусочки гребешка или кожи с оспенными поражениями, легкие, печень, а при дйфтеритической форме - гортань, трахею, легкие и инфицированные вирусом ХАО КЭ. Преципитирующие линии из суспензии легкого и печени довольно четкие, но они в 2-3 раза слабее, чем из суспензии гребешка и кожи. Положительная РДП подтверждает диагноз на оспу, а отрицательная не дает права исключать ее.
Помимо РДП для исследования сывороток используют тест встречного ИЭФ. В сыворотках бройлеров с помощью РДП AT выявляются позже, чем в тесте ВИЭФ. Последний имеет преимущества в отношении выявления ранних преципитинов. Тест прост и быстро производится. Для проведения ВИЭФ требуется всего лишь 45 мин в условиях комнатой температуры. Линии преципитации видны без окрашивания (16).
ИФ. Для индикации вируса используют метод простого флюорохромирования акриди-ым оранжевым, а также метод флюоресцирующих AT. Последний является экспресс-методом диагностики ОП при исследовании препаратов-отпечатков из оспенных поражений больной птицы, зараженной культуры клеток КЭ и т.д. Результаты исследования материала можно иметь через 5-7ч после поступления его в лабораторию.
Серодиагностика и ретроспективная диагностика. Разработана методика постановки РНГА для диагнстики оспы кур с использованием как нативных, так и формализироанных бараньих эритроцитов. В диагностических лабораториях применяется РДП в агаровом геле. Антигеном служат ХАО, собранные на 4-5-й день после заражения КЭ. Преципитирующую сыворотку получают от естественно больонй и переболевшей птицы. С помощью РДП с заведомо «активным» эмбриональным вирусом оспы кур можно выявить присутствие неспецифических АТ у кур, не имеющих видимых клинических признаков заболевания. РДП ставят по методу Джордани и Чабб(1962), модифицированному Г.А.Лежава(1964). При этом надо учитывать, что ПА в сыворотке крови обычно появляются между 11-36 днями после заболевания кур оспой. Сыворотка крови птицы, зараженной сильно вирулентным штаммом вируса оспы, обычно дает выраженную РДП. Однако преципитирующая сыворотка реконвалесцентов часто оазывается слабоактивной, а у 15% больных оспой кур ПА не удаётся выделить совсем.
Разработан ELISA для определения AT к вирусу ОП.
Дифференциальная диагностика. ОП следует дифференцировать от авитаминоза А ИЛТ, ИБК, пастереллеза, парши, аспергиллеза и респираторного микоплазмоза. ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА
Куры, переболевшие оспой в естественных условиях, приобретают иммунитет на 2-3 года.. Поствакцинальный иммунитет менее продолжителен и зависит от характера вакцины. Для специфической профилактики ОП применяют живые вакцины 2-х типов: приготовленные из иммуногенных и ареактогенных штаммов гетерологичного вируса оспы голубей или из атгенуированного или природно ослабленного ВОП 27-АШ. В СНГ применяют сухую вирусвакцину из вируса оспы голубей (шт. НД). Вирусвакцину из голубиного вируса (Рис. 108) оспы рекомендуют для цыплят 1-1,5-мес возраста. Иммунитет у привитой птицы наступает через 3 недели и сохраняется около 3 месяцев у цыплят и до 10 месяцев у кур. При использовании вакцины из вируса оспы голубей напряженность и длительность создаваемого иммунитета во многом зависит от числа воспалившихся после вакцинации перьевых фолликулов. Считают, что для создания напряженного иммунитета у птицы голубиной вакциной каждая доза последней должна иметь титр не менее 105 ЭИД 30, а у птицы, привитой вакциной в рабочем разведении, должно быть не менее 15 воспалившихся фолликулов. Проведены успешные опыты аэрозольного применения вирус-вакцины из голубиного штамма оспы Нью-Джерси. При таком методе вакцинации иммунитет у цыплят формируется к 11 суток и сохраняется не менее 190 дней. Ф.Б. Ширинов выделил природно ослабленный ВОП и, всесторонне изучив его, рекомендовал для широкого применения в качестве живой вакцины с профилактической целью. 5-летний срок использования этой вакцины дал основания оценить ее положительно. Однако в настоящее время в РФ применяется сухая вакцина из шт. ВГНКИ из куриного вируса. Ее готовят на основе аттенуированного культурального штамма К. Птицу иммунизируют методом укола в перепонку крыла. Реакция на введение вакцины наступает на 5-8-й день и характеризуется образованием на наружной и внутренней поверхностях перепонки крыла оспин, которые исчезают через 28-30 дней. По эффективности и иммунобиологическим показателям технологии изготовления и применения эта вакцина превосходит все предыдущие.
В Австралии проводят вакцинацию цыплят путем добавления в корм коммерческого препарата. По данным авторов, вакцинация per os с кормом дешевле аэрозольной вакцинации, поскольку требует гораздо меньшего количества вируссодержащего материала при одинаковом индуцировании AT.
Серологическая оценка поствакцинального иммунитета не разработана.