24. Разбавление спермы, назначение разбавителей.

Значение и необходимость разбавления спермы

Во время эякуляции к содержимому эпидидимиса приме­шиваются секреты придаточных половых желез. Они изменяют рН среды, насыщают плазму электролитами (соли натрия, калия, магния); последние вызывают разрушение липопротеидного по­крова спермиев. Отмеченные сдвиги обуславливают переход спермиев из анабиоза в активное состояние; это, в свою очередь, приводит к быстрой их гибели.

Непосредственными причинами сокращения срока жизни спермиев вне организма являются:

• истощение источников энергии в спермальной плазме и самих спермиях;

• интоксикация продуктами жизнедеятельности спермиев;

• разрушение липопротеидного покрова, набухание мем­бран и снятие электрического заряда;

• отрицательное действие находящихся в сперме и раз­множающихся в ней микроорганизмов;

• температурные перепады.

Следовательно, для продления срока жизни спермиев во внешней среде требуется:

• уменьшить активность спермиев;

• обеспечить их дополнительными источниками энергии;

• защитить мембраны спермиев от разрушения;

• предотвратить накопление токсических продуктов мета­болизма;

Синтетические и биологические среды для хранения спермы

Разбавители могут быть биологическими и синтетически­ми (искусственными) средами. Из биологических сред использо­валось коровье молоко, кокосовое молоко, 7%-ный раствор пче­линого меда, а также томатный сок.

Применяемые в настоящее время разбавители спермы сельскохозяйственных животных относят к синтетическим сре­дам.

Синтетическая среда обычно состоит из трех и более компонентов, например, глюкозо-цитратно-желточная среда (ГЦЖ).

Основные компоненты разбавителей и их роль

В состав большинства разбавителей входят следующие компоненты:

Сахара (глюкоза, лактоза). Служат источником энергии для спермиев. Помимо этого они участвуют в поддержании ос­мотического давления, понижают электропроводность среды, предохраняют спермии от потерь электрического заряда.

Цитрат натрия. Создает буферность среды, нейтрализует конечные продукты жизнедеятельности спермиев, связывая ио­ны кальция и тяжелых металлов.

Трис-буфер (2-амино-2-гидроксиметил-1, пропандиол). Устойчиво удерживает первоначальную рН среды, обладает ос­мотическим действием, устраняет явления дыхательного ацидо­за в спермиях.

Трилон Б (хелатон, двунатриевая соль этилендиамин-тетрауксусной кислоты). Образуя временные связи с ионами кальция, тормозит активность протеаз, АТФаз и других фермен­тов, участвующих в метаболических процессах в спермиях.

ЭДТА (тринатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты). Подобно трилону Б, образует хелатные комплексы с ионами кальция, тем самым блокирует активность ферментных систем спермиев.

Сульфат аммония. Предохраняет от разрушения сульф-гидрильные группы в мембранах спермиев, задерживает выход электролитов в окружающую среду.

Глицерин. Обладает криопротекторными свойствами, лег­ко проникает внутрь спермия, понижает температуру замерза­ния и препятствует образованию кристаллов связанной воды, что позволяет избежать повреждений клеточных структур. Бла­годаря высокой гидрофильности препятствует дегидратации ци­топлазмы.

Желток куриных яиц. Содержит лецитин и липопротеины, которые создают на поверхности спермия адсорбционный слой, предохраняющий его от холодового шока.

Спермосан ППК. Комплексный антибактериальный пре­парат, состоящий из пенициллина, полимиксина, канамицина. Такая комбинация эффективно тормозит размножение микроор­ганизмов в сперме.

В состав некоторых разбавителей входят антиоксиданты (токоферол), загустители (гуммиарабик), свободные аминокис­лоты (гликокол, аргинин) и другие компоненты.