52. Характеристика групп патогенных микроорганизмов, попадающих в почву с выделениями человека и животных

Ответ. В третью группу включены патогенные микроорганизмы, попадающие в почву с выделениями человека и животных и сохраняющиеся в течение нескольких недель или месяцев. Все эти микроорганизмы – сальмонеллы, шигеллы, вибрионы, бруцеллы, микобактерии, лептоспиры, возбудители сапа и др. не образуют спор и поэтому быстро гибнут в результате воздействия различных физических и биологических факторов. Salmonella typhi. Длина 1—7 мкм, ширина около 0,3—0,7 мкм. Мелкие грамположительные палочки вытянутой формы с закруглёнными концами. Капсул бактерии не имеют, подвижны. Оксидазаотрицательны, каталазаположительны. На агаре Эндо колонии мелкие розоватые с голубоватым оттенком и прозрачные, на агаре Плоскирева — бесцветные плотные и мутноватые, на висмут-сульфитном агаре (ВСА) — чёрно-коричневые, с металлическим блеском, окружены чёрным ореолом, среда под колониями окрашивается в чёрный цвет, на ксилоза-лизин-дезоксихолатномагаре (XLD) — бесцветные колонии с черным центром и зоной малинового цвета. На жидких средах дает диффузное помутнение.

53. Способы обнаружения в почве сальмонелл

Ответ. Загрязнение почвы сальмонеллами происходит в результате непосредственного попадания фекалий, преимущественно животных, в меньшей степени — человека. Практически у всех домашних и многих диких животных сальмонеллы обнаружены как комменсалы и как возбудители острых сальмонеллезов. Шигеллы попадают в почву с испражнениями человека. Для определения сальмонелл в почве могут быть использованы два метода: посев в среду накопления и метод коагуляции с последующим высевом на дифференциально-диагностические среды. Первый метод более простой: для обнаружения сальмонелл в подготовленную почвенную суспензию вносят ингредиенты магниевой среды «М» (из расчета объема суспензии), инкубируют при температуре 37°С в течение 18-20ч. Затем делают высев на висмут-сульфитную среду (обычно 3-5 чашек). Идентификация выросших колоний проводится по методике определения сальмонелл. Шигеллы обнаруживают параллельно — посевом в селенитовую среду. При выделении сальмонелл из почвы методом коагуляции и центрифугирования по Фикеру к 500 мл почвенной суспензии добавляют 1,7 мл 10%-ного стерильного раствора сульфата железа и 2 мл 10%-ного стерильного раствора бикарбоната натрия (для подщелачивания, которое способствует коагуляции). Суспензию тщательно взбалтывают и ставят в холодильник на 1 ч для образования хлопьев, прозрачную жидкость сливают, а осадок и надосадочную жидкость с хлопьями переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют 5 мин при 5000 об/мин. После центрифугирования жидкость над осадком сливают, а осадок обрабатывают 1 мл 25%-ного раствора виннокислого калия (добавляя по каплям до полного растворения осадка) и делают высев на чашки с висмут- сульфитным агаром и средой Плоскирева. Параллельно оставшийся осадок заливают желчным бульоном. Посевы помещают в термостат при температуре 37°С. Для выявления сальмонелл из желчного бульона через 5 и 20 ч делают высев на дифференциально-диагностические среды. Дальнейшая идентификация сальмонелл и шигелл ведется по обычной схеме. Для обнаружения сальмонелл и шигелл можно непосредственно исходную почвенную суспензию фильтровать через мембранные фильтры, затем их переносят на дифференциально-диагностические среды для подращивания.