1.7. Селективные агенты Красители

Чувствительность к красителям—один из критериев в систе­матике микроорганизмов. Для их дифференциации на специаль-

26

27

ных питательных средах используются в основном анилиновые красители. Имеются сообщения о применении красок и для вы­явления факторов патогенности различных бактерий (Григорье­ва Л. В. и соавт., 1991).

Многие красители вводятся в состав сред в качестве инди­каторов рН с целью выявления биохимических свойств микро­организмов по изменению окраски среды. Сведения о диапазо­нах определения рН и особенностях изменения цвета различ­ных красителей представлены в каталоге продукции фирмы «BectonDickinson» (1988) и в монографии Семенова С. М. (1990).

Широкое применение нашел краситель конго красный для определения вирулентности Sh.flexneri(DaskalerosP.,PayneS.,1987; Qadri F. et al., 1988), иерсиний (Riley G., Toma S., 1989) и ус­ловно патогенных энтеробактерий, в частности Е.coli(Поликар­пов Н. А. и соавт., 1990; BerkhoffH., Vinal A., 1986). Вирулентные штаммы данных микроорганизмов связывали конго красный из агаровой среды. В 1988 г. такое же свойство было выявленоBerkhoffH., Vinal А. у трипанового голубого, Calcofluor, Jinopal и бриллиантового желтого.

Синтетическая среда для выявления вирулентных штаммов чумного микроба по признаку пигментации (Инструкция по применению..., 1990) включает 0,03 г/л конго красного.

Для идентификации и дифференциации Y.enterocolitica, об­ладающих плазмидой вирулентности от утративших ее, Bhaduri S. etal. (1991) предлагают метод, основанный на связывании конгокрасного при лимитировании Са²⁺. Несколько раньше, как уже отмечалось, Bhaduri S. et al. (1987) для выявления вирулентности Y.enterocoliticaуспешно использовали кристаллический фиоле­товый.

Конго красный входит в состав дифференциально-дигно-стический среды № 67, предложенной Серовым Г. Д. (1966, 1969) для выделения Y.pseudotuberculosisи рекомендуемой так­же для выделенияY.enterocolitica(Ценева Г. Я. и соавт., 1993). Несмотря на высокую селективность, из-за дефицита конго красного (Кузнецов В. И., 1991) и других трудностей в практи­ческих лабораториях она применяется мало. В состав полужид­кой среды для иерсиний Погореловой Н. П. (1984) входит бромтимоловый синий. Для выявления вирулентностиYpestis(Маевский М. И. и соавт., 1988) иYenterocolitica(BhaduriS.etal., 1987) предлагается кристаллический фиолетовый. Высокой селективностью и чувствительностью для иерсиний отличается дифференциально-диагностическая среда Кузнецова В. И. (1991), в состав которой входят кристаллический фиолетовый и бромтимоловый синий. Последний краситель является и компонентом плотной дифференциально-диагностической среды БТС (Ценева Г. Я. и соавт., 1991, 1993; Мессорош В. Г., 1994).CiprianoR.,PyleJ. (1985) определяли утилизацию сор-

бита штаммами Y.ruckeriна среде с 24 мг/л фенолового крас­ного.

Плотная дифференциальная среда для одновременного вы­явления кальцийзависимости и пигментосорбции, разработан­ная Саямовым С. Р. (1994) на основе 10-кратного концентрата среды 199, содержит 3 мг% трипанового синего в качестве сорби­руемого пигмента.

Генциановый фиолетовый рекомендуют использовать в раз­работанных ими средах для чумного микроба Степанов В. М., Радченко Г. А. (1986), Реброва Р. Н. и соавт. (1986), Васильева 3. И. и соавт. (1992) с целью повышения ростовых свойств и селектив­ности.

WatersG.etal. (1988) предложили выделять патогенные шт.Yenterocoliticaиз мясных продуктов на среде обогащенияITC, содержащей малахитовый зеленый.

По данным Сох N. etal. (1990) оптимальным для выделенияY.enterocoliticaявляется сочетание бульона Шейманна, включа­ющего бенгальский розовый и фосфатно-буферного раствора с пектиновым или цефсулодин-иргазан-новобиоциновым (CIN, в русской транскрипции—ЦИН) агарами.

Сравнение выделяемости Y.enterocoliticaвыявило большую эффективность агара МакКонки, модифицированного с тви-ном-80 по сравнению со средой с бриллиантовым зеленым и желчным агаром с фиолетовым красным (AkbulutN.etal., 1994).

Широкое применение в качестве индикатора дифференци­ально-диагностических сред Гисса и ЦДС для идентификации чумного и псевдотуберкулезного микробов нашел фуксин кис­лый. Яромюк Г. А. и соавт. (1990) подробно описывают виды фу-ксинов, производимых отечественной промышленностью и сте­пень пригодности их в бактериологических исследованиях.

Для дифференциации энтеробактерий Балаклеец В. С. и со­авт. (1987, 1991) предлагают среды, где в качестве индикатора и селективного агента используются нейтральный красный, фено­ловый красный и бриллиантовый зеленый. Соколова К. Я. и со­авт. (1992) применяют для этой цели среду с бромтимоловым си­ним.

Veronika L. (1985) отмечает высокую селективность, в сравне­нии со средами Эндо иVRBL, бролациновой среды, содержащей бромтимоловый синий при идентификации колиподобных бак­терий.

Литинским Ю. И. и соавт. (1976) для выделения сальмонелл из испражнений методом «подвижного роста» предложены сре­ды в состав которых входили бромтимоловый синий и крезоло-вый красный.

Из селективных сред наилучшим ростом сальмонелл и ста­бильностью, по данным SchomburgI. (1983), отличался агар с бриллиантовым зеленым.

28

29

Многолетние работы по выделению сальмонелл из фекалий на полужидкой среде обогащения Раппапорта (стандартная сре­да с 0,8% агара) показали более высокую специфичность (95,1%) и эффективность (80,3%) по сравнению с агарами МакКонки(частота выделения сальмонелл 11,1%),—SS (30,2%) и с брилли­антовым зеленым (77,2%). На модифицированной среде количе­ство выделенных сальмонелл по сравнению со стандартным ме­тодом исследования возрастало в среднем на 22,5% (GoossensH.etal., 1984).

Шиганова В. Л. (1976) для целей выделения сальмонелл и шигелл из морской воды заменила в магниевой среде накопле­ния (Калина Г. П., Шиганова В. Л., 1972) ингибитор бриллиан­товый зеленый более мягким по действию кристаллическим фиолетовым. Она зарекомендовала себя положительно при сравнении с магниевой средой, средой для выделения грамот-рицательных микробов (Graft,Miller, 1956) и средой на охме­ленном сусле (рецепт НИИ общей и коммунальной гигиены им. Сеченова АМН СССР).

Результаты выделения сальмонелл из пищевых продуктов и кормов на бульоне Раппапорта—Вассилиадиса с малахитовым зеленым более воспроизводимы, чем на тетратионатном бульоне с бриллиантовым зеленым (среда Мюллера—Кауффмана) и она рекомендована вместо среды Мюллера—Кауффмана в стандарт­ном методе ISOдля выделенияSalmonella.

Goetz-GrospironE,BaronD. (1986) показали, что наилучшим из сравниваемых методов выделения сальмонелл из проб ила сточных вод является получение накопительных культур на сре­де Мюллера—Кауффмана с последующим культивированием на агаре с бриллиантовым зеленым.

HumbertF.etal. (1989) после обогащения выделяли сальмо­неллы из мясных продуктов на агарах с бриллиантовым зеле­ным и дезоксихолатном. Показана идентичность по чувстви­тельности и специфичности субкультивирования сальмонелл на модифицированной плотной среде с бриллиантовым зеле­ным после селективного обогащения (BagerЕ,PetersenJ., 1991) методу сочетающему обогащение в бульоне Раппапорта—Вас­силиадиса с определением специфических антигенов сальмо­нелл.

При выделении сальмонелл после селективного обогащения на бульоне Раппапорта—Вассилиадиса чувствительность агара Gassner(имеет в составе водный голубой и метахромовый жел­тый) составляла 91,7%, агара Kaunrnann (имеет в составе брилли­антовый зеленый и феноловый красный)—86,1% (WeberA.,Re-nateW, 1994).

Из использованных 5 селективных и обогатительных бульо­нов наилучшие результаты при выделении Sal. dublin из испраж­нений КРС Hoszowski A. (1989) получил на бульоне Мюллера— Кауффмана,Sal.typhimurium—на селенитовом бульоне с брил-

30

лиантовым зеленым (однако хорошее выделение отмечалось и на бульоне Мюллера—Кауффмана и на средах с малахитовым зеле­ным),Sal.cholerae—наV—бульоне.

С целью повышения точности идентификации Sal.typhiпу­тем предобогащения и двойного пересева, Подплетенная И. М. (1992) рекомендует дополнительно первично идентифицировать на комбинированных средах лактозоположительные, не образу­ющие газ и сероводород культуры и пересевать их на среду, со­держащую из красителей 11—12 г/л 0,2%-ого водного раствора бромтимолового синего.

Олькеницкий И. С. (1958) предложил модификацию среды Крумвида, в которую входит 0,4%-ый раствор фенолового крас­ного. Из-за невозможности исключения на ней и среде ДУКС аналогов шигелл, Калина Г. П., Трухина Г. М. (1990) разработали среды, имеющие в своем составе щелочные растворы бромтимо­лового синего (среда Ш-2) и фенолового красного в сочетании с водным раствором кристаллического фиолетового (среда Ш-3).В качестве основы селективных для выделения шигелл сред с ан­тибиотиками применяют агар с эозин—метиленовым синим (ЭМС).

Используемый для селективного обогащения и определения титра Е. coli бульон BGB (Brilliant Green Bile Lactose Broth) вклю­чает бриллиантовый зеленый.

FreierТ.etal. (1987) сравнивали эффективность средm-LMMи m-TMM со стандартными средами Эндо, m-FC и PTG. В состав средыm-LMMвходили, помимо других компонентов, 80 мг/лбромкрезолового пурпурного. В среду m-TMM, кроме того, перед стерилизацией вносили 0,25 мг/лTertigol(тертигол) 7. На этихсредах вырастали желтые колонии бактерий группы кишечных и фекальных кишечных палочек.

В журнале «Lab. Pract.» (1989, с. 39) рассматривается способ ускоренного выявления Е.coli—индикатора бактериальной кон­таминации, в образцах воды путем включенияMUG(4methyl-umbelliferyl-p-D-glucuronide) в состав трех питательных сред:желточного бульона с 2% бриллиантового зеленого, лаурилсуль-фатного бульона и бульона ЕС. С помощью данного метода Е.coliможет быть выявлена в чистой или смешанной культуре че­рез 4—24 ч.

Для дифференциации энтеропатогенных эшерихий предла­гаются среды, содержащие кристаллических фиолетовый (Кати­на Г. П., 1979), конго красный (Yoder H., 1989), комбинацию фе­нолового красного и анилина синего.

Красильников А. П. и соавт. (1972) рекомендуют выявлять клебсиеллы на бромтимоловом агаре с лактозой и пеницилли­ном.

Предложенная LegakisN.etal. (1976) синтетическая солевая среда, содержащая бромтимоловый синий как рН-индикатор, селективно поддерживает рост не толькоKl.pneumoniae, но и

31

Serratia spp. В составе плотной среды для клебсиелл «Klebsiella 5-АСК» (Сиволодский Е. П. и соавт., 1994) также присутствует 0,06—0,08 г/л бромтимолового синего.

Модификации агара Эндо с использованием других краси­телей с ингибиторным действием для дифференциации по мор­фологии колоний клебсиелл были разработаны CampbellL.,RothG. (1975). В частности, ингибитором для некоторых бакте­рий являлся метиловый фиолетовый 2В, тогда как для клебси­елл он селективен (CampbellL.etal., 1976). Этот краситель, как показалиFungD.,MillerR. (1973), в определенной концентра­ции ингибирует рост Е.coli, поддерживая рост Клебсиелла-Эн-теробактер-Серратиа. Мартыненко Л. Д., Солдатова Л. В. (1989) рекомендуют вводить в среду для клебсиелл 0,01% малахитово­го зеленого.CheinSe-Ping,FungD. (1990) показали возмож­ность выделения и подсчета К1.pneumoniaeна желчном агаре с акрифлавином и фиолетовым красным. Наиболее оптимальной для подсчета К1.pneumoniaeбыла концентрация акрифлавина 0,01% (исследовался диапазон от 0,01 до 0,06%). Другие микро­организмы либо подавлялись, либо их колонии отличались от колонийKl.pneumoniae.

Бромтимоловый синий входит в состав элективных для хо­лерных вибрионов бромтимоловый синий-типол-агара и его оте­чественного аналога, предложенного Либинзоном А. Е. (1974), а также сред Попова А. Б. и соавт. (1976), Фельдмана Ю. М. и со­авт. (1984), Середина В. Г. и соавт. (1990). Последняя среда уско­ряет выделение и идентификацию холерного вибриона.

В полужидкую среду Ибрагимова Ф. X. и соавт. (1989, 1990) входит 2 г/л конго красного, дополняющего, отчасти, ингиби-торный эффект в отношении сопутствующих микробов. Параге-молитические вибрионы, сдвигая рН в кислую сторону, изменя­ют окраску конго красного в иссиня-черный цвет. Показано пре­имущество предложенной среды по сравнению со средой Либинзона А. Е. (1974). Хорошими накопительными свойствами обладают глюкозосолевой типоловый бульонGSTB(JosephS.etal., 1982) и его модифицированный вариант (BartleyС,SlanetsL.,1971), содержащие, в частности, метиловый фиолетовый. В каче­стве среды обогащения используется солевой пептонный бульон с этиловым фиолетовым (BeuchatL., 1976).

По FungD.,MillerR. (1973), изучавшим действие 42 красите­лей на микроорганизмы клинического происхождения (стафи­лококки, микрококки, энтеробактерии, эшерихии и др.), ростPs.aeruginosaтормозил только кристаллический фиолетовый. Нес­колько иные данные получены Киприановой Е. А., Корнюшен-ко О. Н. (1978), определившими видовую чувствительность псев­домонад к 49 красителям. Наиболее широким антимикробным спектром обладали метиловый и кристаллический фиолетовые, метиловый зеленый; тогда как анилиновый голубой и феноло­вый красный—вообще не угнетали псевдомонады.

Рожавиным М. А., Бугаевой Е. И. (1986) представлен крат­кий, но емкий обзор литературы по использованию селективных агентов для выделения Ps. aerugenosa, в том числе бриллиантово­го зеленого (Жарикова М. С. и соавт., 1983), кристаллическогофиолетового (Mossel D. et al., 1976) и кристаллического фиолето­вого в сочетании с нейтральным красным (DalyJ.etal., 1984).

Поданным SchubertR.,BlumH. (1974) малахитовый зеленый в концентрации 1:100000, не тормозя ростPs.aeruginosa, задер­живает рост большинства видов других псевдомонад, что послу­жило основанием для включения среды с этим ингибитором в нормативный документ ФРГDIN(DeutscheInstitutfurNormung3841, часть 5, Эрфурт, 1981). Однако в обстоятельной работеGeuenichH.,MullerS. (1982) показана низкая результативность среды с малахитовым зеленым по прописиDINв сравнении с другими средами. Подвергаются сомнению (Калина Г. П., Ком-золова Н. Б., 1988) ингибирующие свойства и бриллиантового зеленого, отмечавшиесяLowburryЕ. (1951),GouldJ.,McLeodJ. (1960). Этот краситель входит в состав бульона с мертиолатом, применяемого в исследовании испражнений (LowburryE. (1951) и селенитовой среды—используемой при анализе воды (Neme-diL.,LanyiВ., 1970). В нашей стране он включен в накопитель­ный бульон для одноступенчатого выделения Ps. aeruginosa (Кол-кер И. И. и соавт., 1977). Для выявления данного микроорганизма Schubert R. (1989) предложил среду ABGP, включающую крезоло-вый красный, бромтимоловый синий и бриллиантовый зеленый.В частности, бриллиантовый зеленый в использованной концент­рации подавляет рост грамположительных микроорганизмов, но не токсичен дляPs.aeruginosa.

Еще в 1948 году Miller W. et al. рекомендовали для подавления других видов микроорганизмов при изоляции возбудителя ме-лиоидоза применять кристаллический фиолетовый (1:200000), профлавин, акрифлавин, акридины оранжевый и желтый (1:500000), фуксин основной или кислый (1:100000), малахито­вый или бриллиантовый зеленый (1:1000000). Эти красители для аналогичных целей используются и при изоляции возбудителя сапа, хотя в определенной степени задерживают и без того недо­статочный рост последнего. Жога Л. К. и соавт. (1995) при конст­руировании транспортной среды для патогенных псевдомонад в качестве ингибиторов сопутствующей микрофлоры использова­ли красители, не влиявшие на возбудителей сапа и мелиоидоза, устойчивых, например, к генциановому фиолетовому.

Феноловый красный содержится в FC-arape для культивиро­вания Bord. bronchiseptica (Vidic В. et al., 1993).

Калфин Е. X. (1962) включил для диагностики туберкулеза в среду Безредки ряд дополнительных ингредиентов. Малахито­вый зеленый при этом снижал загрязнение среды банальной ми­крофлорой. Между тем,StottmeierD. (1962) отмечает невозмож­ность отличить атипичные и сапрофитные микобактерии между

32

2 3-235

33

собой и от М. avium посредством питательных сред с феноловым красным или при сочетании фенолового красного с малахито­вым зеленым. „„ '

Мордовской Г. Г., Ступина Н. М. (1975) изучили эффект ряда красителей на характер и сроки роста микобактерий туберкулеза на среде «Новая». Влияние пищевых красителей и нигренола в концентрациях 80 мг/мл отсутствовало. Конго красный обладал наименьшим туберкулостатическим действием (40 мг/мл), брил­лиантовый зеленый почти в 20 раз (2 мг/мл), малахитовый зеле­ный—в 40 раз и генциановый фиолетовый—в 200 раз более эф­фективнее, а метиленовый синий полностью задерживает рост микобактерий туберкулеза при данных концентрациях. Малахи­товый зеленый в оптимальных концентрациях (0,3—0,6 мг/мл) не задерживает рост микобактерий, но угнетает стафилококки, на которые не влияют пищевые красители и нигренол. Брилли­антовый зеленый задерживает рост стафилококка только при концентрациях в 10 раз превышающих оптимальные величины,не действующие на рост микобактерий туберкулеза. Таким обра­зом, не найдено эквивалентных заменителей малахитового зеле­ного Между тем, имеются данные (MullerG.,GalistiG) о рост-стимулирующем эффекте бриллиантового зеленого на М.tuber­culosis, вследствие чего этот краситель используется в среде ПГ-30 (Ковалев Г. К., Александров Н. А., 1969).

Ковалев Г. К. (1982, 1988) сравнил дифференцирующую цен­ность для М. bovisи М.tuberculosisсред Вагенера—Мичерлиха(Wagener К., Mitscherlich E., 1951) с бромкрезоловымпурпурным; Альтерфогта-Кукхерма (AltevogtR.,KuckhermВ., 1955) содер­жащей комбинированный индикатор; Лебека (LebekG1958) с добавлением бромтимолового синего поSchmiedelA. (1960); и Нассаля (StottmeierD., 1962). Для последней основой являлась средаIIПетраньяни с введением фенолового красного или ком­бинированного индикатора из фенолового красного с малахито­вым зеленым. Принцип действия всех перечисленных сред осно­ван на свойстве М. tuberculosis ферментировать глицерин с обра­зованием кислоты, а М. bovis, напротив, сдвигает рН в щелочную сторону. Сдвиг рН среды улавливается индикатором, в качестве которого и используются те или иные красители. Однако разви­тие резистентности к туберкулостатикам приводит к ряду необ­ратимых нарушений процессов метаболизма у микобактерий, в частности кислотообразования при расщеплении глицерина, исреды не срабатывают (Meissner G., 1961). В то же время, У неко­торых растущих эйгонических вирулентных для кроликов М. bo­vis, напротив, рН смещается в кислую сторону.

Микобактерий очень устойчивы к трифенилметановым кра­сителям (кристаллический фиолетовый, основной фуксин, бриллиантовый и малахитовый зеленые), поэтому малахитовый зеленый часто включают в среды для выделения М. tuberculosis в целях подавления роста других бактерий. Его содержание в про-

писях питательных сред, рекомендуемых разными авторами (табл. 1) колеблется в широких пределах—от 0,0001 до 0,12%. Не задерживая полностью рост плесневых грибов, малахитовый зе­леный, в то же время, абсолютно угнетает рост М.tuberculosisи М.bovisпри дозе 0,09% (Тимченко 3. К., 1985).

Таблица 1.

Содержание малахитового зеленого в средах для выделения М. tuberculosis (по Тимченко 3. К., 1985 с дополнениями)

	Питательная среда	Кол-во малахитового зеленого, %
	Биотин-каталазная	0,0001
	Шула (Sula)	0,0005
	Лангенштейдта	0,00105
	Middlebrook7H10H7Hll	0,0025
	Калфина Е. X. Мельник Е.Т., Плоскирева Н. В.	0,02
	Финна-2	0,02
	Огавы (Ogawa)	0,02
	среда № 10 (Коваля Н. Н., 1977)	0,02
	Гельберга С. И.	0,025
	Левенштейна- Йенсена	0,03
	Лаанес-Тайместер	0,03
	Смолянского А. 3.	0,03
	среда ATS	0,036
	Зимина А. Е.	0,05
	Петраньяни	0,05
	Стоунбрика (Stonebrink)	0,07
	Розенблат В. М.	0,08
	Аникина В. А. и др., 1982 (брил, зел.)	0,01-0,1
	Рр1тястпяп1	0,12
	-Г CLldglldlil Коваль Н. Н., 1980; Самилло Г. К, 1988

По данным LiorH.,PatelA. (1987) на модифицированной среде с толуидиновым синим ДНК-азная активность обнаружи­валась у большего, чем на агаре с метиленовым зеленым (Appl.Microbiol., 1969, v. 18, p. 991—993) количества штаммов кампило-бактерий (С. pylori, С. jejuni, С. coli, С. laridis). А у С. pylori ДНК-азная активность вообще выявлялась только при использовании первой среды.

Ставский А. В., Червонная Н. И. (1992) с целью повышения селективных свойств, упрощения и ускорения выделения пато­генных стафилококков дополнительно вводили в среду также 3— 3,5 мл 0,1 %-ого водного раствора кристаллического фиолетового на 1 л среды. Van Enk R., Thompson К. (1992) разработали для вы­деления метициллинустойчивыхSt.aureusмодифицированную

34

2*

35

селективно-дифференциальную среду, содержащую феноловый красный. Из 30 видов бактерий и 5 видов грибов на ней рослилишь метициллинустойчивые St. aureus, St. xylosus, Candida tropi-calisиProteusmirabilis.

Для индикации патогенных стрептококков в молоке и молоч­ных продуктах используют среду ТКТ, имеющую в своем составе кристаллический фиолетовый. Для выделения агалактииных стрептококков предлагаются селективные среды с кристалличе­ским фиолетовым (Edwards, 1933), а гноеродных стрептокок­ков—с генциановым фиолетовым (GarradG., 1933).

Среда SMA, предназначенная для выращивания всех видов вызывающих мастит стрептококков и позволяющая дифферен­цироватьStr.faecalisи непатогенные стрептококки, содержит в своем составе кристаллический фиолетовый, бромкрезоловый пурпурный и бромкрезоловый зеленый (WilsonJ.,JeffreyD., 1987).

При конструировании элективной среды для выделения па­тогенных стрептококков Дзюбак А. П. (1993) использовал генци-ановый фиолетовый.

Осокина Т. И., Алиева Р. О. (1986) показали неэффектив­ность, в сравнении с 2,3,5-трифенилтетразолия хлоридом, ис­пользования в качестве редоксиндикаторов метиленового сине­го, фенолового красного и нейтрального красного в среде для оп­ределения чувствительности пневмококков к антибиотикам.

Шеломинская Т. Д., Балаклеец В. С. (1991) использовали в среде для выделения энтерококков как селективный агент кри­сталлический фиолетовый.

Гаджиева Г. Р. и соавт. (1989) предлагают оригинальную среду для выделенияU.urealyticumс использованием бромкрезолово-го пурпурового. Хилькевич Н. Д. (1991) высевал U. urealyticum на жидкую среду с индикатором бромтимоловым синим (окраска изменяется с желтой на зеленую в течение 24 ч). 67% колоний данного микроорганизма росли на плотной среде, т. е. имели ме­сто 33% ложноположительных результатов.

Башмакова М. А., Солдатова В. М. (1969, 1971) показали при­годность для выделения микоплазм из полового тракта женщин жидких дифференциально-диагностических сред, содержащих как индикатор 0,002% раствор фенолового красного и один из компонентов, по разложению которого проводили индикацию роста микоплазм. Плотные варианты не годились, т. к. ожидае­мого изменения цвета среды вокруг колоний микоплазм не бы­ло. Феноловый красный в качестве индикатора присутствует так­же в средеEscarquelС,GrossoM.-H. (1989), позволяющей высо-коспецифически выращивать микоплазмы, значимые в человеческой патологии, и среде Маврова И. И. и соавт. (1992) для выделения уреаплазм.

PraznikJ. (1969) рекомендует использовать при выделенииМ. pneumoniae из дыхательных путей и мочеполового тракта агар

с метиленовым синим по Крейбиллу. Antal V. et al. (1988) выдели­ли от лошадей ахолеплазмы, которые ферментировали глюкозу, редуцировали тетразол и метиленовый синий, адсорбировали эритроциты и не расщепляли аргинин.

GoldschmidtM.etal. (1991) показали пригодность неингиби-рующей среды (YM-arapa), содержащей 0,01% анилинового го­лубого красителяW6, цветной индекс 42780 (YMAB), для уско­ренного выделения и идентификации С.albicansсреди изучен­ных 1554 шт. дрожжей.

Ряпис И. В., Янушкина О. С. (1991) предложили селективную среду для определения принадлежности исследуемых дрожжей к виду С.maltosa, включающую для повышения специфичности, упрощения и ускорения исследования, дополнительно родамин 6Ж и акрифлавин.

Bragulat M. et al. (1995) исследовали влияние ряда красителей на эффективность подсчета колоний грибов в чистых и смешан­ных культурах. Используя солодовый экстрактный агар как ос-новую и контрольную среду, были испытаны следующие концен­трации красителей: 0,000025 аурамина, 0,000005 генцианового фиолетового и 0,000001 малахитового зеленого. Наибольшая численность обычно отмечалась в среде с дихлораном, бенгаль­ским розовым (рекомендуемые ингибиторы распространенияплесени) или аурамином. Малахитовый зеленый использовался в основном как жесткий ингибитор распространенных плесеней, позволяющий только адекватное развитие и восстановление тес­тируемых штаммовFusariumиAspergillus.

Jones L., Brinley M. (1958) показали, что среды с бактериоста-тическими красителями являются ингибиторными дляBr.abor­tusбиотип 2 и других привередливых штаммов. Использованиевместо красителей антибиотиков давало возможность расти всем биотипам видов бруцелл, выявляемых на селективных средах. По данным Пинигина А. Ф. и соавт. (1979) бруцеллы, выделенные от северных оленей, растут на питательных средах в присутствии основного фуксина, тионина; метиловый фиолетовый, кристал­лический фиолетовый и пиронин Б их рост подавляют. Тарасова Т. А. и соавт. (1983) получали гладкий вариантBr.ovisпассажем на средах с анилиновыми красителями. Мо­дифицированнаяBarrowG.,PeelM. (1987) селективная средаMairN. (1955) содержит, помимо антибиотиков, генциановый фиолетовый. Неспособность некоторых штаммовBr.abortusрас­ти на ней подтверждает их чувствительность к очень низким кон­центрациям красителя, признаваемуюMair N. (1955).

Окрашивание колоний L.pneumophilaбромкрезоловым пур­пурным и бромтимоловым фиолетовым в средеWadowskyR,YeeR. (1981) улучшает их идентификацию(Renner E., Tseng С,

Szynkiewicz Z., Binek M. (1986), оценивая селективные среды Для первичного выделения Т. hyodysenteriae и Т. innocens, опреде-

36

37

лили оптимальные концентрации наиболее эффективных инги­биторов, в том числе и бриллиантового зеленого.

По данным MishraS.etal. (1987) из селективных сред для первичного выделенияAeromonasspp. из фекалий животных содержащая бриллиантовый зеленый и соли желчных кислот оказалась наименее эффективной. Хотя наилучшей, в том чис­ле по чувствительности, оказалась среда, содержащая 30 мг/л ампициллина, для улавливания ампициллинчувствительных штаммовAeromonasи негемолитическихA.caviae, авторы реко­мендуют использовать комбинацию среды с ампициллином и среды, содержащей ДНК-азу, толуидин голубой и ампициллин 10 мг/л.

Для подсчета мезофильных видов клостридий WeenkG.etal.(1995) использовали агаровую среду с бромкрезоловым фиолето­вым.

Антибиотики

Селективные среды с антибиотиками для выделения ши-гелл в нашей стране разработаны Черномордиком А. Б. (1957). В качестве их основ применяют обычные коммерческие среды Плоскирева, ЭМС, Эндо с добавлением антибиотика, при вы­боре которого учитывают антибиотикограммы выделяемых в данной местности штаммов шигелл (тетрациклин, стрептоми­цин, левомицетин—у нас в стране и новобиоцин, ампициллин и др.—за рубежом, например в среде МакКонки). Ценность сред с антибиотиками теснейшим образом связана с контролем спектра антибиотикоустойчивости шигелл. В условиях меняю­щейся тактики применения антибиотиков в терапии дизенте­рии, ветеринарной практике и т. д. штаммы шигелл могут не только приобретать новые, но и утрачивать прежние маркеры устойчивости. Последнее следует иметь в виду при конструи­ровании сред с антибиотиками (Прямухина Н. С. и соавт., 1980).

По данным CummingsM.etal. (1987), сравнивавшего 3 жид­кие среды, добавление пенициллина, полимиксина В, амфоте-рицина В и эритромицина положительно сказывается на выделе­нии М.hominis.

По Jorgensen J. et al. (1987) и Barry A. et al. (1988) определе­ние чувствительности Н.influenzaeк антибиотикам на среде НТМ сопоставимо, или даже эффективнее (для ампицилли­на, аугментина, бисептола, эритромицина и кларитромици-на), чем на других жидких и плотных средах, включая бульон Мюллера-Хинтона и шоколадный агар, рекомендованных На­циональным Комитетом по стандартам в клинической микро­биологии для этих целей. Особенно важно, что на среде НТМ возможно правильное определение чувствительности к три-

метоприм/сульфометоксазолу. DabernatH.etal. (1993) опреде­ляли на этой среде чувствительность Н.influenzaeк р-лакта-мам.

В качестве селективной при исследовании загрязненных проб используется среда с неомицином, фурацилином и фураги-ном (Шипицын А. Н., Слинько В. Г., 1979).

Adler В. et al. (1986) предлагают для выделения лептоспир из клинического материала, контаминированного посторонней микрофлорой, полужидкую твин-альбуминдвую средуEMJH, в состав которой включены актидион, бацитрацин, 5-фторурацил, неомицина сульфат, полимиксин В и рифампицин.

SzynkiewiczZ.,BinekM. (1986) определили оптимальные концентрации наиболее эффективных ингибиторов (спектино-мицина и ванкомицина) в селективных средах для первичного выделения Т.hyodysenteriaeи Т.innocens.

По данным KunkleR.etal. (1988) концентрация микробных клеток Т.hyodysenteriae, выращенных на триптиказо-соевом ага­ре с добавлением спектиномицина; колистина и ванкомицина; либо спирамицина, рифампицина, ванкомицина, колистина и спектиномицина была идентичной.

Комплекс антибиотиков используется в плотных селектив­ных средах для выделения кампилобактерий из фекалий людей и внутренних органов животных и птиц.

Голиков А. В., Зенин И. В. (1980) предлагают среду ПСТК для выделения термофильных кампилобактерий (С. jejuniи С.coli) из фекалий, селективными компонентами которой яв­ляются рифампицин, подавляющий рост грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов; полимиксин М, актив­ный в отношении грамотрицательных микроорганизмов, и противогрибковый препарат нистатин. Перечисленные препа­раты не подавляют рост термофильных кампилобактерий (MICболее 100 мкг).

Bolton F. et al. (1988) исследовали эффективность для выделе­ния из фекалий кампилобактерий следующих селективных ага­ров:Skirrow,Preston,Fennellи модифицированный агар ССД. Самой селективной оказалась средаFennell. На основании полу­ченных результатов для выделения Campylobacter рекомендуется модифицированный агар ССД с амфотерицином.

Для подавления сопутствующей микрофлоры наиболее по­пулярна комбинация селективных агентов по Скирроу (Skirrow): 10 мг/л ванкомицина, 2500 МЕ/л полимиксина В, 5 мг/л триме-топрима (Рожавин М. А., Струк В. М., 1989; Krajden S. et al, 1987; CoudronP.,KirbyD., 1989). В связи с тем, что полимиксин В не­редко угнетает рост С.pylori, он был заменен цефсулодином. а для подавления роста грибов добавлен амфотерицин В, что су­щественно повысило эффективность среды (DentJ.,McNaltyС, 1988). Кроме того, к средам добавляют цефалексин, налидиксо-вую кислоту, бисептол, рифампицин, полимиксин М и др. как по

38

39

отдельности, так и в различных сочетаниях (Чайка Н. А. и соавт., 1988; Иванов В. П. и соавт., 1991; Patton С. et al., 1981; Bolton F. et al., 1984; Goodwin С et al., 1985; Rinkard K. et al., 1986; Barbosa A. etal., 1988;ParsonnetJ.etal., 1988).

QueirozD.etal. (1987) разработали индикаторную среду для С.pyloriна основе сердечно-мозгового агара с добавлением ван-комицина, налидиксовой кислоты, амфотерицина В.

LambertТ.etal. (1986) установили наибольшую ингибирую-щую активность С.pyloriу пенициллина, ампициллина, амокси-циллина, цефотаксима, тобрамицина, гентамицина и тетрацик­лина; несколько меньшая—у цефалотина, канамицина и эритро­мицина. Все штаммы были резистентны к ванкомицину, но многие культуры были достаточно чувствительны к колистину и налидиксовой кислоте. Значительная резистентность С.pyloriотмечалась к цефсулодину.

RiedelВ.etal. (1987) для выделения термофильных кампило-бактерий использовали агар Колумбия с селективными добавка­ми, ингибирующими рост контаминантных бактерий (10 мг/л ванкомицина, 2,5 МЕ/л полимиксина В, 15 мг/л цефалотина и 2 мг/л амфотерицина В). Выделенные штаммы С.jejuniобладали высокой чувствительностью к доксициклину, неомицину, эрит­ромицину, фуразолидону и амоксициклину. Некоторые культуры были устойчивы к хлорамфениколу и абсолютно все штаммы С.jejuni—резистентны к сульфаметоксидиазину.

Известно, что возбудители сапа и миелоидоза чувствительны к тетрациклину, новобиоцину, канамицину, хлорамфениколу, то­гда как антибиотикограммы Ps. fluorescens и Ps. putida носят иной характер—они чувствительны к полимиксину и антибиотикам-аминогликозидам (Von Graevenitz A., 1985). Более подробно видо­вая чувствительность псевдомонад к различным антибиотикам рассмотрена в монографии Смирнова В. В., Киприанова Е. А. (1990).

Рассмотрим вкратце отдельные антибиотики, наиболее часто используемые в микробиологических средах.

Препараты нитрофуранового ряда(производные 5-нитрофу-рана)—фурациллин, фурагин, фурадонин.ZacharianP.,ListenJ. (1973) установили отсутствие влиянияфурагинана ростPs.aeru­ginosaпри угнетении развития других микроорганизмов. Используется фурагин в сочетании сфурапилиномв средах для выделения лептоспир (Шипицын А. Н., Слинько В. Г, 1979) иPs. aeruginosa (Ароне Р. М., Чурсина Т. В., 1975, 1976). Кроме то­го, для выделенияPs.aeruginosaприменяются фурациллин сфу-радонином(MosselD.etal., 1976;NegrettiE,TrabattoniC, 1984). Фурадонин в качестве ингибитора сопутствующей микрофлоры входит в состав селективной среды для выделения кишечных иерсиний (Бондаренок В. М. и соавт., 1983).

Пенициллинрекомендуется вводить в среды для подавления сопутствующих видов микроорганизмов при выделении псевдо-

40

монад, в частности возбудителя мелиоидоза (MillerW.etal.,1948), Ps. aeruginosa (Sands D., Rovira A, 1970; Тыдельская И. Л. и соавт., 1980). Недостатком этого антибиотика является невоз­можность длительного (более 2 нед) хранения готового состава сред в холодильнике из-за инактивации (Рожавин М. А., Бугаева Е. А., 1986). Калина Е П., Комзолова Н. Б. (1988) рекомендуют для накопленияPs.aeruginosaзаменить в средеBondeпеницил­лин на кристаллический фиолетовый как более мягкий ингиби­тор—эффективность этой модифицированной среды проверена на большом материале и признана официально.Ps.malleiдоста­точно чувствительны к пенициллину, который, наряду с посто­ронней микрофлорой, тормозит и их рост. Важно отметить что бензилпенициллин является питательным субстратом для па­тогенного микроорганизмаPs.cepacia, вызывающего более тя­желые осложнения и больший процент летальных исходов, чемPs.aeruginosa(PrinceA., 1986).

Устойчивость микоплазм к пенициллину позволяет исполь­зовать его в качестве селективного агента. CummingsM.etal.(1987) показали увеличение выделяемое™ М. hominis при добав­лении в среду культивирования 500 ЕД/мл пенициллина. Жевер-жеева И. В. и соавт. (1983) добавляли в среду 1000 ЕД/мл пени­циллина. Однако некоторые виды (М.neurolyticum,M.hyopneu-moniae,M.floculare) более чувствительны к нему.RaddiM.etal.

(1992)рекомендуют культивировать уреаплазмы, в частностиU.urealyticum, в клинических лабораториях на средеU-9, в со­ став которой входит пенициллин.

Среда G20G, содержащая пенициллин (Smith I., Baskerville A., 1979), и агар МакКонки, куда дополнительно вводят пенициллин и нитрофурантин (Elias В., Galgoczi В., 1981), используются для изоляции Bord. bronchiseptica (Smith I., Baskerville A., 1979). Наи­более эффективно добавление в питательную среду комбинации пенициллина с фуралтадоном (Hommez J. et al., 1984). Vidic В. et al.

(1993)на различных плотных средах исследовали чувствитель­ ность Bord. bronchiseptica к ряду антибиотиков. Наилучшие ре­ зультаты получены при использовании кровяного и FC—агаров, содержащих пенициллин в сочетании с цепорексом или с нитро- фурантином (68-69,4%).

Пенициллин используется в среде для выделения возбудите­ля туляремии из материалов обильно обсемененных другими ми­кробами (Кундин В. А., 1969). Однако эта среда слабочувстви­тельна и имеет низкие ростовые свойства (Сухарь В. В. и соавт., 1989).

В состав полужидкой среды Погореловой Н. П. (1984) для J-enterocoliticaпомимо других компонетов вводятся 20 ЕД/мл пенициллина в сочетании с полимиксином.

Отмечается чувствительность к бензилпенициллину 95,4% штаммов цитробактеров, выделенных из фекалий людей и из внешней среды (Садыкова М. Ш. и соавт., 1986).

41

Красильников А. П. и соавт. (1972) предложили специальный бромтимоловый агар с пенициллином для диагностики склеро­мы и озены (клебсиеллы).

В средах Campbell L., Roth G. (1975) ингибитором ряда бакте­рий является пенициллин, тогда как для группы Клебсиелла-Энтеробактер-Серратиа он селективен.

LambertТ.etal. (1986) установили высокую ингибирующую активность пенициллина применительно к С.pylori.

Пенициллин входит в состав селективной среды VPBCдля парагемолитических вибрионов, где подавляет, по оценкеUshiji-maТ.etal. (1985), рост большинства энтеробактерий, стафило­кокков, клостридий, бифидумбактерий и некоторых других.

Неустроева В. В. и соавт. (1983) культивировали L-формы стрептококка на среде с 1000 ЕД/мл пенициллина. ОтмечаетсяL-трансформации микобактериальных клеток под воздействием пенициллина (Шим Н. В. и соавт., 1989).

Бойков Ю. И. (1968) рекомендует дифференцировать В. ап-thracisпо росту на МПА с пенициллином. ОтмечаетсяL-транс-формация микобактериальных клеток под воздействием пени­циллина (Шим Н. В. и соавт., 1989).

Карбенициллин. Evans M. et al. (1986) продемонстрировали слабую вариабельность чувствительностиPs.aeruginosaк нему в 10 видах жидких сред, главным образом являющихся модифика­циями бульона Мюллера-Хинтона.

Бондаренок В. М. и соавт. (1983) в селективной среде для вы­деления кишечных иерсиний в качестве ингибитора сопутствую­щей микрофлоры использовали, в частности, карбенициллин.

По данным Садыкова М. Ш. и соавт. (1986) 59,4% штаммов цитробактеров, выделенных из фекалий людей и из внешней среды, чувствительны к этому антибиотику.

Thorn В. (1970), Davis Т., Matsen J. (1974), Bagley S., Seidler R. (1978) выделяли клебсиеллы из фекалий на селективной среде с основой из агара МакКонки со 100 мг/мл и менее карбеницилли-на, в связи с высокой резистентностью к нему данных микроор­ганизмов. Распознавание на этой среде клебсиелл было лучше,чем на агаре Эндо. Тем не менее, позже Tomas J. et al. (1986) заме­нили карбенициллин теллуритом калия. Показано некоторое преимущество последней среды и, кроме того, она пригодна к употреблению в течение 10 нед при 4°С. Однако интерес иссле­дователей к карбенициллину не остыл (Пахил С. И., 1992). Пого-релова Н. П. (1995) сконструировала простую высокочувстви­тельную и селективную среду для выделенияKl.pneumoniae, основанную на нитрат-сахарозной среде ИСК и включающую 10 мкг/мл карбенициллина.

HolmA.etal. (1987) сообщают о модификации агара из триптического перевара сои с рядом компонентов, в том числе и карбенициллином—среда Н для выделения Н.aphrophilusбактерий при различных заболеваниях полости рта. При этом

массивная контаминация посевов на средах снизился с 52 до 2%, а количество колоний Haemophilusдаже увеличивалось. По сравнению с кровяным агаром ростHaemophilusна этой среде угнетался не более, чем в 10 раз, в то время как рост сопутству­ющей микрофлоры (6 шт.CapnocytophagaиNeisseria)—в 1000— 1000 000 раз.

MitchisonD.etal. (1972, 1973) усовершенствовали селектив­ную агаровую среду 7Н10 для микобактерий добавив комплекс антибиотиков, включающий и 100 мкг/мл карбенициллина (PACT). В дальнейшемMcClatchyetal. (1976) уменьшили кон­центрацию последнего в этой среде до 50 мкг/мл. В связи с инги-бирующим действием на рост микобактерий, а также со слабым влиянием на рост псевдомонад средыPACT, разработана смесьPANTA, где карбенициллин заменен другими антибиотиками. Продемонстрированы существенные преимуществаPANTAпо сравнению сPACT(TiceL.,RobertsG., 1986;SiddigiS.,Hwang-bo C, 1986; Libonati J. et al., 1986), в частности снижение количе­ства проростов до 2% при той же длительности выявления мико­бактерий.

Полимиксины В и Мподавляют грамотрицательную микро­флору. Учитывая малую чувствительность возбудителя мелиои-доза к полимиксину Ширяев Д. Т. и соавт. (1976) рекомендуют добавлять его в среды для исследования проб.

Полимиксин В вместе с бацитрапином входят в состав среды OFPBLдля выделенияPs.cepacia(WelchD.etal., 1987).

Жога Л. К. и соавт. (1995) в транспортной среде для патоген­ных псевдомонад в качестве ингибиторов сопутствующей мик­рофлоры использовали, в том числе, 0.0025 г/л полимиксина. Возбудитель сапа относительно устойчив к полимиксину (MIC1000 мкг/мл), который применяется в соответствующих средах для подавления посторонней микрофлоры. Тем не менее, при прямом посеве он задерживает рост иPs.mallei.

По данным Cumrnings M. et al. (1987) добавление полимикси­на В в комплексе с другими антибиотиками повышало эффек­тивность выделения М.hominisна средеSP-4.

Этот антибиотик входит в состав полужидкой твин-альбуми-новой среды EMJHдля выделения лептоспир из клинического материала, контаминированного посторонней микрофлорой (AdlerB.etal., 1986).

В различных сочетаниях с другими антибиотиками он содер­жится в среде для гонококков ThayerJ.,MartinJ. (1964) и ее мо­дификации (Кунцевич Л. Д. и соавт., 1975;AlessiE.etal, 1982 и др.). Недостатком указанных сред является чувствительность части гонококков к данным антибиотикам, вследствие чего оп­ределенный процент заболеваний гонорейной инфекцией не подтверждается бактериологически. Ухудшает культуральную диагностику гонореи также нестабильное подавление перечис­ленными средами сплошного роста сопутствующей микрофлоры

42

45

в связи с повышением антибиотикорезистентности нормально вегетирующей на слизистых микрофлоры вследствие широкого, не всегда контролируемого применения антибиотиков и форми­рования перекрестных антибиотикоустойчивых штаммов бакте­рий. Известное множество других сред с селективными добавка­ми (BergerU., 1966;GranatoP.etal., 1980;MirretS.etal., 1981 и др.) в какой-то степени отражает необходимость создания улуч­шенной селективной среды для изоляции и роста гонококков. Полимиксин входит также в состав сред для выделения гонокок­ков Овчинникова Н. М., Яцухи М. В. (1970), Гаджиевой Г. Р. и со-авт. (1989),Evans G. et al. (1989).

Полимиксин содержат высокоселективная среда FarrellI.,Robinson L. (1972) для бруцелл, среда Wadowsky R., Yee R. (1981) для изоляцииL.pneumophila, элективная среда для культивиро­вания листерий (Метод, рекомендации ..., 1987).

Предварительный посев используемого материала в солевой бульон с полимиксином В позволяет повысить специфичность TCSB-arapa, широко используемого для выделения вибрионов. В связи с неадекватностью имеющихся сред для выделения пато­генных вибрионов, Massad G., Oliver J. (1987) разработали высо­коизбирательный в отношенииV.choleraeиV.vulnificusCPC-агар, также содержащий полимиксин В.

Полимиксины М и В входят в комбинацию антибиоти­ков по SkirrowМ. (1977), а также в состав среды ПСТК (Голи­ков А. В., Зенин И. В., 1980), используемых для выделения кампилобактерий.SchulzeF.etal. (1987) выделяли и дифферен­цировали кампилобактерии на агаре Мюллера-Хинтона с ком­плексом антибиотиков, включающим 5000 МЕ/л полимикси­на В. Колтс К. К. и соавт. (1990) при выделении С.pyloriиз биоптатов слизистой желудка добавляли в среду 40 000 ЕД/л полимиксина М.CelliniL.etal. (1992) предложили для выра­щивания и определения уреазной активности у С.pyloriмоди­фикацию агара Колумбия, где селективность достигалась доба­влением антибиотиков, в том числе полимиксина В.Campy­lobacter-селективный комплекс фирмы «Oxoid», добавляемый в среды для выделения С.jejuni, содержит 5 антибиотиков, в том числе 92 500 МЕ/л полимиксина В. Для выделения кам­пилобактерийChanЕ,MackenzieА. (1986),GerickeВ.,Reiss-rodtR. (1986),RiedelB.etal. (1987), Сотирова П., Александро­ва Ст. (1989) использовали среды с селективными добавками, включающими полимиксин.

Полимиксин входит в состав желчно-цитратной и щелочно-полимиксиновой сред для количественного учета энтерококков (Рекомендации..., 1972) и молочной среды для идентификации энтерококков (Калина Г. П., 1973).

При выделении В. cereus рекомендуется посев осуществлять в солевом полимиксиновом агаре Пивоварова Ю. П. (1970) и среде ЖАМПФ (желточный агар с маннитом, полимиксином и феноло-

вым красным). В сравнении с традиционной средой Mossel (MYP) для изоляции, идентификации и предварительного подсчета В.cereus и соответствующих видов В. thuringiensis, альтернативная селективно/индикаторная культуральная среда VRM (Devascon-cellos E, Rabinovitch L., 1995) не требует наличия антибиотиков, таких как полимиксин В. При этом В. megaterium в ней ингибиру-ется.

Полимиксин содержат модифицированный агар Яро-щук В. А. и соавт. (1985)—для выделения, и среды Ставрополь­ского НИИВС—для обнаружения и лабораторной диагностики сибиреязвенного микроба (Метод, указания ..., 1986). Высокой чувствительностью, по данным Тартаковского И. С. и соавт. (1983), Airlie W. (1987), обладает буферный угольно-дрожжевой агар с полимиксином. Входит этот антибиотик и в состав полу­жидкой среды Погореловой Н. П. (1984).

Дрожжеподобные и грибы рода Candida рекомендуется выде­лять на среде Сабуро с 200 мг/мл полимиксина (Грачева Н. М. и соавт., 1986).

MitchisonD.etal. (1972, 1973) усовершенствовали селектив­ную для микобактерий агаровую среду 7Н10 добавив в нее 4 ан­тибактериальных агента, в том числе 200 ЕД/мл полимиксина В. Он представлен в составе антимикробных смесейMitchison(PACT) и PANTA, применяемых в средах для выявления микоба­ктерий. Последняя используется в комбинации со средамиBactec12Аи7Н12.

Thomas С. et al. (1989) показали ингибирование роста М. avi-um-intracellulare,M.xenopi,M.kansasiи М.fortuitumна различ­ных нерадиоактивных жидких средах (Bactec6A, сердечно-моз­говой бульон, среда Дюбо и некоторые модификации среды Кирхнера) при добавлении антибиотиков пиперапиллина, ам-фотерицина В, полимиксина В.

Для выделения CI.perfringensи его количественного опреде­ления рекомендуется применение среды СПН (сульфит-поли-миксин-неомициновая среда) (Метод, письмо ..., 1971).

Изящный вариант методики подсчета спор мезофильных ви­дов клостридий в сухих продуктах предлагают WeenkG.etal. (1995), использовавшие сочетание дифференциального клостри-диального (DCA) и маннитол-яичный желток-полимиксин-бромкрезоловый фиолетовый-агаров.

EisgruberH.,ReuterG. (1995) отмечают селективность, суль-фитредуцирующую способность и ростовые свойства для клост­ридий сульфит-полимиксин-сульфадиазинового (SPS) и олеан-домицин-полимиксин-сульфадиазин-перфрингенс-селективно-го (OPSP) агаров.

Элективная среда Дзюбак А. П. (1993) для выделения пато­генных стрептококков содержит 500—1000 ЕД/мл полимиксина.

VanEnkR.,ThompsonК. (1992) предложили для выделения метициллинустойчивыхSt.aureusмодифицированную селектив-

44

45

но-дифференциальную плотную среду с 10 мг/л полимиксина В. На ней росли также метициллинустойчивые St.xylosus(диффе­ренцируют пробой на коагулазу), а также Candida tropicalis и Pro­teus mirabilis (не ферментируют, в отличие от St. aureus, маннит). Для выделения стафилококков из пищевых продуктов использу­ется и теллурит-полимиксин-желточный агар (VaradarajM.,Ran-ganathanB., 1985).

Стрептомицин.Учитывая малую чувствительность возбу­дителя мелиоидоза к стрептомицину Ширяев Д. Т. и соавт. (1976) рекомендуют при исследовании проб добавлять в среду 50 мкг/мл его. Такие количества, подавляя рост большинства видов посторонней микрофлоры не угнетали рост музейных штаммов возбудителя мелиоидоза.

В известную среду ADMдля дифференциацииAspergillusпозднее был введен стрептомицин (HockingA.,PittJ., 1986).ShiptonW,ZahariP. (1987) для выделения возбудителя базидио-боломикоза из патологического материала предварительно обра­батывали его раствором пенициллина (20 МЕ/мл) и стрептоми­цина (40 мкг/мл).

В зависимости от антибиотикограммы штаммов, стрептоми­цин может входить в состав селективных сред для выделения ши-гелл (Черномордик А. Б., 1957).

Klink E., Smulder E (1990) выделили из печени, почек и мышц откормленных телят серотипSal.dublinчувствительный, в част­ности, к стрептомицину.

Тщательно исследовали чувствительность М. bovisБЦЖ к стрептомицинуRousseaumP.,DupuisM. (1990).

Амфотерицин В. Cummings M. et al. (1987) отмечают эффек­тивность добавления комбинации антибиотиков, включающей амфотерицин, в среды для выделения М.hominis.

Этот антибиотик присутствует в среде EvansG.etal. (1989) для изоляции и роста гонококков.

Амфотерицин В входит в комплекс антибиотиков, использу­емых в плотных селективных средах для выделения кампилобак терий из фекалий (ChanE,MackenzieА., 1986; Султанов Г. В. и соавт., 1987;RiedelВ.etal., 1987;DentJ.,McNaltyС, 1988), сре­дах для выращивания и определения уреазной активности С.py­lori(CelliniL.etal., 1992) и индикаторных средах (QueirozD.etal., 1987 и др.). Bolton E et al. (1988) на основании сравнительных исследований эффективности различных сред для выделения из фекалий кампилобактерий рекомендуют модифицированный агар ССД с амфотерицином. Во многие среды для выделения С.jejuniдобавляетсяCampylobacter-селективный комплекс ан­тибиотиков фирмы «Oxoid», включающий 2 мг/л амфотерици-наВ.

Гаджиева Е Р. и соавт. (1989) предлагают оригинальную среду для выделенияU.urealyticum, включающую в свой состав и ам­фотерицин.

MitchisonD.etal. (1972, 1973) усовершенствовали селектив­ную для микобактерий агаровую среду 7Н10 добавив в нее среди других антибиотиков и 10 мкг/мл амфотерицина В.

По данным ThomasС.etal. (1989) добавление в различные нерадиоактивные жидкие среды амфотерицина В ингибировало рост М.avium-intracellulare,M.xenopi,M.kansasiи М.fortuitum.Этот антибиотик входит в состав сред PACT и PANTA для выяв­ления микобактерий (Tice L., Roberts G., 1986; Siddigi S., Hwang-bo C, 1986; Libonati J. et al., '986).

Левомицетин.При выборе антибиотиков в средах для вы­деления шигелл учитывают антибиотикограммы выделяе­мых в данной местности штаммов (например к левомицети-ну у нас в стране). Рекомендуется добавлять левомицетин в наиболее часто употребляемые в лабораториях среды Плоски-рева и Левина, т. к. в последние годы среди шигелл доминиру­ют варианты устойчивые к ним (Черномордик А. Б. и соавт., 1976).

К левомицетину чувствительны 59,4% штаммов цитробакте-ров, выделенных из фекалий людей и из внешней среды (Сады-кова М. Ш. и соавт., 1986).

При выявлении патогенных микроорганизмов иммунофлуо-ресцентным анализом рекомендуется подращивание исследуе­мых материалов на простых или элективных средах, в качестве которых можно применять МПБ с левомицетином (Наставле­ния..., 1969).

Новобиоцин.При выборе антибиотика в средах для выде­ления шигелл учитывают их антибиотикограммы (новобио­цин, ампициллин и др.—за рубежом, например в среде Мак-Конки).

В качестве селективных агентов в средах для выделения Ps.aeruginosaиспользуют новобиоцин в сочетании с пеницилли­ном (Sands D., Rovira А., 1970). Azad H, Cooksey D. (1995) разра­ботали для изоляцииPs.savastanoiвысокоселективный агар ОКА, обладающий хорошими ростовыми свойствами и содержа­щий из антибиотиков также новобиоцин.

MattarS. (1994) оценивали эффективность выделения раз­личных энтеробактерий (Е. coli, Salmonella sp., Shigella sp.) на ря­де сред, в том числе на бриллиантовом зеленом-глицерин-ново-биоцин-лактозном агаре.Salmonellasp. обнаруживались в 77,2% на этой среде, которая является селективной дляShigellasp. (100%).

Для лабораторной диагностики вибриоза Центральной ве­теринарной лабораторией рекомендована (1979) сафранино-железо-новобиоциновая (СЖН) среда Голикова А. В. и соавт. (1969).

Используя среду NNS, содержащую новобиоцин, нитрат на­трия и сахарозу, Tondella M. et al. (1989) дифференцировали уро­логические штаммы St. saprophyticus от других видов коагулазоо-

46

47

трицательных стафилококков. Чувствительность метода—95,5%, специфичность—100%.

Watts J. et al. (1991) показали возможность использования по­сева в бульон с арабинозой и целлобиозой при скрининге штам­мов коагулазоотрицательных стафилококков, устойчивых к но-вобиоцину.

По данным YabuК. (1991) при добавлении к 6-часовой куль­туреSt.aureusновобиоцина в концентрациях, подавляющих ми­кробный рост, вместо крупных везикулярных телец образова­лись малые тельца без везикул. Выживаемость культур снижа­лась. Одной из сред для выделения и идентификации стафилококков, представленных в методических рекомендаци­ях Вальвачева Н. И. и соавт. (1984) является среда для определе­ния устойчивости к новобиоцину.

Ампициллин.Жога Л. К. и соавт. (1995) сконструировали транспортную среду для патогенных псевдомонад в состав кото­рой входили в качестве ингибиторов антибиотики и красители ампициллин—0,01г/л; полимиксин—0,0025 г/л; генциановый фиолетовый—0,0025 г/л. Ингибиторы роста сопутствующей ми­крофлоры не влияли на возбудителей сапа и мелиоидоза, устой­чивых к ампициллину (MIC250—500 мкг/мл), полимиксину (1000 мкг/мл) и генциановому фиолетовому.

При выборе селективных агентов при выделении шигелл учитывают антибиотикограммы местных штаммов (новобиоцин, ампициллин и др.—за рубежом, например в среде МакКонки). По данным JorgensenJ.etal. (1987)MICампициллина на средеHTMнесколько выше, чем на других.

LambertТ.etal. (1986) установили высокую ингибирующую способность С.pyloriк ампициллину.

Агар ОКА для изоляции Ps.savastanoi(AzadH.,CookseyD., 1995) содержит, помимо других антибиотиков, также 0,015 г/л ампициллина.

Для выделения Aeromonasрекомендуется агар с бараньей кровью (эритроцитами), дополненный ампициллином (Mish-raS.etal., 1987). Для того, чтобы не пропустить ампициллин-чувствительные штаммыAeromonasи негемолитические А. са-viae, авторы рекомендуют использовать комбинацию среды с ампициллином и среды, содержащей ДНК-аза-толуидин голу-бой-ампициллин 10 мг/л.AbeytaС.etal. (1986) получены высо­кие результаты по выявлениюA.hydrophilaиз образцов окру­жающей среды с использованием триптического соевого буль­она с ампициллином (TSBA). Во все среды предложенные Jeppesen С. (1995) для количественной оценки Aeromonas spp. из образцов продовольствия входит ампициллин и наилучшей из них является крахмал-ампициллиный агар (starch ampicillin agar—SAA), хотя можно использовать и другие: ампициллин-желчные соли-инозитол-ксилозный агар (ampicillin bile salts in­ositol xylose-MIX agar), ампициллин-декстриновый агар (ampi-

cillin dextrin agar—ADA), крахмал-глутамат-ампициллин-пени-циллин С-глюкозный агар (starch glutamate ampicillin penicillin C-glucose agar—SGAP-ЮС) в дополнении к SAA.

KellyM.etal. (1988) провели комплексное двухэтапное ис­следование по оценке 4 сред (агар МакКонки, содержащий 100 мкг/мл ампициллина и 1% твина-80; кровяной агар без и с 20 мкг/мл ампициллина—КАА;CIN-arap; а также комбинация КАА иCIN-агаров) для выделения шт.Aeromonasиз фекалий, определения значения чувствительности к ампициллину в вы­боре культуральных сред и роли (3-гемолизина в скрининге кровяных сред дляAeromonas. Комбинация КАА иCIN-arapaпозволяла добиться 100%-ого выделенияAeromonas. Все штам­мы, выявленные на кровяном агаре, были также выделены на КАА; 89% штаммов, выделенных на этой среде, обладали спо­собностью к р-гемолизу. Отмечается, что КАА—наилучшая среда для выделенияAeromonasиз фекалий, но оптимальным является использование более чем одной среды.

KlinkЕ.,SmulderF. (1990) выделили штаммыSal.dublinустойчивые к хлорамфениколу и тетрациклину, но чувстви­тельные к ампициллину, канамицину, неомицину и стрептоми­цину.

Бурдь В. Н. и соавт. (1994) селекционировали трансформанты Е.coliна плотных средах с 100 мкг/мл ампициллина, 40 мкг/мл 5 бром-4-хлор-З индолил-(3-0-галактопиранозида и 0,2 мМ изо-пропил-Р-О-тиогалактопиранозида.

Alsima M. et al. (1994) предлагают осуществлять предположи­тельную идентификациюV.anguillaramна дифференциальной средеVAM(наличие желчных солей, ампициллина, высокий рН и большая концентрация хлорида натрия).

ChangТ. (1995) разработал селективную среду для изоляцииPhellinusnoxius, содержащую 20 г/л солодового экстракта, 20 г/л агара, 10 мг/л беномила, 10 мг/л дихлорана, 100 мг/л ампицилли­на и 500 мг/л галловой кислоты. Для изоляции P. noxius из почвы добавляли 1000 мг/л тертиголаNP-7 с целью ограничения от­дельных колоний. Сравнение этой среды с другими используе­мыми для изоляции гименомицетов показало большую эффек­тивность ее для изоляцииP.noxius.

Тетракциклин.При разработке сред с антибиотиками для вы­деления шигелл необходимо учитывать антибиотикограммы ме­стных штаммов (тетрациклин, стрептомицин, левомицетин—у нас в стране).

LambertТ.etal. (1986) установили наибольшую ингибирую­щую активность для С.pyloriу 7 антимикробных препаратов из 20, в том числе у тетрациклина, при посеве материала из слизи­стой оболочки желудка на шоколадный агар или среду для выде­ления бруцелл с 10% крови барана.

WoodfordN.,IsonС. (1988) определяли на агарах для диаг­ностического теста чувствительности с 5% лизированной кро-

48

49

ви лошади с 1% изовиталекса (IsoVitaleX): (рассматривался как стандарт) и без него;GCиProteose№ 3 с 1 % гемоглобина чув­ствительность различных штаммов N.gonorrhoeaeк пеницил­лину, цефуроксиму тетрациклину и эритромицину. Различий у двух первых агаров не обнаружено. На агареProteoseпо срав­нению со стандартомMICко всем антибиотикам, кроме эрит­ромицина, была снижена. На агареGCгонококки были менее чувствительны к эритромицину и более чувствительны к тетра­циклину по сравнению со стандартным агаром. Однако влия­ния агараGCна чувствительность к р-лактамным соединени­ям не обнаружено, хотяMICбыли несколько выше, чем на стандартной среде.

DillonJ.etal. (1987) показали отсутствие влияния добав­ления гемоглобина к средам на величинуMICпенициллина, спектиномицина и эритромицина, тогда какMICтетрацик­лина на среде с гемоглобином была на два и более разведения выше.

Vidic В. et al. (1993) исследовали чувствительность Bord. bron-chisepticaк различным антибиотикам и терапевтическим аген­там, в том числе к тетрациклину при культивировании на следу­ющих агарах: кровяной; МакКонки, содержащий 1% декстрозы; Эндо; триптон-соевый, пептонный,Bordet-Gengou, древесно-угольный иFC. Последний содержал 10 г/л пептона; 10 г/л лак­тозы; 10 г/л глюкозы; 3 г/л мясного экстракта; 1,5 г/л желч­ных солей; 5 г/лNaClи 6,6 мл/л 0,2%-ого фенолового красного, рН-7,4.

Klink E., Smulder F. (1990) выявили намного большую эффек­тивность среды Раппапорта-Вассилиадиса в сравнении со средой Мюллера-Кауффмана при выделении'Sal.dublinиз печени, по­чек и мышц откормленных телят. Все выделенные штаммы были устойчивы к хлорамфениколу и тетрациклину.

Стимулирующим эффектом на синтез термолабильного эн-теротоксина Е. coliобладают сублетальные дозы линкомицина и тетрациклина (YohM.etal., 1983). По этой причине Мартынен-ко Л. Д. и соавт. (1994) при глубинном культивировании этого микроорганизма в МПБ дополнительно вводили, кроме прочих компонентов, 15 мг тетрациклина и 90 мкг/мл линкомицина для усиления синтеза энтеротоксина (Степанова М. В. и соавт, 1985).

По данным Садыкова М. Ш. и соавт. (1986) 59,4% штаммов цитробактеров чувствительны и к тетрациклину.

Мультиустойчивость к антибиотикам у видов рода Vibrioвстречается редко, однако, уже выделены штаммы устойчивые к тетрациклину (KhemiriF.etal., 1991).

FriisN.,SzancerJ. (1994) показали значительное интибирова-ние рядом сильнодействующих антимикробных агентов, в том числе тетрациклином, М.hyosynoviae,M.hyopneumoniae,M.dis-

parи М.bovisпри использовании тестирующей жидкой среды и дискового анализа.

Lenovich L. et al. (1984) сравнили 4 среды для подсчета дрож­жей и плесневых грибов в инфицированных сухих продуктах. На средеPDAс хлортетрациклином и хлорамфениколом (CCPDA) отмечались разрастание колоний большинства выделяемых плесневых грибов и сильно спорулирующий воздушный мице­лийMucorales. На средеCCPDA, содержащей 2,5 мкг/мл дихло-рана, имело место разрастание колонийAspergillusflavus,Al-ternariaиPaecilomyces.

HastingsJ.etal. (1986) определяя количество плесневых гри­бов в пище на общей среде TPDA (PDA «Difco» и 40 мг/мл тетра­циклина) и селективной средеDRBC, сделали вывод, что присходных результатах на TPDA легче распознать род по типу коло­ний. Однако недостатком этой среды является чрезмерный рост грибовMucorи рекомендуется использовать ее при высокой контаминации образцовRhizopusиMucor.

DeakТ.etal. (19866) представили результаты сравнительно­го исследования двух референс-средDG18 иDRBC, изготов­ленных фирмой «Oxoid», с 3 средами, приготовленными в на­учно-исследовательских лабораториях для рутинной работы. Все 3 среды имели одинаковую основу—глюкозо-дрожжевой агар. Но к средеOGYдобавляли окситетрациклин, к средеCGY—хлорамфеникол, а средаAGY(подкисленный глюкозо-дрожжевой агар) имела тот же состав, что иOGY, но без окси-тетрацилина. За исключением двух случаев не отмечались зна­чительные различия в исследованных средах. При количест­венном определении плесневых грибов в непросеянной муке наибольшее количество их получено наCGY, тогда как с пше­ничной мукой результат был хуже на AGY, чем на любой другой среде. При количественном определении дрожжей не выявле­но различий в качестве сред.

DijkmannК. (1986) изучал достоинства и недостатки средDG18,DRBCпроизводства «Oxoid»,OGYиOGGY(OGYс гентамицином) для количественного определения дрожжевых и плесневых грибов при исследованшг сырого мяса. В качестве основных ингибиторов для бактерий использовали хлорамфе­никол, окситетрациклин, гентамицин. а для ограничения рас­пространения грибов—бенгальский розовый и/или дихлоран. СредаDG18 обеспечивала наилучшие результаты для дрожже­вых грибов, достаточно подавляла рост бактерий, проста в при­готовлении, но ингибировала рост и некоторых плесневых гри­бов. СредаOGYтакже эффективна при количественном опре­делении дрожжевых и плесневых грибов, но ненадежна в качестве дифференциальной среды.OGGYдостаточно подав­ляет рост бактерий и может быть использована для количест­венного подсчета дрожжевых и плесневых грибов в сыром мя­се, домашней птице и рыбе, которые обычно сильно контами-

50

*

Я

нированы бактериями. СредаDRBCдолжна иметь более огра­ниченное применение.

Алексиева В., Ненков М. (1988) провели сравнительные ис­следования с целью установления качества и пригодности пив­ного агара и окситетрациклин-гентамицин-дрожжевого агара (OGY) с экстрактом глюкозы для количественного определе­ния плесеней и дрожжей в молочных продуктах. Установлена большая пригодность средыOGY, в сравнении с пивным ага­ром, благодаря повышенной селективности и выявлению большего числа проб молочных продуктов, контаминирован-ных дрожжами и плесенями, а выросшие на этой среде коло­нии крупнее и легче распознаются по морфологической харак­теристике. Рекомендуется стандартизироватьOGYпо Болгар­скому стандарту 1670-82.

Фузидин.У нас в стране входит в состав среды ЖЭКА (Сул­танов Г. В. и соавт., 1987) для выделения кампилобактерий.

ЦеФалотин. Сотирова П., Александрова Ст. (1989) определя­ли распространенность С.jejuniу цыплят посевом проб на среде,аналогичной по составу агару Колумбия («Difco») с добавлением по 2500 мг/л сульфата железа и пирувата натрия, 50 мл/л овечьей крови и антибиотиков: 10 мг/л ванкомицина, 5000VIполимик-сина и 30 мг/л цифалотина. Выращивание осуществлялось в микроаэрофильных условиях. Цефалотин входит в состав средЖЭКА (Султанов Г. В. и соавт., 1987), используемой у нас в стра­не, и ПА№ 3, применяемой в Чехословакии. Поданным Черкас­ского Б. Л. и соавт. (1989) чувствительность указанных сред рав­ноценна.

Рифампипин.С целью разработки селективной среды для выделения лептоспир из клинического материала, контамини-рованного посторонней микрофлорой,AdlerВ.etal. (1986) оп­ределялиMIC14 антибиотиков в отношении лептоспир серо-варовpomonaиSardjo, а также стандартных штаммов В.cereus,Ps.aeruginosa,St.aureus,Str.faecalis,Sacch.cerevisiaeиMu-corsp. На основании полученных результатов предлагается ре­цептура полужидкой твин-альбуминовой средыEMJH, в со­став которой включены актидион, бацитрацин, 5-фторурацил, неомицин-сульфат, полимиксин В и рифампицин в концент­рациях 0,1; 0,04; 0,25; 0,0002 и 0,01% соответственно.

В связи с низкой эффективностью имеющихся сред для вы­деления термофильных кампилобактерий (С. jejuniи С.coli) из фекалий, Голиков А. В., Зенин И. В. (1980) предлагают селек­тивную среду на основе сердечно-мозгового отвара, который по литературным данным наиболее полно отвечает питатель­ным потребностям кампилобактерий. Селективными компо­нентами ее являются рифампицин, подавляющий рост грампо-ложительных и грамотрицательных микроорганизмов; поли­миксин М, активный в отношении грамотрицательных микроорганизмов, и противогрибной препарат нистатин-по

1 мл растворов рифампицина (10 мкг/мл), полимиксина М (1 мкг/мл) и натриевой соли нистатина (25 мкг/мл) на 1 л сре­ды. Эти препараты не подавляют рост термофильных кампило­бактерий (MICболее 100 мкг/мл). Среда ПСТК оказалась эф­фективнее более чем в 3 раза среды ВИЭВ при выделении тер­мофильных кампилобактерий.

SchulzeF.etal. (1987) выделяли и дифференцировали бакте­рииp.Campylobacterна агаре Мюллера-Хинтона с добавлением 10% телячьей крови, 5000 МЕ/л полимиксина В и по 10 мг/л ри­фампицина и триметоприма. Отмечена высокая избирательность предлагаемой среды.

Колтс К. К. и соавт. (1990) в среды для выделения С. pylori(кровяной агар для бактероидов и тиогликолевую среду с резазуриновым индикатором) добавляли полимиксин М— 40000 ЕД/л, бисептол—5 мг/л, рифампицин—10 мг/л (PattonС.etal., 1981;BoltonF.etal., 1984). На плотной среде вырастали колонии кампилобактерий светло-коричневые, блестящие, полувыпуклые и полупрозрачные, а жидкая среда при наличии кампилобактерий становилась коричневой и выпадал белова­тый осадок. Результаты посевов оказались примерно одинако­выми, но жидкая среда с антибактериальными препаратами в некоторых случаях (21,4%) не угнетала рост стрептококков и дрожжей и, наоборот, в 19% случаев подавляла рост кампило­бактерий. Преимуществом же ее можно считать более быстрый рост кампилобактерий.

Рифампицин входит в состав среды ЖЭКА.

Ванкомипин(ристоцетин). 10 мг/л этого антибиотика входят в комбинацию селективных агентов по Скирроу (Skirrow) для кампилобактерий.

Среда для выращивания и определения уреазной активности у С. pylori Cellini L. et al. (1992) с основой из агара Колумбия для селективности имеет антибиотик ванкомицин.

Сотирова П., Александрова Ст. (1989) определяли распро­страненность С. jejuniу цыплят посевом проб на агаре Колумбия («Difco») с добавлением, помимо других компонентов, 10 мг/л ванкомицина.

ChanE,MackenzieA. (1986) провели оценку селективных сред и методов обогащения для выделения видовCampylobacter. Образцы фекалий высевали на 5 питательных средах: агарах дляBrucellaи Колумбия, жидкой и полужидкой средах обогащения, состав которых включал смесь антибиотиков, куда входил и три-метоприм.

Ванкомицин входит в состав используемой в Чехословакии для выделения кампилобактерий среды ПА № 3.

Технической находкой разработанной ими среды для изоля­ции и роста гонококков EvansG.etal. (1989) считают комбина­цию линкомицина с ванкомицином, что позволило снизить кон­центрацию последнего и, тем самым, выявить рост ванкомицин-

52 ф

53

чувствительных гонококков. Однако снижение концентрации антибиотика в ряде случаев стимулирует рост ванкомицинчувст-вительных штаммов стафилококка, в то время как часть ванко-мицинчувствительных штаммов гонококка продолжает подав­ляться и более низкой концентрацией ванкомицина. Отмечен­ные недостатки снижают селективные и диагностические свойства среды.

1 мкг/мл ванкомицина содержит среда, предложенная Wa-dowskyR.,YeeR. (1981) и являющаяся, по мнениюEdelsteinP. (1982), лучшей при изоляцииL.pneumophilaиз питьевой воды. Такое же количество антибиотика содержит угольно-дрожже­вой агар для выделения данного микроорганизма (Тартаков-ский И. С. и соавт., 1983).

Для создания селективных условий при выделении гемо-фильных палочек также используется ванкомицин (цит. по Фау-стовойМ. Е., 1980).

По данным KunimotoD.etal. (1986) в Кении для идентифи­кации Н.duckreyiприменяются различные среды (обогати­тельная гонококковая, агар Мюллера-Хинтона и модифициро­ванная средаBieling), с добавлением во всех случаях 3 мг/л ван­комицина.

Триметоприм.SchulzeEetal. (1987) добавляли 10 мг/г этого антибиотика в агар Мюллера-Хинтона при выделении и диффе-ренцировке кампилобактерий. 5 мг/л триметоприма входит в комбинацию селективных агентов по Скирроу (Skirrow), а также в состав среды ПА № 3.

ChanE,MackenzieA. (1986) провели оценку селективных сред обогащения для выделения видовCampylobacter, жидкой и полужидкой, состав которых включал смесь антибиотиков, куда входил и триметоприм.

Триметоприм содержится в среде для изоляции и роста гоно­кокков Evans G. et al. (1989), а также в средах Si и Si для выделе­ния флуоресцирующих псевдомонад (GouldW.Etal., 1985).

Ярощук В. А и соавт. (1985) предлагают при выделении сиби­реязвенного микроба из молока добавлять в агар Хоттингера три­метоприм.

Эритромицин.По даннымCummingsM.etal. (1987) добавле­ние смеси антибиотиков, включающей 100 мкг/мл эритромици­на, в средуSP-4 повышало эффективность выделения М.homi-nis.

Кроме перечисленных, в бактериальных средах используют­ся также кларитромицин, аугментин (амоксициллин+клавула-новая кислота), бисептол, триметоприм/сульфометоксазол, ба-цитрацин, клаксоциллин, актидион, бацитрацин, 5-фторурацил, неомицина сульфат, фурагин, этоний и др.