Достоинства расчета по калибровочному графику:

♦ простота и удобство при рутинном анализе однотипных по химическому составу растворов (серийные фотометрические анализы);

♦ возможность проводить количественное определение анализируемого вещества при несоблюдении закона Бугера-Ламберта-Бера. В этом случае градуировочный (калибровочный) график строят для узкого интервала концентраций, в пределах которого зависимость оптической плотности наиболее линейна.

Недостатки:

♦ появление погрешностей, связанных с субъективностью построения калибровочного графика, несоответствием графических (масштабных) погрешностей, погрешностей измерений оптических плотностей, связанных с изменением условий (например, температуры) и невоспроизводимостью установки длины волны.

В то же время расчет количественного содержания ЛВ в анализируемом образце по уравнению градуировочного (калибровочного) графика позволяет получить наиболее точные результаты.

3.2.1.2. Способ расчета количественного содержания по удельному показателю поглощения

Способ расчета основан на использовании указанного в НД или предварительно вычисленного (см. пример) значения удельного или молярного показателя поглощения. В НД чаще используется значение удельного показателя поглощения.

Согласно математическому выражению закона Бугера-Ламберта-Бера, оптическая плотность испытуемого раствора (А_х) пропорциональна С_х, удельному показателю поглощения () и толщине поглощающего слоя (l):

(3.26).

Преобразовав уравнение (3.26), находят содержание действующего вещества в фотометрируемом растворе:

(3.27).

Для расчета содержания действующего вещества в исходном образце (из которого приготовлен фотометрируемый раствор), необходимо учесть все выполненные операции по обработке исходного образца (приготовление исходного раствора, отбор аликвоты и последующие разведения).

В случае количественного определения фармацевтической субстанции (индивидуального ЛВ) методом фотометрии со способом расчета по удельному показателю поглощения содержание (g, %) рассчитывают по формуле:

(3.28)

где А_х – оптическая плотность фотометрируемого раствора; W₁ ;W₂ – вместимость мерных колб для приготовления фотометрируемого раствора, мл; V – аликвота исходного раствора, взятая для приготовления фотометрируемого раствора, мл; а – навеска анализируемого образца, взятая для приготовления исходного раствора, г; l – толщина кюветы, см.

ПРИМЕР: Оцените качество образца фурадонина (нитрофурантоина) по количественному содержанию (согласно ФС должно быть не менее 98,0% и не более 102,0%), если 0,0986 г (а) субстанции внесли в мерную колбу вместимостью 100,0 мл (W₁), растворили в 2,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, довели водой до метки, перемешали.

0,6 мл (V) полученного раствора довели водой до метки в мерной колбе вместимостью 100,0 мл (W₂) (испытуемый раствор).

Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная на спектрофотометре при длине волны 360 нм (или фотоэлектроколориметре при фиолетовом светофильтре) относительно воды в кювете с толщиной слоя (l) 1,0 см составила 0,274 (А_х).

Удельный показатель поглощения () раствора фурадонина–стандарта в тех же условиях равен 466,7.

РЕШЕНИЕ: Согласно закону Бугера–Ламберта–Бера оптическая плотность испытуемого раствора (А_х) равна:отсюда концентрация фурадонина в фотометрируемом растворе, приготовленном согласно методике по схеме, равна:.

Учитывая схему разведения, содержание фурадонина (нитрофурантоина) в анализируемом образце (g, %) равно:

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Образец фурадонина (нитрофурантоина) соответствует требованиям ФС по количественному содержанию (99,2%).

В случае фотометрического количественного определения ЛВ в готовых лекарственных формах (ГЛФ) или лекарственных формах индивидуального изготовления содержание ингредиентов (g, г) рассчитывают по формуле:

(3.29)

где Р – в зависимости от лекарственной формы:

♦ жидкие лекарственные формы (растворы для внутреннего употребления, глазные капли и т.д.) – объем лекарственной формы по прописи, мл;

♦ растворы для инъекций –- 1 мл;

♦ растворы для инфузий – 100 мл (%);

♦ порошки, суппозитории – масса одной дозы по прописи, г;

♦ таблетки – средняя масса одной таблетки или масса одной таблетки (таблетки, покрытые оболочкой), г;

♦ мази – прописанное количество мази, г;

♦ гранулы – в пересчете на 100,0 г массы, г.

ПРИМЕР: Оцените качество раствора адреналина гидротартрата 0,18% для инъекций по количественному содержанию действующего вещества (согласно ФС должно быть 0,0016–0,0020 г/мл), если 5,0 мл препарата (а) довели водой до метки в мерной колбе вместимостью 100,0 мл (W₁) (раствор А).

Оптическая плотность раствора, полученного после соответствующей обработки 10,0 мл (V) раствора А, при длине волны 520 нм в кювете с толщиной слоя 1,0 см составила 0,428 (А_х).

Удельный показатель поглощения () стандартного образца адреналина гидротартрата в тех же условиях равен 47,5.

РЕШЕНИЕ: Схема приготовления фотометрируемого раствора:

Содержание адреналина гидротартрата (g, г) в растворе для инъекций составляет:

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Раствор адреналина гидротартрата 0,18% для инъекций соответствует требованиям ФС по количественному содержанию (0,0018 г/мл).

Достоинством способа расчета по удельному показателю поглощения является простота, удобство, малые затраты времени на расчеты.

Недостаток заключается в невоспроизводимости значений удельного показателя поглощения, связанный с колебаниями оптической плотности в пределах одного опыта (десятые доли процента), в разных опытах (несколько процентов) и межприборной ошибкой (около 10% и более).