Вакцины и сыворотки. Использование антител и микробных антигенов в медицинской практике.
Иммунопрофилактика - способ предупреждения инфекционных заболеваний путем создания искусственного специфического иммунитета к возбудителю или его АГ путем формирования невостприимчивости..
Основные формы иммунизации:
активная\специфическая вакцинопрофилактика= введение живых ослабленных или убитых микробных, вирусных АГ (вакцины) с целью создания искусственного активного иммунитета и индуцирования иммунных реакций;
пассивная= введение препаратов со специфич. АТ (иммунные сыворотки, гамма-глобулины) для искусственного пассивного иммунитета.
для предупреждения столбняка, бешенства =используют сочетание пассивной и активной иммунопрофилактики= последовательно вводится вначале иммунная сыворотка (гамма-глобулин), потом вакцина.
Вакцина –иммунологический препарат для активной иммунопрофилактики=создания акт.специфической невосприимчивости к конкретному возбудителю.
Состав: специфический АГ, стабилизаторы(предохраняют АГ от разрушения=гомологичные белки, сахарозо-агар=желатина), консерванты(не допускают размножение случайно попавшей микрофлоры: мертиолят, формалин), адьюванты(для пов.иммуногенности).
Требования:
-эффективность: иммуногенность протективность, эпидемиологическая эффективность;
-ассоциируемость=возможность применения с другими вакцинами
- безопасность;
- низкой реактогенностью;
- стабильно сохранять иммуногенные свойства при хранении.
Типы вакцин:
По количеству составляющих компонентов :
-Живые(аттенуированные)= потерявшие вирулентность, но сохранившие АГ набор штаммы. Высокая иммуногенность, сложно получать и хранить, нестабильны.
Методы селекции штаммма с ослабленной остаточной вирулентностью. Получают химич.=мутагены, физич.=тепло методами и многократным пассированием через невосприимчивые организмы. Корпускулярные, т.к. сод.микробные тела.
Примеры: туберкулез (БЦЖ), полиомиелит (оральная), натуральная оспа, чума, противовирусные.
Дивергентные: микроорганизмы в близком родстве с возбудителями. АГ индуцируют иммунный ответ, перекрёстно и на АГ возбудителя. Вакцина против натуральной оспы (из вируса коровьей) и БЦЖ для туберкулёза (из микобактерий бычьего).
Живые вводят накожно скарификацией, интраназально, перорально.
-Инактивированные=убитые:
Корпускулярные: микроорганизмы инактивируют физическими или химическими методами, очищают и консервируют; Безопасны, стабильны,менее иммуногенны и требуют применения нескольких доз (бустерная иммунизация), зачастую токсичны, реактогенны, ограниченная ассоциация;
Примеры: грипп, бешенство, коклюш, полиомиелит.
-Аутогенные вакцины, также называемые аутологичными вакцинами, аутовакцинами, “самостоятельными” или индивидуальными вакцинами, - это вакцины, которые получают путем изоляции и уничтожения микроорганизмов у инфицированных людей и используются для обеспечения иммунитета одному и тому же человеку.
Инструкция по приготовлению стафилококковой инактивированной аутовакцины
1. С помощью стерильного физраствора смыть с поверхности скошенного МПА микробную культуру, выделенную от больного со стафилококковым пиодермитом.
2. Довести концентрацию смыва микробной культуры до 1 млрд.кл/мл с помощью стандарта мутности.
3. Поместить пробирку со стандартизованной по концентрации микробной культурой в водяную баню и прогревать на протяжении 15 минут при температуре 70-80°С.
4. Посеять инактивированную аутовакцину в МПБ с целью контроля стерильности полученного лечебного препарата.
-Компонентные (субъединичные\субклеточные\химические) - разновидность корпускулярных неживых; из отдельных АГ компонентов, способных обеспечить невосприимчивость. Для выделения физико-химические методы. Сочетают с адъювантами (сорбируют на гидроксиде алюминия).
Пример: против пневмококков (на основе полисахаридов капсул), брюшного тифа (O-, H- и Vi-Аг), сибирской язвы (полисахариды и полипептиды капсул), гриппа (вирусные нейраминидазы и гемагглютинин).
-Анатоксины\молекулярные: АГ= молекулы метаболитов патогенных. Экзотоксин в нетоксичную, но иммуногенную форму нагреванием и формальдегидом до анатоксинов без токсических свойств, но с иммуногенностью.Очищают, концентрируют и адсорбируют на адъюванте(гидроксид алюминия, фосфат алиюминия). Для индукции иммунных реакций и синтеза нетрализующих антитоксинов. Хорошая иммуногенность, безопасность, стабильность, неаллергенность, хорошая ассоциация;
Дозируют в АГ единицах: единицах связывания анатоксина специфич. антитоксином и в единицах флокуляции.
Примеры: дифтерийный, столбнячный, ботулинический, против газовой гангрены.
-Конъюгированные для новорожденных и малого возраста; АГ, плохо распознаваемый незрелой детской иммунной системой, в конъюгированном виде с распознаваемыми белками или анатоксинами;
Примеры: гемофильная и пневмококковая инфекция.
-Синтетические: синтез или выделение нуклеиновых кислот или полипептидных последовательностей, образующих Аг-детерминанты, распознаваемых нейтрализующими АТ. АГ, высокомолекулярный носитель (винилпирролидон или декстран) и адъювант (пов.иммуногенность). наиболее безопасны в плане возможных поствакцинальных осложнений,
-генноинженерные:
-Рекомбинантные\молекулярные: гены, кодирующие основные высокоиммуногенные АГ, встраиваются в геном авирулентные или слабовирулентные, в неродственные с последующим выделением; При культивировании вектора in vitro обр. много высокоиммуногенных АГ, сорбируют на адъюванте;
Примеры: гепатит В, грипп
-векторные: непатогенный вирус-вектор. В его ДНК встраивают гены, кодирующие синтез АГ патогенного. В организме живой векторный вырабатывает АГ возбудителя (векторная вакцина для профилактики бешенства среди диких животных, вакцина «Спутник V» имеет в качестве вектора аденовирус, «CanSino», Китай, «AstraZeneca», Великобритания-Швеция).
По составу входящих АГ:
-моновакцины=АГ одного серовара;
-поливакцины
-комплексные\комбинированные\ассоциированные=несколько разнородных АГ.
Примеры: АКДС(коклюш, дифтерия,столбняк) и корь-краснуха-паротит
Адьюванты для усиления иммуногенности
Минеральные сорбенты(гели гидрата окиси и фосфата алюминия), полимеры, сложные ЛПС, мурамилпептид, бактерии и компоненты бактерий(вытяжки БЦЖ=адьювант Фрейнда, инактивированные коклюшные), ещ. вызывающие воспалительную реакцию(скипидар).
ФФ: укрупняет молекулу АГ, превращают растворимые в корпускулярные=лучше работают АПК, АГ становится тимуснезависимым. В месте иньекции вызывает воспаление с обр. фиброзной капслы=АГ долго сохраняется и депонируется. длительно действует по принципу суммации АГ-раздраженийй(ревакцинирующий эффект)=депонированные вакцины. Акт. пролиферацию и усиливают синтез защитных белков.
Разработаны методы создания вакцин новых поколений: искусственные (полностью синтетические), химические вакцины; вакцины, получаемые методами генной инженерии и кассетные вакцины.
Иммунотерапия - специфические методы лечения инфекционных заболеваний с помощью иммунных сывороток (серотерапия) или вакцин (вакцинотерапия). Сыворотки= специфические АТ путем гипериммунизации животных, у которых можно взять много крови.
По механизму действия и в зав. от свойств АТ лечебные сыворотки: антитоксические и антибактериальные.
Серотерапия - метод лечения инфекционных заболеваний введением иммунных сывороток или иммуноглобулинов со специфич. АТ к возбудителям или токсинам.
Наиболее эффективна при болезнях экзотоксинов (дифтерия, столбняк, ботулизм, газовая анаэробная инфекция).
Реактогенность вакцин и их классификация по массовости и обязательности их применения.
Вакцины обязательного применения.
БЦЖ(живая, ослабленная) здоровым детям на 5 — 7 день после рождения с ревакцинациями в 7, 11—12, 16—17, 22—23, 27—30 лет.
Вакцину против полиомиелита внутрь короткими курсами с ревакцинациями — сначала трехкратно с интервалом полтора месяца с трехмесячного возраста. Затем первая ревакцинация в полтора-два и в два-три года — двукратное введение с интервалом полтора месяца. Вторая ревакцинация в семь-восемь лет (однократное введение), третья ревакцинация в 15—16 лет (однократное введение).
Коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС-вакцина) внутримышечно. Первый курс — три инъекции с интервалом полтора месяца, начиная с трех-, шестимесячного возраста. Ревакцинация однократная в полтора-два года. Из-за ее реактогенности для ревакцинации используют в шесть-семь лет АДС, АДС-М, с 16 лет — столбнячный анатоксин.
Живая противокоревая вакцина подкожно в 12 месяцев, при отсутствии у беременных противокоревых антител — в шесть месяцев.
Живая паротитная вакцинавводится подкожно детям в возрасте 15-18 месяцев.
Вакциной по эпидпоказаниям=против клещевого энцефалита (с четырех лет), четыре инъекции.
Вакцина угрожающего контингента.Антирабическая мозговая очищенная инактивированная сухая.
Антирабическая культуральная очищенная концентрированная инактивированная.
Противопоказания для вакцинации.
1. Острая инфекция, обострение хронической. Нельзя ранее, чем через 30 дней после выздоровления от гриппа, ангины, ОРВИ.
2. Аллергические заболевания.
3. Заболевания ЦНС — энцефалиты, энцефалопатии, судорожный синдром.
4. Хронические заболевания паренхиматозных органов — почек, печени.
5. Тяжелые заболевания сердечно-сосудистой системы.
6. Иммунодефициты.
7. Злокачественные новообразования и СПИД — абсолютное противопоказание.
8. Перспективы в разработке новых вакцин.
Сыворотки. Иммуноглобулины=способ формирования искусственного пассивного имм.
Сывотротки по особенностям мишени для АТ:
-антибактериальные(антистафилококковая, стрептококковая, синегнойная)
-антитоксические(ботулиническая, дифтерийная, столбнячная, гангренозная)
-антивирусные
По источнику получения:
-гомологичные(от человека получены-антистафилококковая). Слабая реактогенность, низкий титр АТ(избегают гипериммунизации)
-гетерологичные(лошадиные, кроличьи, мышиные). Высокий титр АТ, большой обьем получения, высоко реактогенны, часто аллергия.
По специфичности:
-нормальная – из пула донорской, плацентарной, абортной крови, высокие титры АТ, в основном иммунноглобулины Г.
-иммунные из крови практически здоровых специально имммунизированных доноров, люде из эпид.территорий, переболевших, гипериммунизированных животных.
По назначению:
-лечебно-профилактич.=для экстренного создания пассивного иммунитета
-диагностич.=для определения инфекционных и соматич. АГ в серологич.реакциях
Получение: здоровые лошади, их пробы, карантин 3 мес., АГ вводят подкожно в возрастающих дозах с интервалом 5-8 сут, гипериммунизацию прекращают после получения сыворотки с высоким титром АТ, плазму отделяют от форменных, ферментативное переваривание сывороточных белков пепсином, высаливание активных глобулинов сульфатом аммония, очистка,осветление, фильтрация, активность сыворотки проверяют реакцией нейтрализации при введении мышам.
Иммуноглобулины=очищенные и концентрированные препараты из АТ. Большой спектр разнообр. Для экстренной профилактики и лечения
Иммуноглобулины получают из иммунных сывороток путем фракционирования и осаждения. Иммуноглобулины бывают как гетерологичные (иммуноглобулин противосибиреязвенный лошадиный и др.), так и гомологичные, получаемые из крови иммунизированных людей (доноров) – иммуноглобулин противостолбнячный и др.
Одним из вариантов гомологичных иммуноглобулинов является нормальный человеческий иммуноглобулин. В качестве сырья для его приготовления используют утильную кровь (абортную и плацентарную), содержащую антитела к нескольким, широко распространенным возбудителям вследствие вакцинации женщин или после перенесенных ими заболеваний. Нормальный человеческий иммуноглобулин используют для экстренной профилактики кори, полиомиелита, вирусного гепатита А.
