Глава 5. Методы выявления и оценки генотоксикантов

учесть дважды один и тот же участок, рассматривают препарат, передвигая справа налево, затем следующий ряд слева направо. Анализируют 600 клеток с хорошо прокрашенными ядрами, неповрежденными клеточными стенками. Подсчитывают общее количество проанализированных клеток, а так же число делящихся клеток отдельно по стадиям митоза: в профазе, метафазе, анателофазе.

Каждый студент составляет таблицу 5.3.1, в которую заносит все полученные им данные.

Таблица 5.3.1

Определение митотического индекса в меристеме корешка Allium cepa*

Поле зрения		Количество клеток в стадии
	интерфа-	профазы метафазы анафазы телофазы
	зы

1

2

3

4 и т. д.

∑ клеток в каждой фазе

Сумма делящихся клеток (П+М+А+Т)

* Заполняется каждым студентом.

5.3.3. Определение митотоксической активности тканей

Показателем уровня митотической активности тканей является митотический индекс (МI, %). Митотический индекс показывает отношение числа клеток, находящихся в митозе, к общему числу проанализированных клеток, исследованных на препарате изучаемой ткани. Индекс может говорить о нормальном протекании митоза, об угнетении процесса деления клеток или, напротив, усилении митотической активности тканей. На основании этого делается заключение о митотоксическом или митозстимулирующем действии изучаемого фактора. Определяется МI, % по фо р- муле:

79

Генетическая токсикология

МI,% = (П +М +А +Т) ×100,

N

где (П+М+А+Т) – сумма клеток, находящихся на стадии профазы, метафазы, анафазы и телофазы соответственно.

Рассчитайте значения митотического индекса в контрольном и опытном вариантах и занесите данные в таблицу 5.3.2.

Таблица 5.3.2

Сводная таблица учета митотического и фазных индексов в меристеме проростков корешков Allium cepa*

	-	клетокВсего	делящихсяСумма клеткок
	повторности№ (ко решка)			МI, % Xi −		(Xi −		)2
					X		X
Контроль
1
2
3
4
5	и т.д.
Сумма, ∑
Среднее,

X m

ν

Опыт

1

2

3

4

5 и т.д.

Сумма, ∑

Среднее

X m

ν

* Вносятся данные всей группы.

Число клеток в профазе	ПИ, %	Число клеток в метафазе	МИ, %	Число клеток в анателофазе	А-ТИ, %

80