- •Основы хроматографии
- •Предмет и задачи аналитической химии. Хроматографический метод анализа, история его создания и классификация.
- •Методы аналитической химии
- •Хроматографический анализ; «Chromos» - цвет (греч.)
- •Классификация в хроматографии
- •Основные аспекты применения:
- •Механизм разделения веществ в тсх
- •Методика тсх включает в себя:
- •1.Подготовка тонкого слоя сорбента
- •2.Нанесение анализируемой пробы
- •3.Хроматографирование в системе растворителей
- •4.Детектирование (проявление) хроматограмм
- •5.Идентификация веществ на хроматограмме (качественный анализ)
- •6.Количественный анализ
- •Теоретические основы осадительной хроматографии
- •Учебные цели
- •Литература
- •Методические указания студентам по подготовке к занятию:
Основные аспекты применения:
а)качественный анализ веществ и их смесей;
б)количественный анализ веществ и их смесей;
в)выделение индивидуальных компонентов.
Механизм разделения веществ в тсх
различен и обусловлен следующими факторами:
а)природой сорбента; б)природой определяемого вещества; в)природой растворителя. На практике часто имеет место комбинированный механизм разделения, но чаще всего используют адсорбционный и распределительный.
1.Адсорбционный механизм в ТСХ использует сорбенты Al2O3 , силикагель, силуфол. На сродство веществ к адсорбенту влияют специфические взаимодействия компонентов с поверхностью адсорбента: диполь-дипольное; образование водородных связей и др.
2.При распределительном механизме в ТСХ (когда роль сорбента выполняет целлюлоза) вещества разделяются вследствие различия в распределении между двумя жидкими фазами. В качестве неподвижной фазы используют различные растворители (в том числе воду), которые, удерживаясь на сорбенте, удерживают и растворенное вещество. Неподвижная жидкая фаза не вступает в химическое взаимодействие с сорбентом.
В хроматографии распределение веществ между двумя фазами количественно характеризуется коэффициентами распределения:
К = С2/С1 , где К – коэффициент распределения: зависит от природы
определяемых веществ, растворителя, температуры,
способа определения и др. факторов;
С2 – концентрация вещества в неподвижной фазе (твердой
или жидкой);
С1- концентрация вещества в подвижной среде (газ или
жидкость).
Методика тсх включает в себя:
1)подготовку тонкого слоя сорбента;
2)нанесение анализируемых проб;
3)хроматографирование в соответствующей системе растворителей;
4)детектирование разделенных зон (если вещества не окрашены);
5)идентификация веществ на хроматограмме;
6)количественное определение разделенных компонентов.
1.Подготовка тонкого слоя сорбента
Выбор определяется количеством и характером функциональных групп в молекулах определяемых веществ. С увеличением числа функциональных групп возрастает сродство веществ к сорбенту. Адсорбционная активность сорбента зависит как от его химической природы (а именно характера активных центров и плотности их распределения), так и от содержащейся в нем воды, молекулы которой могут заблокировать активные центры и понизить активность сорбента. Чем меньше размеры частиц сорбента и содержание в нем воды, тем активнее его поверхность. В ТСХ чаще всего применяют сорбенты: Al2O3 «для хроматографии», силикагель, силуфол, целлюлозу. Основные требования к тонкому слою: максимальная равномер-ность и однородность. Оптимальная толщина слоя в ТСХ: 200-500мкм. Различают 2 типа слоев:
а)Пластинки с закрепленным слоем: готовятся в лаборатории, когда пластинки заливают пастой, состоящей из суспензии сорбента в воде или органическом растворителе и связующего материала (гипс, крахмал). Их можно готовить впрок. Или пластинку готовят в заводских условиях, нанося лой сорбента на алюминиевую фольгу или пластик. Они долго хранятся, просты в использовании, дают хорошо воспроизводимые результаты.
б)Пластинки с незакрепленным слоем.