4.Сорбенты для вэжх.

В жидкостной хроматографии к материалу сорбента предъявляется ряд достаточно жестких требований.1. колоночный материал должен обладать достаточной прочностью и жесткостью, мало зависящей от наличия и состава элюента в колонке.

2. сорбент должен обладать достаточно развитой однородной поверхностью и узким фракционным составом частиц.3. сорбент не должен вступать в необратимые химические взаимодействия как с компонентами элюента, так и с разделяемой пробой.Этим требованиям отвечает довольно много неорганических и органических материалов, однако, в плане долговременной стабильности свойств сорбента, воспроизводимости его свойств и величины удельной поверхности, подходящими материалами оказались лишь силикагель и, в гораздо меньшей степени - окись алюминия, которые и получили, в свое время, наибольшее распространение при реализации исторически первого варианта жидкостной хроматографии – нормально-фазовой. До сих пор большая часть сорбентов, порядка 75%, выпускаются на основе силикагеля [8], 20% приходятся на полимеры (целлюлозы и др.). Чаще всего используются сополимеры стирола с дивинилбензолом. Пористые полимеры в отличие от силикагелей, стабильны во всем диапазоне рН (0-14). Предпочтение этим материалом отдается в ионо-обменной и ионной хроматографии.

5.Аппаратура для вэжх.

Современные жид.хр-фы выпускают в 3-х исполнениях:1.блочно-модульный;2.моноблочный;3.промежуточный.

Принципиальная схема состоит из:сосуд неподвиж.фазы,насос,манометр,фильтр,демпфер,термостат,инжектор,колонка,детектор,самописец.Насосы для ВЭЖХ должны удовлетворять следующим основным требованиям: 1. Химическая инертность материалов по отношению к подвижной фазе. Металлическиедетали насоса, контактирующие с подвижной фазой, обычно изготавливают изнержавеющей стали, а уплотнения.из высокоинертных нерастворимых материалов. 2. Достаточно высокое рабочее давление. 3. Высокая стабильность скорости потока. Точность поддержания скорости потока вколонке во многом определяет результаты как качественного, так и количественного анализа. Инжекторы для ввода пробы должны обеспечивать ввод проб от 0,1 мкл до

нескольких миллилитров (соответственно в микро- и препаративных колонках) с высокой

воопроизводимосгью при давлениях до 30.50 МПа. Размывание пробы в инжекторе

должно быть минимальным. Простейшим является инжектор с остановкой потока («стоп флоу»). Он включает кран для перекрывания потока перед инжектором и тройник, к которому подсоединены колонка, подводящий растворитель капилляр и заглушка. Недостатки: много ручных операций при работе, нестационарность потока растворителя дает ложный пик и затрудняет точные количественные измерения удерживания, эффективности и других параметров. Инжектор с резиновой мембраной. Наибольшее распространение имеют петлевые инжекторы (петлевые краны).Пробу вводят в петлю заданной вместимости при давлении, близком к атмосферному, с помощью микрошприца или шприца. Затем поворотом крана петля сообщается с линией подачи растворителя от насоса и входом колонки, проба вымывается из петли и попадаетв колонку. Детекторы для ВЭЖХ должны фиксировать изменение ка-сих-либо свойств

растворителя, выходящего из колонки, связанное с наличием в нем анализируемых

веществ. Детекторы подразделяются на селективные и универсальные. Селективные детек-

торы способны зафиксировать элюирование интересующих исследователя веществ,

обладающих специфическими свойствами, на фоне многих других компонентов, такими

свойствами не обладающих. Фотометры, работающие в УФ-диапазоне, пожалуй, являются наиболее широко

распространенными и популярными детекторами в ВЭЖХ. Это связано с их относительно

низкой стоимостью, надежностью работы лампы (до 6000 ч и более), нечувствитель-

ностью к изменению температуры и состава растворителя. Дифференциальный рефрактометр непрерывно регистрирует изменение

показателя преломления элюата на выходе из колонки. Главным достоинством этого

детектора является универсальность, так как при выборе подходящего растворителя он

может детектировать любые вещества. Поэтому он занимает второе место (после УФ-

детектора) по частоте использования. К другим достоинствам рефрактометра относятся

возможность работы с любыми растворителями в широком интервале скорости потока,

невысокие требования к чистоте подвижной фазы, надежность и удобство в

эксплуатации. Некоторые модели детекторов могут работать при температуре до 150 °С,

что является исключительно важным для эксклюзионной хроматографии ряда

синтетических полимеров. Рефрактометр оптического отклонения . наиболее распространенный тип

данного прибора. Рефрактометр Френеля. Кроме детекторов, описанных выше, для ВЭЖХ используют и другие приборы:

электрохимический, инфракрасный, детектор с диодной матрицей, масс-спектро-

метрический, транспортный с пламенно-ионизационным детектированием, радио-

активный, по диэлектрической проницаемости, электронозахватный, кулонометрический и

др.