2.Осмотр:

Цвет кожных покровов и слизистых оболочек:

Постоянная бледность постоянный признак анемии.

Генерализованное изменение цвета кожи с появлением вишнёво – красного оттенка характерно для эритремии.

Желтушную окраску кожи и слизистых оболочек нередко наблюдают при гемолизе.

При гемморагическом синдроме на коже появляется сыпь в виде петехий и пурпуры.

Следы расчёсов, связанных с зудом, характерны для лимфогранулемотоза.

Специфические узелки: возникают при остром миелобластном лейкозе.

Изменение формы ногтей, их утолщение – признак недостатка железа в организме.

Б.Изменение языка и слизистой оболочки ротовой полости:

Изменения слизистой оболочки языка возникают при железодефицитной и пернициозной анемиях: атрофический глоссит, характеризующийся уменьшением или полным исчезновением всех видов сосочков слизистой оболочки языка – наблюдается при железодефицитной анемии.

«Малиновый язык» характерен для дефицита В12 и фолиевой кислоты.

Появление язв на слизистой рта характерно для агранулоцитоза.

Трещины в углах рта характерны для пернициозной анемии.

В.Увеличение лимфатических узлов

Характерно для лейкозов (хронический лимфолейкоз, лимфогранулематоз).

Г.Увеличение печени и селезёнки

Лейкозы и гемолитический синдром.

3.Пальпация:

Пальпация костной системы: болезненна при надавливании на плоские кости или эпифизы трубчатых костей.

Пальпация лимфатических узлов: увеличение лимфатических узлов наблюдается при лимфолейкозе, лимфогранулематозе, лимфосаркоме. Увеличенные лимфатические узлы при лейкозах и злокачественных лимфомах безболезненны, никогда не спаяны с кожей, не нагнаиваются и не образуют свищей в отличие от другой этиологии.

Пальпация селезёнки: проводят в положении больного лёжа на правом боку. Больного укладывают на правый бок, голова несколько наклонена вперед к грудной клетке, левая рука согнута в локтевом суставе, правая нога вытянута,левая согнута в тазобедренном и коленном суставе. В этом положении достигается максимальное расслабление брюшного пресса и селезёнка смещается кпереди. Врач сидит справа от больного лицом к нему. Левую руку располагает на левой половине грудной клетки больного между 8 и 10 ребрами по подмышечной линии и несколько сдавливает её. Ограничивая её движение при дыхании. Правую руку врач располагает на переднебоковой поверхности брюшной стенки, у края реберной дуги. Затем на выдохе больного правой рукой врач слегка вдавливает брюшную стенку, образуя карман. Далее врач больному предлагает сделать глубокий вдох. В момент вдоха, если селезёнка доступна пальпации и она проводится правильно, селезёнка, смещаясь вниз опускающейся диафрагмой , своим передненижним краем приближается к пальцам правой руки врача, упирается в них и при дальнейшем своём движении проскальзывает под ними. Обращают внимание на размеры, болезненность, плотность, подвижность. В норме селезенка не прощупывается, она становится доступной пальпации при значительном опущении. Увеличение наблюдается при инфекционных заболеваниях (тиф, сепсис, болезнь Боткина), циррозах печени, тромбозе селезёночной вены, гемолитической анемии, лейкозы). Плотность селезёнки невелика. Мягка при сепсисе. При лейкозе и инфекциях становится плотной. При большинстве заболеваний пальпация безболезенна. Подвижность чаще значительная.

4.Перкуссия:

Цель: определение размера селезенки.

Вследствие того, что селезёнка окружена полыми органами (желудок, кишечник), содержащими воздух и дающими при перкуссии громкий тимпанический звук, точно определить размеры и границы нельзя. Перкуссию проводят в положении больного стоя или лёжа на правом боку. Перкутировать нужно очень тихо – от ясного звука к тупому.

В норме селезёночная тупость определяется между 9 и 11 ребрами.

5.Лабораторные методы исследования (см. вопросы № 97- 107)

6.Инструментальные методы исследования:

Рентгенологическое: исследуют лимфатические узлы, изменения костей.

УЗИ селезёнки, печени. Спленопортография: исследуют сосуды селезёнки.

Радиоизотопные методы исследования: исследуют селезёнку с использованием меченных радиоактивным железом эритроцитов. Устанавливают очаги эритропоэза. Например, при эритремии.

97. Методики определения Hb, подсчета эритроцитов, времени свертывания, времени кровотечения.

1. Определение Hb цианметгемоглобиновым методом: основан на окислении гемоглобина при действии красной кровяной соли в метгемоглобин, который с CN- ионами образует стабильный , окрашенный в красный цвет комплекс – цианметгемоглобин (CNMetHb). Концентрация его может быть измерена на спектрофотометре, гемоглобинометре.

Содержание гемоглобина в периферической крови в норме у мужчин составляет 132-164 г/л, у женщин – 115-145г/л. Снижение концентрации гемоглобина – основной лабораторный признак анемии любой этиологии. Повышается у людей, живущих в высокогорье.

2. Подсчёт эритроцитов: для подсчета эритроцитов в камере кровь разводят в 200 раз в 3,5% растворе хлорида натрия, для чего 0,02 мл крови вносят в предварительно отмеренные 4 мл разводящего раствора. Взвесь тщательно перемешивают и затем заполняют счетную камеру (стеклянную пластинку с нанесенными на нее одной или двумя счетными сетками). Каплю разведенной крови вносят пипеткой под притертое покровное стекло камеры. Жидкость по капиллярам засасывается и заполняет пространство над сеткой. Подсчет производят спустя 1 мин (когда эритроциты осядут на дно камеры), пользуясь объективом 40 и окуляром 7.

Существует много различных подсчетных сеток, но все они построены по одному принципу. Сетки состоят из больших и малых квадратов, площадь их равна 1/25 и 1/400 мм2 соответственно. Наиболее часто применяется сетка Горяева. Она состоит из 225 больших квадратов, 25 из которых разделены на малые, по 16 квадратов в каждом. Под­счет эритроцитов производят в 5 больших квадратах, разделенных на малые, придерживаясь определенной последовательности счета: передвигаются из квадрата в квадрат по горизонтали, один ряд слева направо, следующий — справа налево. Число эритроцитов в 5 больших квадратах пересчитывают на содержание их в 1 л. Нормальное число эритроцитов у женщин 3,4— 5,0* 1012, у мужчин — 4,0—5,6- 1012 в 1 л крови.

Число эритроцитов можно определять и с помощью приборов, упрощающих и автоматизирующих это исследование. К таковым относятся эритрогемометры и электрофотоколориметр (позволяют судить о числе эритроцитов путем измерения с помощью фотоэлемента количества света, поглощенного и рассеянного при его прохождении через взвесь эритроцитов) и приборы автоматического счета типа целоскопа (производят непосредственный отсчет эритроцитов). Принцип заключается в изменении клетками крови сопротивления электрической цепи при прохождении их через узкий капилляр. Это изменение регистрируется с помощью электромагнитного счетчика. Каждая клетка отражается на осциллоскопическом экране и регистрируется на шкале прибора.

3. Определение времени свёртывания: характеризует свертываемость крови в целом и не отражает отдельных фаз свертывания. Оно удлиняется при повышении антикоагулянтной активности крови или снижении концентрации прокоагулянтов, укорачивается при наклонности к тромбообразованию. Наибольшее замедление свертывания (до нескольких часов) наблюдается при гемофилии А.

Для определения свертывания взятую из вены кровь помещают в пробирке на водяную баню при температуре 37° С и каждые 30 с, наклоняя пробирку, смотрят, как смещается уровень жидкости. Прекращение смещения, т.е. свертывание крови, происходит в норме через 5—10 мин (способ Ли и Уайта). Широко применяются капельные способы определения свертываемости крови. Кровь либо набирают в капиллярную пипетку и определяют время, через которое кровь перестанет передвигаться в ней, либо помещают каплю крови во влажную подогреваемую камеру на парафинированное часовое стекло и определяют срок, когда капля при наклоне стекла перестает стекать к его краю.

4.Определение времени кровотечения: определяют по уколочной пробе по Дюке. Кончик пальца или мочку уха прокалывают скарификатором на глубину 3 мм. Самопроизольно выступающую кровь снимают каждые 30 с прикосновением бумаги. Нормальная продолжительность кровотечения 2-4 мин. Поскольку прекращение кровотечения связано с образованием белого (тромбоцитного) тромба, результаты пробы зависят от числа тромбоцитов и способности сосудистой стенки к сокращению, чему благоприятствует выделение тромбоцитами вазоконстриктора серотонина. При тромбоцитопении продолжительность кровотечения значительно удлиняется, число снятых капель возрастает во много раз. При нарушении тонуса капилляров размер капель становится больше.

98. Подсчет лейкоцитов и лейкоцитарной формулы.

Для подсчета лейкоцитов кровь разводят в смесителях, либо в пробирках. Для этой цели применяют 3—5% раствор уксусной кислоты (для разрушения эритроцитов), подкрашенный какой-либо анилиновой краской (для окраски ядер лейкоцитов). Счетную сетку заполняют так же, как для подсчета эритроцитов. Лейкоциты подсчитывают в 100 больших квадратах. В сетке Горяева удобно считать их в неразграфленных квадратах (их на сетке 100). Учитывая разведение крови и объем жидкости над квадратами, высчитывают постоянный множитель. При разведении в 20 раз он равен 50.

При работе с пробирками в них наливают предварительно 0,38 мл жидкости и выпускают в нее 0,02 мл крови. Для подсчета в пробирках автоматического счета эритроциты гемолизируют сапонином. Нормальное содержание лейкоцитов 4,3 • 109-11,3 • 109/л, или 4300-11 300 в 1 мкл крови.

Лейкоцитарную формулу подсчитывают в окрашенных мазках.

Хороший мазок отвечает следующим требованиям: он тонок, и форменные элементы лежат в нем в один слой; в этом случае мазок оказывается желтым и полупрозрачным. Хороший мазок равномерен, а клетки не повреждены при размазывании. Для того чтобы кровь легла ровным слоем на стекло, его обезжиривают прожиганием над пламенем газовой горелки или выдерживают в смеси спирта и эфира. Концом стекла прикасаются к свежевыпущенной маленькой капле крови и без промедления размазывают ее по стеклу. Перед окраской мазок фиксируют погружением в метанол на 3 мин, в этиловый спирт или его смесь с эфиром на 30 мин. Имеется и ряд других фиксаторов. Высохший после фиксации мазок заливают красителем.

Для различения клеток крови (определения лейкоцитарной формулы) прибегают к дифференциальной окраске. Наиболее широко применяется окраска по Романовскому -Гимзе. Этот краситель представляет собой смесь слабокислой (эозин) и слабощелочной (азур II) красок. Клетки и их части в зависимости от реакции среды в них воспринимают тот или иной компонент красителя: кислые (базофильные) субстанции окрашиваются азуром в голубой цвет, щелочные (оксифильные) окрашиваются эозином в красный цвет; нейтральные воспринимают обе краски и становятся фиолетовыми.

Лейкоцитарной формулой называют процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов крови.

NB! Для достаточно точного ее вычисления необходимо просмотреть не менее 200 лейкоцитов.

Подсчет производят с иммерсионной системой. Ввиду того что клетки располагаются в мазке неравномерно (более крупные отходят к краям), важно придерживаться такого порядка передвижения по мазку, при котором в равной мере просматривались бы его края и середина. Применяется один из двух способов передвижения: по одному из них мазок передвигают от верхнего края до нижнего, отодвигают на 2 —3 поля зрения вдоль края, затем идут в обратном направлении до верхнего края и т. д. При втором способе от края продвигаются на 5—6 полей к середине мазка, затем столько же вбок, потом обратно к краю, отодвигаются на несколько полей вбок и опять повторяют передвижение, пока не будет сосчитано 50 клеток. Просматривают 4 таких участка по 4 углам мазка. Сосчитав 200 клеток, число делят пополам и определяют количество каждого вида лейкоцитов.

Лейкоциты являются элементами крови, быстро реагирующими на различные внешние воздействия и изменения внутри организма. Определение общего количества лейкоцитов может иметь большое диагностическое значение, так как выявляет состояние кроветворных органов или их реакцию на вредные воздействия. Увеличение числа лейкоцитов — лейкоцитоз — является результатом активизации лейкопоэза, уменьшение их числа — лейкопения — может зависеть от угнетения кроветворных органов, их истощения, повышенного распада лейкоцитов под действием антилейкоцитарных антител 1. Нейтрофилы. Наиболее изменчивой группой лейкоцитов являются нейтрофилы, число которых возрастает при многих инфекциях, интоксикациях и распаде тканей.

Характерным для активного нейтропоэза является не только увеличение общего числа нейтрофилов в крови, но и появление в ней незрелых форм: увеличивается число палочкоядерных, появляются юные нейтрофилы, иногда даже миелоциты. Такое «омоложение» состава нейтрофилов носит название сдвига лейкоцитарной формулы влево. Защитная роль нейтрофилов определяется их фагоцитарной функцией, бактерицидным действием и выделением протеолитических ферментов, способствующих рассасыванию некротизированных тканей и заживлению ран.

Наиболее часто регенераторный сдвиг появляется при наличии какого-либо воспалительного процесса или очага некроза. Очень резкий сдвиг влево до промиелоцитов и даже миелобластов при значительном лейкоцитозе носит название лейкемоидной реакции. Уменьшение числа нейтрофилов — абсолютная нейтропения — возникает при угнетающем костный мозг воздействии токсинов некоторых микроорганизмов (возбудители брюшного тифа, бруцеллеза и др.) и вирусов, ионизирующей радиации, ряда лекарственных препаратов.

2. Лимфоциты. Лимфоцитоз наблюдается в период выздоровления от острых инфекционных заболеваний, при инфекционном мононуклеозе, инфекционном лимфоцитозе, лимфолейкозе, краснухе, бруцеллезе, тиреотоксикозе.

Абсолютная лимфопения встречается при лучевой болезни, системных поражениях лимфатического аппарата: лимфогранулематозе, лимфосаркоме.

3. Эозинофилы. Находятся в крови в относительно небольшом количестве (содержатся преимущественно в тканях), но число их возрастает, иногда значительно, при аллергических процессах (сывороточная болезнь, бронхиальная астма), глистных инвазиях, зудящих дерматозах.

Уменьшение количества эозинофилов - эозинопения - вплоть до полного их исчезновения наблюдается при сепсисе, тяжелых формах туберкулеза, тифах, тяжелых интоксикациях.

4.Базофилы. Являются носителями важных медиаторов тканевого обмена (кровяные «эквиваленты» тучных тканевых клеток). При сенсибилизации организма число их увеличивается, при повторном введении аллергена резко уменьшается в результате их распада.

5.Моноциты. Увеличение числа моноцитов - моноцитоз - служит показателем развития иммунных процессов. Моноциты признаются аналогами тканевых макрофагов. Моноцит встречается при ряде хронических заболеваний (хрониосепсис, туберкулез, сифилис). Моноцитопения наблюдается иногда при тяжелых септических, гипертоксических формах брюшного тифа.

Агранулоциты. Отличительной особенностью агранулоцитов являются несегментированное ядро и базофильная (голубая) цитоплазма.

Лимфоцит - наименьший по размеру лейкоцит. Ядро круглое, овальное или бобовидное; занимает большую часть клетки, интенсивно окрашено. Цитоплазма большинства лимфоцитов узким ободком окружает ядро, окрашена в светло-синий цвет и просветляется к ядру.

Моноцит - самая крупная из кровяных клеток. Крупное ядро неправильной формы и относительно светлой окраски. Цитоплазма серовато-голубого, дымчатого цвета, не просветляется к ядру

Кроме перечисленных клеток, в нормальной крови редко, а при заболеваниях часто могут встретиться плазматические клетки. Они отличаются эксцентрически расположенным плотным ядром, часто колесовидной структуры. Число этих клеток увеличивается при некоторых инфекционных заболеваниях, раневом сепсисе, миеломной болезни.

При подсчете лейкоцитарной формулы обращают внимание не только на количественные сдвиги в ней, но и на качественные изменения форменных элементов. Ранее отмечались дегенеративные изменения лейкоцитов. При тяжелых интоксикациях зернистость нейтрофилов становится обильной, крупной, интенсивно окрашенной и носит название токсической (или токсогенной). Иногда в мазках крови обнаруживаются расплывчатые пятна, окрашенные подобно ядерному веществу лейкоцитов. Это так называемые тени Боткина—Гумпрехта — остатки ядерного хроматина, свидетельствующие о повышенной хрупкости лейкоцитов, приводящей к их распаду — лейкоцитолизу

99. Методика определения группы крови, понятие о резус-факторе.

1. Определение группы крови по стандартным сывороткам:

Необходимо следующее оснащение:

два комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток I (0), II (А), III (В) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки IV (АВ)

флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой

чисто вымытая сухая тарелка

предметные стекла

стерильные копьевидные иглы для прокола мякоти пальца

стерильные марлевые шарики,

спирт

Стандартные сыворотки для опреде­ления группы крови по системе АВО выпускают с определенной цветовой маркиров­кой: I (0) - бесцветная, II (А) - голубая, III (В) - красная, IV (АВ) – желтая. Сыворотки хранят при температуре 4-10 °С. Сыворотка должна быть светлой и прозрачной. Наличие хлопьев, осадка, помутнение являются признаками не­пригодности сыворотки. Первые признаки агглютинации должны появляться не позднее чем через 30 с.

Тарелку делят цветным карандашом на 4 квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты I (0), II (А), III (В). В соответствующий квадрат тарел­ки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий I (0), II (А), Ш (В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой. Пер­вую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие капли разными угол­ками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают. Капля вносимой крови должна быть в 5—10 раз меньше капли сыво­ротки. Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сыворот­кой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин, после чего добавляют кап­лю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают путем покачивания тарелки и через 5 мин проводят окончательную оценку реакции агглютинации.

При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зернышки из скле­ившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хло­рида натрия и перемешивании.

При отрицательной реакции капли сыворотки на та­релке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зерен.

Возмож­ны следующие 4 комбинации реакций агглютинации со стандартными сыворотками I (0), II (А), III (В) групп.

Все 3 сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Исследуемая кровь –

I группы.

Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой П (А) группы обеих серий и положительная с сыворотками I (0) и III (В) групп. Исследуемая кровь -

II (А) группы.

Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой III (В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой I (0) и II (А) групп. Исследуемая кровь –

III (В) группы.

Сыворотки I (0), II (А), III (В) групп дают положительную реакцию в обеих се­риях. Кровь принадлежит к IV (АВ) группе. Но прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой IV (АВ) группы по той же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации по­зволяет окончательно отнести исследуемую кровь к IV (АВ) группе.

2. Понятие о резус-факторе.

В эритроцитах был обнаружен еще один антиген (агглютиноген), который назвали резус-фактором (Rh). Всех людей делят на лиц с резус-положительной (Rh+) и резус-отрицательной (Rh) кровью. Установлено, что у 85% людей в эритроцитах содержится резус-фактор, т. е. кровь у них является резус-положительной, а у 15% он не содержится, т. е. кровь у этих людей резус-отрицательная. К резус-фактору (резус-антигену) в норме в крови не имеется антирезус-агглютининов (готовых антител). Такие антитела появляются в сыворотке крови лишь в результате иммунизации человека с резус-отрицательной кровью резус-положительными эритроцитами. Подобная иммунизация наступает вследствие повторных переливаний резус-положительной крови резус-отрицательному реципиенту или при беременности женщины с резус-отрицательной кровью резус-положительным плодом. Иммунизированные таким образом люди становятся сенсибилизированными: при переливании им резус-положительной крови развивается тяжелое осложнение — гемотрансфузионный шок.

100.Диагностическое значение клинического исследования общего анализа крови

При общем анализе крови определяют:

Содержание гемоглобина

Количество эритроцитов

Количество лейкоцитов

Количество тромбоцитов

Оценивают СОЭ (скорость оседания эритроцитов)

Подсчитывают лейкоцитарную формулу

Определение гематокрита

Такой анализ используется как один из способов обследования при различных заболеваний, а для диагностики кровеносной системы общий анализ крови считается незаменимым и ему отводиться лидирующая роль. Например, мы можем сделать вывод о наличии или отсутствии инфекции, о склонности пациента к тромбозам или кровотечениям и т.д.

101. Понятие о стернальной пункции, лимфоузла и трепанобиопсии, трактовка результатов исследования пунктата костного мозга.

Стернальная пункция - один из методов прижизненного исследования костного мозга; представляет собой костномозговую пункцию, производимую через переднюю стенку грудины. Предложена М.И. Аринкиным.

Исследование костного мозга необходимо для диагностики анемий, лейкозов, миелодиспластических синдромов, метастазов опухолей и др.

Стернальная пункция может выполняться в амбулаторных условиях.

Место пункции обрабатывают этиловым спиртом и спиртовым раствором йода. Для анестезии используют обычно 2% раствор новокаина; можно делать пункцию без обезболивания. Грудину прокалывают иглой Кассирского на уровне прикрепления III—IV ребра по срединной линии или пунктируют рукоятку грудины. Иглу вводят быстрым вращательным движением. При прохождении ее через слой коркового (компактного) вещества передней поверхности грудины и попадании в губчатое (костномозговое пространство) отмечается ощущение провала. Косвенным признаком удачного прокола является кратковременная боль. После извлечения мандрена к игле присоединяют шприц (емкостью 10 или 20 мл), с помощью которого осуществляют аспирацию костного мозга. Постепенно, создавая вакуум в шприце, насасывают не более 0,2—0,3 мл костномозговой взвеси. Затем иглу извлекают из грудины. На место прокола накладывают стерильную наклейку. Содержимое иглы и шприца выдавливают на предметное стекло и готовят мазки.

Более точные сведения о составе костного мозга дает трепанобиопсия. Специальную

иглу-троакар вводят в гребешок подвздошной кости и вырезают столбик ее с

костномозговой тканью, из которого делают гистологические препараты. В них

сохраняется структура костного мозга, а отсутствие примеси крови позволяет оценить его

клеточный состав и выявить очаговые и диффузные изменения в нем.

Нередко прибегают к пункции увеличенных лимфатических узлов, дающей

возможность определить характер изменений их клеточного состава и уточнить диагноз

ряда системных заболеваний лимфатического аппарата: лимфолейкоза,

лимфогранулематоза, лимфосаркоматоза, обнаружить метастазы опухолей и др. Более

точные данные можно получить с помощью биопсии лимфатического узла. Пункцию

производят без анестезии простой инъекционной иглой, надетой на 10-граммовый шприц.

Из полученного пунктата делают мазки.

Трепанат (спонгиозная костная ткань) у здоровых людей и у больных с гиперпластическими процессами богат костным мозгом. При тяжелых апластических процессах трепанат имеет желтый цвет, что обусловливается почти полным исчезновением костно-мозговых элементов и заменой их жировой тканью.

При всех формах остеомиелосклероза и миелофиброза извлеченный кусочек костной ткани выглядит нередко “сухим”, и из него удается извлечь лишь очень небольшое количество костного мозга для приготовления мазков.