ХНС

Вперше імунні реакції в аналітичній хімії було використано для визначення інсуліну в плазмі крові за допомогою антитіл проти інсуліну.

Основними принципами детектування в імунних методах аналізу є вимірювання люмінесценції, активності ферменту або радіоактивності. Існує два різновиди імунного аналізу – радіоімунний аналіз і гетерогенний імуноферментний аналіз.

Радіоімунні методи базуються на конкуруючому комплексоутворенні визначуваної речовини – природного антигену Ag – та синтетичного поміченого (радіоактивного) антигену Ag* – з антитілом Ak:

Ag + Ak Ù AgAk

Ag* + Ak Ù Ag*Ak

Концентрацію комплексу антитіла з поміченим антигеном визначають шляхом вимірювання радіоактивності. Для цього комплекс попередньо відділяють від надлишку поміченого антигену, що не

прореагував. Для синтезу помічених антигенів зазвичай використовують 32Р, 35S, 3H, 14C, 57Co та 125I. Використання цих ізотопів зручно, тому що

відповідні елементи входять до складу більшості біологічних речовин, що визначаються радіоімунним методом. До того ж, це достатньо м’які випромінювачі, що зручно для роботи. Чутливість радіоімунного аналізу – декілька пікограмів в мл.

В методі імуноферментного аналізу використовують антиген, помічений не радіоактивним ізотопом, а ферментом. Молекули антитіла іммобілізують, часто шляхом простої адсорбції на активній поверхні. В результаті протікання конкуруючих реакцій з участю визначуваного і поміченого антигенів частина останнього виявляється зв’язаною у комплекс з антитілом і також сорбується на поверхні. Реакційний сосуд відмивають від надлишку незв’язаного поміченого антитіла і додають необхідний субстрат для визначення ферменту, що адсорбований на поверхні разом з поміченим антитілом. Як і в інших ферментативних реакціях для визначення ферменту зазвичай використовують кінетичний метод з фотометричним детектуванням.

Межа виявлення різноманітних речовин методом гетерофазного імуноферментного методу знаходиться у діапазоні від нанограмів до мікрограмів в літрі.

321

Антитіла, які застосовують в імунохімічних методах аналізу, можна розглядати як специфічні реагенти на найрізноманітніші речовини, що створені самою природою. Здатність живих організмів до синтезу «аналітичних реагентів» відкриває можливості розробки імунних методів визначення навіть таких речовин, природу яких важко однозначно охарактеризувати з чисто хімічної точки зору, наприклад, гумусових речовин.

ПИТАННЯ ДЛЯ КОНТРОЛЮ САМОСТІЙНОЇ РОБОТИ

1.Назвіть основні об’єкти дослідження в клінічній аналітичній лабораторії та способи відбору їх проб.

2.Як визначають вміст газів в крові? Опишіть принципи дії електроду (сенсора) Кларка та газочутливих електродів. Замалюйте схему цих електродів.

3.В чому полягає суть тест-методів? Назвіть основні типи тест-

методів.

4.Опишіть окремі приклади визначень за допомогою тест-методів

вклінічних лабораторіях (визначення глюкози в крові, холестерину, білків, хлоридів, міді у сечі та її рН).

5.Імунологічний тест вагітності.

6.Що таке сенсори? Типи сенсорів.

7.Приклади біосенсорів. Схема ферментного електроду. Сенсорні аналізатори.

8.На чому ґрунтується імунний аналіз?

322

ПРЕДМЕТНИЙ ПОКАЖЧИК

Абсорбційність – 246

Адсорбція – 38 фізична – 38 капілярна – 38

Активність – 71 Амперометрія – 220 Аналіз – 9

активаційний – 300 атомно-абсорбційний – 245 атомно-флуоресцентний – 259 дробний – 9 електрогравіметричний – 231 імунний – 316 кількісний – 10, 144 кондуктометричний – 232 люмінесцентний – 276 нестандартні методи – 132

за спектрами комбінаційного розсіювання – 289 рентгеноспектральний – 281 систематичний – 9 стандартні методи – 132 якісний – 9

якісний атомно-абсорбційний – 245 якісний спектральний – 238

Аналіт – 9 Аналітична

група – 23 концентрація – 74 хімія – 9

Аналітичний сигнал – 11 Аніоніти – 58 Аніонообмінники – 58 Антиген – 320 Антитіло – 320 Аргентометрія – 198

метод Мора – 200 метод Фольгарда – 201 метод Фаянса – 201

Асоціати іонні – 40

Атомізатори – 249, 251, 253

Атомізація – 255 Ауксохроми – 178

Баланс матеріальний – 74

Біосенсори – 217, 228 Біохімічне споживання кисню

(БСК) – 184

Буферні розчини – 78 Буферна ємність – 80

Валіноміцин – 119

Відгонка – 45 Відносне пересичення – 156 Відтворюваність – 146 Відхилення

стандартне – 149 відносне стандартне – 149

Вибірка випадкова –147 Вибіркова сукупність – 147 Види люмінесценції – 276 Вимірювання

похибка – 144 правильність – 146 збіжність – 146 відтворюваність – 146 точність – 147

Випромінювання резонансне – 245 радіоактивне – 19

Висота, еквівалентна теоретичній тарілці

(ВЕТТ) – 52

Вихід

енергетичний – 277 квантовий – 278

Внутрішньокомплексні сполуки – 107 Внутрішній електроліз – 232 Вода

стехіометрична – 137 нестехіометрична – 138

Вольтамперометрія – 220

Гальванічний елемент – 124

Гасіння люмінесценції – 279 Гемоглобін – 98 Гетерогенні процеси – 86 Генеральна сукупність – 147 Гідроліз – 81 Гіпотеза аналогій – 107 Гравіметрія – 152

Гравіметрична форма – 153 Градуювальна функція – 16

323

Градуювальний графік – 16 Група

аналітична – 23 функціонально-аналітична – 110 хромофорна – 177 ауксохромна – 178 солетвірна – 110 комплексоутворююча – 111

Групові реагенти – 23

Декантація – 159

Демаскування – 15, 105 Джерела випромінювання – 239, 268, 274

Джерела резонансного випромінювання лампа з порожнистим катодом –246 високочастотна безелектродна лампа – 248

Дентатність – 97 Деполяризатор – 224 Детектори

візуальні – 241 фотографічні – 241

фотоелектричні – 241, 259, 270 Диметилгліоксим – 12, 104, 113 Дисперсія – 148 Дистиляція – 45 Дитизон – 117 Діаліз – 44

Дія однойменного іона – 89 Добуток концентрацій – 89 Добуток розчинності

термодинамічний – 86 реальний – 87 умовний – 88

Довірчий інтервал – 150 Довірча імовірність – 150

Еквівалент – 165

Екстрагент – 40 Екстракт – 40 Екстракція – 40

Електрогравіметрія – 161, 231 Електрод

індикаторний – 124, 207 порівняння – 124, 208 каломельний – 208

металевий – 207 ртутний краплинний – 222 скляний – 212 хлорсрібний – 208

Електроди іоноселективні (ІСЕ) – 212 газочутливі – 306

зтвердою мембраною – 212

зрідкими мембранами – 214

збіологічними мембранами – 217 ферментні – 217

Електрод (сенсор) Кларка – 228, 305 Електродіаліз – 44 Електроліз внутрішній – 232

Електролітична комірка – 124, 205 Електронний парамагнітний резонанс –

295

Електропровідність питома – 232 Електрична провідність – 232 Електрофорез – 43 Електрофорез капілярний – 44 Елюат – 47 Елюент – 47 Ефект

сольовий – 87 хелатний – 115

оже – 284

Зеємана – 292

Ємність іонообмінника – 58

Закон

розподілу – 41 діяння мас – 74

нормального розподілу – 149 еквівалентів – 163

Фарадея – 161, 230

Бугера – Ламберта – Бера – 246, 265

світлопоглинання – 245, 265 адитивності – 266 Вавілова – 278 Стокса-Ломеля – 278 Мозлі – 281 Вульфа-Брега – 282

радіоактивного розпаду – 297 Зміщення хімічне – 293 Зонна плавка – 45

324

Ізоморфізм – 38

Індекс Rf – 66 Індикаторна помилка – 179 Індикатори титрування

кислотно-основного – 174 природні – 175 синтетичні – 176 окисно-відновного – 185 комплексонометрії – 196 аргентометрії – 200

Індикатори металохромні – 196 адсорбційні – 201

Інтервал переходу забарвлення індикаторів

кислотно-основних – 176 окисно-відновних – 186

Іонізаційні лічильники – 298 Іонофор – 215 Іонна сила – 72

Іонообмінні смоли – 58 Іонометрія – 206 ІЧ-спектроскопія – 272

з Фур’є перетворенням – 274

Йодометрія – 187

Катіоніти – 58

Катіонообмінники – 58 Квантовий вихід – 278 Квартування – 136 Квантометри – 242 Коефіцієнт

розподілу – 41 активності – 71

конкурентної побічної реакції – 74 пропускання – 266

Кізельгур – 56 Класифікація катіонів

кислотно-основна – 23 сірководнева – 24

Класифікація аніонів – 25 Колектор – 36 Комірка

електролітична - 124 електрохімічна - 124

Комплексонати – 118 Комплексні сполуки – 95 Комплексони – 117 Комплексон ІІІ (трилон Б) – 192 Комплекси

інертні – 98 лабільні – 98

Константа розподілу –41 екстракції – 42 рівноваги – 70 дисоціації – 71

термодинамічна – 75 концентраційна – 75 загальна константа стійкості –98 ступінчаста – 98 нестійкості – 99 рівноваги ОВР – 129

діамагнітного екранування – 293 Концентрація

рівноважна – 74 загальна (аналітична) – 74

Концепція хелатного ефекту – 115 Координаційне число – 96 Крива титрування – 168

кислотно-основного – 168 перманганатометрії – 184 комплексонометрії – 194 аргентометрії – 199 потенціометрії – 220 амперометрії – 229

Краун-ефіри – 118 Криптанди – 119 Кулонометри – 230

Кювети – 269, 274

Лампа

с порожнистим катодом – 246 високочастотна безелектродна – 248

Лінії

стоксові – 290 антистоксові – 290

Лічильники іонізаційні – 298

сцинтиляційні – 299

Макроцикли – 118

Маскування – 12, 103

325

Мас-спектрометрія – 285 Мас-спектрометрія квадрупольна – 286 Матеріальний баланс – 74 Межа виявлення – 17 Мембрана – 210, 218 Мембранні електроди – 209 8-Меркаптохінолін – 114 Меркурометрія – 203 Метиловий оранжевий – 178 Метод – 133

градуювального графіка – 20 стандартів – 20 добавок – 20

Методи аналізу потенціометричний – 206 кулонометричний – 230 атомно-емісійний – 237 атомно-емісійний з ІЗП – 239 ізотопного розведення – 302 інструментальні – 11 біоаналітичні – 303 ферментативні – 316 імунні – 316 радіоімунні – 321 стандартні – 132 фізичні:

аналіз за спектрами комбінаційного розсіювання – 289

радіоспектроскопія – 292 ядерний магнітний резонанс

– 292

електронний парамагнітний резонанс – 295

Методи спектрального аналізу атомний – 236 молекулярний – 236, 262 абсорбційний – 237, 245 емісійний – 237 флуоресцентний – 237, 259 люмінесцентний – 276

полуменево-фотометричний – 28,

244

Метрологія – 144 Мольна частка – 74, 100

Молярна концентрація еквівалента – 165 Молярна маса еквівалента –165 Моніторинг – 12 Монохроматори – 241, 242, 259

Невизначеність – 151

α-Нітрозо-β-нафтол – 112 Нормальний розподіл – 147

Об'єкти елементарні – 9 оже-спектроскопія – 281 оже-електрони – 281 Оклюзія – 37 8-Оксихінолін – 113 Оптична густина – 246, 266 Осади

аморфні – 154 кристалічні – 154

Осадження – 35, 153 Осаджувач – 154

Пересичення відносне – 156

Період напіврозпаду – 297 Перенапруга – 221 Перманганатометрія – 182 Питома електропровідність – 232 Полум’я – 249 Полуменева фотометрія – 28, 244 Показник титрування

кислотно-основного – 177 Поліхроматор – 242 Полярограма

інтегральна – 223 диференціальна – 225

Полярографія – 221 осцилографічна – 226

диференціальна імпульсна – 226 переміннострумова – 227 інверсійна – 227

Поляризація – 221 Потенціал

дифузійний – 209 окисно-відновний – 122 стандартний – 122 напівхвилі – 224

Похибка – 144 систематичні – 144 випадкові – 144 грубі промахи – 144

Правило циклів – 115

добутку розчинності – 89 дзеркальної симетрії Левшина – 278

326

Панета-Фаянса-Гана – 37 Приймачі випромінювання – 241, 270, 274, 282

Проба – 135 генеральна – 135 лабораторна – 136 аналітична – 136 арбітражна – 136

Провідність електрична – 232

питома електропровідність – 232 Процес

рівноважний – 70 гетерогенний – 86

Радіоспектроскопія – 292

Радіоактивний розпад – 296 Реакції якісні – 28 Редокспара – 121 Реекстрагент – 40 Реекстракція – 40 Рівняння

Нернста – 125, 206

Ільковича – 225 Ломакіна – 238

Розріджувач – 40 Розпад

α – 296 β – 296

Розсіяння комбінаційне (раманівське) – 289

Розчин ненасичений – 89

насичений – 89 пересичений – 89 титрований – 163

Розчинність – 88 Рухливість – 43

Самопоглинання – 238

Сенсори – 13, 217, 314

Сенсор хімічний – 13 Середнє лігандне число – 99

Сцинтиляційні лічильники – 299 Сигнал

аналітичний – 11 фізичний – 11 хімічний – 11 біологічний – 12

специфічний – 15 неспецифічний – 15

Системи ідеальні – 71 реальні –71

експертні – 141 Сольовий ефект – 87 Сорбенти

полярні – 56 неполярні – 56

Сорбція – 38 Спектр – 237

Спектр флуоресцентний – 259 γ-Спектроскопія – 300 Спектрофотометрія – 262 Специфічність – 15 Співосадження – 36

поверхневе (зовнішнє) – 36 внутрішнє – 37

Стандартні зразки – 146 Стандартне відхилення – 149 Старіння осадів – 157 Стійкість

кінетична – 98 термодинамічна – 98

Стрибок титрування кислотно-основного – 169 перманганатометрії – 185 комплексонометрії – 195 аргентометрії – 200 потенціометрії – 220 амперометричного – 229

Струм

залишковий – 223 конденсаторний – 224 ємнісний – 224 дифузійний – 224

Ступінь екстракції – 41

гідролізу – 82 Сублімація – 45

Схема розділення катіонів – 26, 27

Теорія

дифузійна (кінетична) – 52 теоретичних тарілок – 52 кінетична ферментативних реакцій Міхаельса-Ментена – 317

Термогравіметрія – 161

327

Тест-методи – 307 Тест імунологічний (вагітності) – 313 Титр – 163

Титр за визначуваною речовиною – 163 Титрант – 163 Титрування

пряме – 164 зворотне – 164 по заміщенню – 164

кислотно-основне – 164, 167 окисно-відновне – 164, 182 комплексонометричне – 191 осаджувальне – 164, 198 потенціометричне – 220 амперометричне – 220, 228

Точка еквівалентності – 163

Умова практично повного осадження –

91

Фактор

розділення – 42 еквівалентності – 165

спектроскопічного розщеплення –

295

гравіметричний – 153 Фенолфталеїн – 178 Фермент – 316

Фероїн – 102, 187

Фіксанал – 168 Фільтрування – 159 Флотація – 45 Флуориметр – 279 Флуоресценція – 202, 277 Фон (шум) – 18 Фосфоресценція – 277 Функція

градуювальна – 16 утворення (Б’єрума) – 99 закомплексованості – 100

Характеристики іоноселективних електродів (ІСЕ)

інтервал виконання електродної функції – 211

селективність – 211 час відгуку – 212

Хвиля полярографічна – 224

Хелати – 97, 107

Хемосорбція – 39 Хемілюмінесценція – 280 Хімічне зміщення – 293

Хімічне споживання кисню (ХСК) – 184 Хлорофіл – 98 Холодної пари метод –258 Хроматограма – 50 Хроматографія – 46

адсорбційна – 56 витіснювальна – 49

високоефективна рідинна (ВЕРХ) – 53

газова – 61 газоадсорбційна – 62 газорідинна – 62 гель-проникаюча – 67 фронтальна – 48 елюентна – 49 рідинна – 56 іонообмінна –58 іонна – 59

надкритична флюїдна – 65 розподільна – 57 площинна – 65

тонкошарова – 66 паперова – 65

ситова – 67 молекулярно-ситова – 67 ексклюзійна – 67

Хромато-мас-спектрометрія – 285

Частка мольна – 74, 100

Чутливість методу – 16

Ядерний магнітний резонанс – 292

328