1. Теоретическая часть

   1. Механизм мобилизации жира (роль гормонов, цАМФ и Ca²⁺).

   2. Свойства и физиологическая роль свободных жирных кислот (СЖК). Транспорт СЖК в крови.

   3. Окисление ТГ в тканях, окисление глицерина, его энергетический баланс.

   4. Этапы -окисления насыщенных жирных кислот. Механизм активации и транспорта жирных кислот через митохондриальную мембрану. Роль карнитина. Особенности -окисления ненасыщенных жирных кислот и жирных кислот с нечетным числом атомов. Энергетический баланс окисления C₁₆, C₁₅, C_18:2.

   5. Энергетический баланс окисления тристеарата. Физиологическая роль СЖК при стрессе.

   6. Обмен ацетил-КоА (пути образования и утилизации).

   7. Кетоновые тела – биосинтез, утилизация, физиологическая роль.

2. Практическая часть

   1. Решение задач.

   2. Лабораторная работа.

Задачи

1 Жирная кислота C₁₅ будет вступать в ЦТК в виде:

а) цитрата; б) сукцинил КоА; в) ацетил КоА; г) -кетоглутарата; д) сукцината; е) малонил КоА?

2 Мембрана митохондрий проницаема для:

а) ацил-АПБ; б) ацил-КоА; в) малонил-КоА; г) ацетил-КоА; д) ни одного из названных соединений; е) всех названных соединений?

3 Гормончувствительная липаза обеспечивает:

а) гидролиз эфирных связей в гормонах;

б) адреналин-зависимый гидролиз пищевых липидов;

в) мобилизацию ТГ жировой ткани;

г) гидролиз ТГ в печени;

д) гидролиз ТГ в мозге?

4 Главным энергетическим субстратом для мозга в нормальных условиях является:

а) глюкоза; б) аминокислоты; в) кетоновые тела; г) жирные кислоты; д) молочная кислота; е) ТГ?

5 При голодании окисление СЖК или кетоновых тел приводит к торможению гликолиза в мышцах, потому что:

а) ацетил-КоА подавляет активность пируват-ДГ;

б)увеличение отношения АТФ/АДФ лимитирует гексокиназу;

в) гипоинсулинемия ограничивает потребление глюкозы мышцей;

г) увеличение отношения NADH/NAD⁺ лимитирует 3-ФГА-ДГ;

д) жирные кислоты обладают контринсулярным эффектом;

е) активируется ГНГ?

6 Кофакторы, общие как для -окисления СЖК, так и для аэробного гликолиза, включают:

а) витамин B₁₂; б) NAD⁺; в) АДФ; г) HS-KoA; д) аскорбат; е) биотин?

7 Мобилизация липидов из депо происходит при:

а) уменьшении концентрации цАМФ;

б) увеличении концентрации цАМФ;

в) увеличении концентрации инсулина;

г) уменьшении концентрации инсулина;

д) увеличении концентрации адреналина;

е) увеличении концентрации ионизированного Ca²⁺ в крови?

8 Для транспорта CH₃CO-SКоА из митохондрии в цитоплазму при биосинтезе пальмитиновой кислоты необходимо наличие:

а) карнитин-ацилтрансферазы; б) ацетил-КоА-карбоксилазы; в) КоА-гидролазы; г) АТФ-цитратлиазы; д) цитратсинтетазы; е) малонил КоА?

9 Что является ключевым метаболитом при биосинтезе кетоновых тел в печени?

а) ацетил-КоА; б) малонил-КоА; в) ацетоацетил-КоА; г) -окси-метилглютарил-КоА; д) цитрат; е) NADH?

10 Какие из следующих ферментов необходимы для превращения ПВК в ацетил-КоА:

а) пируват ДГ; б) цитратсинтетаза; в) пируваткарбоксилаза; г) ФЕПКК; д) АТФ-цитрат-лиаза; е) дигидролипоат ДГ?

Лабораторная работа. Определение концентрации триглицеридов в сыворотке (плазме) крови энзиматическим колориметрическим методом

Принцип метода.

Триглицериды → глицерин + жирные кислоты (липаза);

Глицерин + АТФ → глицерил-3-фосфат + АДФ (глицерокиназа);

глицерил-3-фосфат + О₂ → диоксиацетон фосфат + 2 Н₂О₂ (ГФО)

Н₂О₂ + 4-ААР + 4-хлорфенол → хинонимин + 4 Н₂О (пероксидаза)

Концентрация хинонимина, определяемая фотометрически, пропорциональна концентрации триглицеридов в пробе.

Ход работы. Готовят опытную пробу по схеме:

	Опытная проба (мл)
Сыворотка (плазма) крови	0,02
Рабочий реагент	2,0

Реакционную смесь тщательно перемешивают и инкубируют в течение 5 минут в термостате при температуре 37⁰С, измеряют оптическую плотность опытной пробы против дистиллированной воды в кюветах с толщиной поглощающего слоя 5мм при длине волны 490нм.

Примечание: окраска стабильна не менее часа после окончания инкубации при предохранения от прямого солнечного света.

Расчёт концентрации триглицеридов (С) производят по формуле:

С = Е_оп./Е_ст. • 250 – 10 мг/100мл

или

С = Е_оп./Е_ст. • 2,85 – 0,11 ммоль/л

где Е_оп. – экстинкция опытной пробы,

Е_ст. – экстинкция стандартной пробы,

10 мг/100мл (0,11 ммоль/л) – поправка на содержание свободного глицерина в сыворотке (плазме) крови.

Нормы.

Нормальные величины: 13-160мг/100мл (0,14-1,82ммоль/л)

Группы риска: 160-200мг/100мл(1,82-2,29ммоль/л)

Патологические показатели: выше 200мг/100мл (более 2,29 ммоль/л)

Выводы. Записать полученный результат и дать его клинико-диагностическую оценку.

_____________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________

Рекомендуемая литература

Основная

1.Материал лекций.

2.Кухта В.К.,Морозкина Т.С. Олецкий Э.И., Таганович А.Д. Биологическая химия .

Бином –Асар 2008. –с.229-241, 258-260.

3.Биохимия: под ред. чл.-корр. РАН, проф Е.С. Северина: М. Геотар-Медицина. 2006г. –с. 392-395, 399-409.

3. Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина; 1998. С. 373–381, 388-398, 574-577.

5.Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Медицинское информационное агентство, 2004. с.289-291, 305-310

6.Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 2004г. Т. 1.- с. 262–273. 286–294.

7.Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Флинта, 1999. с.387-410.

Занятие 15

Биосинтез липидов. Регуляция и патология липидного обмена

Цель занятия: изучить основные типы и механизмы нарушений липидного обмена. Научиться определять уровень общего холестерина в крови.

Исходный уровень знаний и навыков

Студент должен знать:

1. Механизмы регуляции углеводного обмена.

2. Механизмы нарушения обмена веществ при сахарном диабете.

3. Строение и биологическую роль желчных кислот.

4. Характеристику основных классов ЛП.

5. Метаболизм ЛП в норме.

6. Пути передачи гормонального сигнала на клетку (аденилатциклазный, инозитолтрифосфатный).

7. ЦТК, его энергетический баланс.

8. Структуру и функцию полиферментных комплексов (на примере пируват-ДГ).

Студент должен уметь:

1. Проводить исследование на фотоэлектроколориметре.

Структура занятия