Штучне осіменіння сук
До штучного осіменіння сук вдаються при відмові пса чи суки від спаровування; коли в’язка не можлива (різниця у розмірах партнерів, їх недосвідченість і т. п.); у окремих сук є аномалії розвитку статевих органів (опускання піхви чи стеноз, що перешкоджає введенню статевого члена).
Осіменіння сук можна проводити як розрідженою, так і нерозрідженою спермою. Нерозріджена сперма після охолодження у водяній бані і зберігання при 5–10 °С може використовуватися для осіменіння впродовж 21 годин. Транспортувати можна лише розріджену і охолоджену сперму.
Розріджувачами для сперми пса можуть бути:
- збиране молоко, прогріте 10 хв. до 92–94 °С і охолоджене;
- гомогенізоване молоко з 2 %-ною жирністю;
- 2,9 %-ний натрію цитрат (80 %) + жовток курячого яйця (20 %);
- середовище ІВТ;
- TRIS – жовткове середовище з 8 %-го гліцерину та 20 %-го жовтка;
- комерційні розріджувачі Triladyl (Minitub, Німеччина), Laciphos i Biocophos (L’ Aigle, IMV, Франція), Clone (Пенсільванія, США) та ін.
Сперма пса гірше переносить заморожування, ніж сперма інших тварин, тому заморожену сперму використовують в основному при міжнародному обміні генетично цінним матеріалом. Ступінь розрідження сперми повинен забезпечити наявність 100–150 млн рухливих сперміїв у 1 мл.
При осіменінні користуються двома методами – піхвовим і матковим; не хірургічним та хірургічним введенням сперми в матку.
Під час осіменіння слід уникати натискань на черевні стінки.
Час осіменіння визначають за вмістом ЛГ, концентрацією прогестерону, показниками мазка піхвового слизу, ендоскопічного дослідження піхви, вимірювання електричного опору слизової оболонки піхви, рН піхвових виділень, поведінкою суки. Найпридатнішим є визначення вмісту прогестерону в крові, який до кінця проеструсу буває менше 0,16 нг/мл. Під час найбільшого виділення ЛГ концентрація прогестерону сягає 6–9 нг/мл. Через тиждень після овуляції концентрація прогестерону підвищується до 30–50 нг/мл. Оскільки яйцеклітини, що овулювали, вимагають від 2-х до 5-ти днів для досягнення зрілості, то оптимальним часом для осіменіння вважається 2–5-й день після овуляції при концентрації прогестерону 1–25 нг/мл.
Перед взяттям крові роблять мазки з піхви для підтвердження еструсу (в мазках повинні бути лише поверхневі клітини) (Linde-Forsberg, 1995).
Осіменіння бажано проводити на 9-й та 11-й день тічки.
Існує три методи штучного (піхвового та маткового) осіменіння сук: осіменіння свіжо отриманою спермою, осіменіння розрідженою (свіжою та охолодженою) спермою і осіменіння заморожено-розмороженою спермою. Найпоширенішим з них є осіменіння свіжою спермою, яку отримують від пса у присутності суки, підготованої до осіменіння.
Для піхвового осіменіння фіксують самку за допомогою повідка, обмивають її зовнішні статеві органи розчином фурациліну 1 : 5000, припідіймають задню частину тулуба руками чи за допомогою відповідного нахилу стола (платформи). При цьому слід бути дуже обережним, щоб не натиснути на живіт. Розкривши статеві губи, вводять у піхву, вздовж верхньої її стінки, під кутом 45° догори гнучкий поліетиленовий катетер з кулястим потовщенням на кінці до впертя у шийку матки. Приєднують до вільного кінця катетера 20-мілілітровий шприц зі спермою і повільно вводять її. Доза сперми, залежно від породи, в середньому 2 мл. В ній повинно бути 200 млн рухливих сперміїв. Закінчивши введення сперми, виймають катетер, а тазову частину тулуба суки витримують ще 10–15 хв. у припіднятому стані.
Цим методом можна також осіменяти суку, зафіксовану у лежачому положенні на спині. Осіменіння сук розрідженою (свіжою чи охолодженою до кімнатної температури чи 5 ºС) спермою проводять таким же методом. Для розрідження сперми запропоновано ряд середовищ, найпридатнішим з яких у практичних умовах є пастеризоване молоко у співвідношенні 1 : 4–1 : 8.
Осіменіння сук заморожено-розмороженою спермою є дещо складнішим. По-перше, у спермі пса мала концентрація сперміїв; по-друге, у процесі заморожування та розморожування значна частина з них гине. В результаті, одного замороженого еякуляту вистачає для осіменіння однієї, максимум двох сук; по-третє, розморожену сперму необхідно вводити у матку суки, що вимагає певного досвіду.
Найзручнішим у цьому відношенні є метод з використанням катетера Фолея французької фірми IMV, на наконечнику якого є надувна гумова кулька-манжет. Вводять катетер у піхву суки в напрямку шийки матки, нагнітають у кульку повітря (що перекриває зворотне витікання введеної сперми), вливають у відгорожену кулькою краніальну частину піхви сперму і залишають катетер з роздутою кулькою у піхві на 15 хвилин. Можна користуватися для введення сперми і норвезьким катетером Фогнера, що складається із зовнішнього пластикового катетера і внутрішнього металевого з розширеним і закругленим кінцем. Вводять зовнішній пластиковий катетер у піхву в напрямку шийки матки, яку промацують через черевну стінку, а тоді просувають крізь нього внутрішній катетер у шийку, яку розправляють через черевну стінку.
Можна також осіменяти сук з використанням ендоскопа з надувним пристроєм та пристосуванням для скерування катетера у шийку матки. Нарешті, можна застосовувати хірургічне осіменіння під загальним наркозом з каудально-вентральним розрізом черевної стінки по серединній лінії. Фіксують самку за допомогою повідка, обмивають її зовнішні статеві органи розчином фурациліну 1 : 5000, припідіймають задню частину тулуба і вводять вздовж верхньої стінки піхви гнучкий поліетиленовий катетер з кулястим потовщенням накінці до упору у шийку матки. Приєднують до вільного кінця катетера 20-мілілітровий шприц зі спермою і повільно вводять сперму. Закінчивши введення сперми, виймають катетер, а тазову частину тулуба суки витримують ще 10–15 хв. у припіднятому стані.