Лекция_3_БИ_М_2014
.pdf
Генетическая инженерия растений
|
Сельскохозяйственные |
|
растения с заданными |
Модели |
признаками |
продуценты
Researchers Golden Dreams –
Все стадии экспрессии гена под контролем!!! |
|||||
Высокий уровень экспрессии |
|
|
|||
Транскрипция |
Трансляция |
|
Стабильность |
||
|
|
|
|
|
белка |
120 |
|
|
|
|
|
100 |
|
|
|
Различия между уровнем |
|
|
|
|
|
||
80 |
|
|
|
|
мРНК и белка |
|
|
|
|
|
|
60 |
|
|
|
|
|
40 |
|
|
|
|
|
20 |
|
|
|
|
|
0 |
|
|
|
|
|
Линия 1 |
Линия 2 |
Линия 3 |
Линия 4 |
|
|
ДНК |
мРНК |
|
Белок |
Белок |
|
|
|
||||
5’ Нетранслируемая область
(5’-НТО)
Структура зрелой мРНК
Стохастическое моделирование процесса трансляции
|
available the next codon |
|
|
on the ribosome |
|
мРНК |
|
3’ |
5’ |
GGCAGTAGGGGTGGAGTA |
UAA |
|
да |
|
|
|
Termination |
|
|
of translation |
Сборка рибосомы на 5’-НТО
Размер 5’НТО генов растений
Gene number
Size of 5’UTR
Размер 5’-НТО генов растений в зависимости от их уровня экспрессии
up 1 to 100, up 101 to 1000, up 1001 to 10000
pVIGG-T and consensus 5’UTR
А — vector with consensus 5’UTR, LG – bireporter (LicB-EGFP). Б — vector without 5’UTR, LG – bireporter (LicB-EGFP)
Experimental transgenesis - agroinfiltration
Transient expression EGFP
Уровень репортерного белка в растениях
5'-НТО увеличивает эффективность трансляции мРНК на 20%.
Уровень белка в растениях можно изменять за счет композиции 5'-НТО, добавления или удаления регуляторных элементов и мотивов