- •2. Правила взятия пат материала.
- •3. Фиксация пат материала.
- •4.Общие правила фиксации материала
- •5. Фиксирующие жидкости
- •6) Правила пересылки пат материала
- •7) Подготовка патматериала к микротомированию.
- •8) Порядок заливки пат материала в парафин.
- •9)Микротомы и приемы получения срезов на них
- •10.Методы окраски срезов и заключение их под покровное стекло.
что явл материалом исследования патанатомии?
Нарушения нормального строения органов и тканей в больном организме.
-трупы павших/убитых животных
-трупы эксперементальных животных
-органы от больных животных, полученные при хирургич операциях.
2. Правила взятия пат материала.
-не позднее 12 часов после смерти
-материал должен быть взят: а)от каждого органа с пат изменениями б) от главнейших внутренних органов.
-от каждого органа несколько кусочков от разных участков поражения
-в вырезанном кусочке должна быть и пат и нормальная ткань
-фиксация материала немедленно сразу после взятия
- Вырезанные кусочки должны представлять собой пластинки толщиной не более 0,5-1 см.
3. Фиксация пат материала.
Фиксация-обработка с целью сохранения структуры объектов неизменными и защиты от:
-физ факторов (высыхание)
-неорганических факторов ( окисление)
- органических факторов (гниение, патолиз)
Сущность- коагуляция белков. Жидкость может быть простой/сложной.
«+» длительное сохранение материала
«-« искажение истинной структуры – артефакт
Артефакт корригируется: а)наблюдением свежих объектов б) использованием разных фиксаторов.
4.Общие правила фиксации материала
-сразу после взятия
-стеклянная/ глиняная посуда
-V жидкости в 5-10 раз больше материала
-жидкость меняется каждый день до прозрачности
-этикетка с надписью карандашом/тушью
-фиксация в темноте
-оптимальная температура 370 гр
5. Фиксирующие жидкости
Простые:
Формалин (40% водный р-р газа формальдегида)
«+» простота, дешево, хорошо сохраняет структуру
«-« невозможность выявления водорастворимых в-в, плохое выявление цитологич структур
Для выявления водорастворимых в-в используют безводные спиртовые р-ры.
Этиловый спирт употребляют как абсолютный, так и 96°. Время фиксации продолжается 2-24 ч в зависимости от толщины исследуемого объекта.
«+» удается сохранить такие вещества, как муцины, гликоген, мочевую кислоту, железо, кальций.
«-« сморщивание клеток в результате быстрого отнятия воды, растворяет жиры и гемоглобин.
Метиловый спирт (метанол) применяют для цитологических исследований в качестве фиксатора мазков крови и отпечатков с органов и тканей. Метанол – сильный яд, хранится по правилам ядовитых веществ группы А.
Ацетон применяется при необходимости быстрого фиксирования ткани. Толщина фиксируемых объектов 3-4 мм, время фиксации 2-3 ч.
Сложные:
1)жидкость Мюллера (двухромокислый калий 2,5гр, сернокислый натрий 1гр, вода дистялиров 100мл)
2)жидкость Ценкера (жидкость Мюллера-100 мл, сулема 5 гр, уксусная к-та 5 мл (перед использованием)).
-после окончания фиксации промывка в воде
-70% спиртом промывка
-хранение в спирте 70%
3) Жидкость Орта (Жидкости Мюллера – 90, Формалина продажного – 10.)
4) Жидкость Карнуа
(Спирта абсолютного – 60,0, Хлороформа – 30,0,Уксусной ледяной кислоты – 10,0 ) IV. 5)Жидкость Буэна(Насыщенного водного раствора пикриновой кислоты – 75,0., Формалина (неразведенного) – 25,0,Ледяной уксусной кислоты – 5,0.)
Правила пересылки патологического материала
6) Правила пересылки пат материала
1. В лабораторию посылается заранее профиксированный материал (реже консервированный). Герметичная упаковка. Пробка должна быть закреплена проволочкой или бечевкой и залита менделеевской замазкой, сургучом, смолой, парафином или воском. Посуду обкладывают ватой, паклей, стружками и вкладывают в ящик. Кости обертывают целлофаном, полиэтиленовой пленкой или смоченными в дезрастворе марлей или полотном и также упаковывают в ящик.
2. В холодное время года для пересылки используют 30-50%-ный раствор глицерина, приготовленный на 10%-ном формалине, 70%-ный спирт или насыщенный раствор поваренной соли.
3. Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем (не фиксированном) виде посылают в диагностическую ветеринарную лабораторию только с нарочным.
4. Пересылаемый материал от животных, подозрительных по заболеванию инфекционной болезнью, должен быть тщательно упакован в плотный деревянный или металлический ящик. Перед упаковкой материал необходимо завернуть в холст или мешковину, смоченную дезинфицирующим раствором (креолина, лизола, известкового молока), и уложить в ящик со стружками, мякиной или опилками.
5.На каждый отправленный в лабораторию материал заполняют сопроводительный документ.