Микробиологическая диагностика чумы и туляремии

Протокол № 18 (24.09.01) Тема: Микробиологическая диагностика чумы и туляремии.

№

Цель

Методика исследования

Полученные результаты

Выводы

Чума

1.

Обнаружение предполагаемого возбудителя в исследуемом материале, его идентификация по морфологическим и антигенным свойствам.

Экспресс диагностика: РИФ с исследуемым материалом (мокрота) и чумной люминесцирующей сывороткой. Критерий учета: зеленое свечение, форма. Критерий оценки: зеленое свечение свидетельствует о наличии клеток микроорганизмов, сходных по АГ составу с возбудителями чумы.

В поле зрения видны светящиеся палочки. РИФ +

Обнаружен возбудитель чумы –

2.

Идентификация возбудителя.

а) по морфотинкториальным свойствам.

1. Приготовление препарата-мазка чистой культуры. 2. Окраска по Граму. 3. Им. микроскопия (х90).

В поле зрения видны Гр «-» палочки овоидной формы, окрашены биполярно, l~2 мкм, d~0,5 мкм.

Обнаруженый возбудитель предположительно относится к виду Yersinia pestis.

б) по биологическим свойствам.

1. Приготовление мазка-отпечатка из органа белой мыши (легкое) зараженной материалом (мокрота) взятым от больного с клиническим диагнозом чума. 2. Окраска Метиленовым синим. 3. Им. микроскопия (х90).

В поле зрения видны короткие палочки овоидной формы, окрашены биполярно в цвет красителя (синий-голубой).

Туляремия

1.

Серодиагностика туляремии.

РРПА с парными сыворотками больных К и В и туляремийным диагностикумом: КУ: Феномен агглютинации. КО: Нарастание титра АТ говорит о том, что обследуемый болеет туляремией (наличие АГ в организме). Титр АТ не изменился => наличие АТ – следствие вакцинации или перенесенного заболевания.

В

1/100

1/200

1/400

1/800

КА

КС

Обследуемый В – здоров (перенес заболевание); Обследуемый К – болеет туляремией (диагноз подтвержден).

1

+

-

-

-

+

-

2

+

-

-

-

+

-

Нарастания титра АТ нет.

К

1/100

1/200

1/400

1/800

КА

КС

1

+

-

-

-

+

-

2

+

++

+++

+++

+

-

Наблюдается нарастание титра АТ.

2.

Сероидентификация исследуемой культуры.

РРПА с исследуемой культурой и туляремийной диагностической сывороткой. КУ: Феномен агглютинации. КО: Наличие агглютинации при разведении не менее 1/1600.

1/100

1/200

1/400

1/800

1/1600

КА

КС

Исследуемая культура принадлежит к виду Francisella tularensis.

+

++

+++

+++

+++

+

-

Тд – 1/1600, То – 1/1600, То > Тд, что свидетельствует о наличии соответствующих АГ компонентов.

3.

Обнаружение предполагаемого возбудителя в исследуемом материале, его идентификация по морфологическим и антигенным свойствам.

Экспресс диагностика: РИФ с исследуемым материалом (взят из бубона) и туляремийной люминесцирующей сывороткой. Критерий учета: зеленое свечение, форма. Критерий оценки: зеленое свечение свидетельствует о наличии клеток микроорганизмов, сходных по АГ составу с возбудителями туляремии.

В поле зрения видны светящиеся коккобактерии. РИФ +

Обнаружен возбудитель туляремии – Francisella tularensis.

4.

Идентификация возбудителя.

а) по морфотинкториальным свойствам.

1. Приготовление препарата-мазка чистой культуры. 2. Окраска по Граму. 3. Им. микроскопия (х90).

В поле зрения видны Гр «-» коккобактерии d~1 мкм.

Обнаруженый возбудитель предположительно относится к виду Francisella tularensis.

б) по биологическим свойствам.

1. Приготовление мазка-отпечатка из органа морской свинки зараженной материалом (взят из бубона) взятым от больного с клиническим диагнозом туляремия. 2. Окраска по Романовскому-Гимзе. 3. Им. микроскопия (х90).

В поле зрения видны коккобактерии d~1 мкм, окрашенные в красный цвет.