Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Математическое моделирование иммунохроматографического анализа.pptx
Скачиваний:
344
Добавлен:
14.01.2018
Размер:
3.91 Mб
Скачать

Открытая лекция - представление результатов по проекту «Разработка и апробация аналитических систем для мультиплексной внелабораторной серодиагностики приоритетных инфекций крупного рогатого скота»

Математическое моделирование иммунохроматографического анализа

к.х.н. Сотников Д.В.

Институт биохимии им. А.Н. Баха, ФИЦ Биотехнологии РАН

2017

Принцип иммунохроматографического анализа Конкуренция

Принцип иммунохроматографического анализа «Сэндвич»

Реакция антиген-антитело,моделирование ее кинетики

ka

A + R ↔ AR

kd

Скорость реакции

Решение уравнения

Где a = 2[A]0[R]0, b = [A]0 + [R]0 + kd/ka

Первые модели иммунохроматографии

Qian, S., Bau, H.H. (2003) A mathematical

model of lateral flow bioreactions applied to sandwich assays, Analytical Biochemistry,

322,89-98.

«Сэндвич» ИХА

Равновесные условия!

Конкурентный ИХА

Qian, S., Bau, H.H. (2004) Analysis of lateral flow biodetectors: competitive format,

Analytical Biochemistry, 326, 211-224.

Кинетика взаимодействия аналита с маркерным конъюгатом

ka

A + P ↔ AP

kd

 

80

 

 

[A]0 = 100 нМ

 

60

 

 

 

AP (нМ)

 

 

 

[A]0 = 50 нМ

40

 

 

 

20

 

 

 

 

 

 

[A]0 = 10 нМ

 

 

 

 

 

0

 

 

[A]0 = 1 нМ

 

 

 

 

 

0

100

200

300

 

 

Время (сек)

 

Вывод:

Нельзя использовать приближение равновесных условий!

Диссоциация комплекса

AR → A + R

kd

Доля диссоциировавшего комплекса

Доля диссоциированного комплекса

kd=1, 1/c

 

 

 

 

 

 

1,0

kd=0,1, 1/c

 

 

 

 

 

0,9

kd=0,01, 1/c

 

 

 

0,8

 

 

 

 

 

0,7

 

 

 

 

 

 

 

0,6

 

 

 

 

 

kd=0,001, 1/c

0,5

 

 

 

 

 

0,4

 

 

 

 

 

 

 

0,3

 

 

 

 

 

 

 

0,2

 

 

 

 

 

kd=0,0001, 1/c

0,1

 

 

 

 

 

0,0

 

 

 

 

 

kd=0,00001, 1/c

0

100

200

300

400

500

600

700

Время, сек

Вывод:

Можно использовать приближение необратимой реакции

Определение констант взаимодействия антиген-антитело

Biacore

Принцип метода

Взаимодействия моноклональных антител с антигеном 38 кДа M. Tuberculosis

KA (M-1)

ka (M-1сек-1)

4.55×109

6.96×105

Определение состава белковых конъюгатов с наночастицами

Определение состава белковых конъюгатов с наночастицами

Количество Ig G на одну

3D модель конъюгата

наночастицу

 

Вывод:

Концентрация антител в коллоидном конъюгате около 100 нМ

Sotnikov D.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. International Journal of Molecular Sciences. 2015, v. 16, No 1, pp. 907-923.

Калькулятор

Сервис бесплатной оценки стоимости работы

  1. Заполните заявку. Специалисты рассчитают стоимость вашей работы
  2. Расчет стоимости придет на почту и по СМС

Нажимая на кнопку, вы соглашаетесь с политикой конфиденциальности и на обработку персональных данных.

Номер вашей заявки

Прямо сейчас на почту придет автоматическое письмо-подтверждение с информацией о заявке.

Оформить еще одну заявку