ДНК- полимераза III

Корректорская функция ДНК- полимеразы

Репликация ДНК

21

Репликации ДНК

Три этапа репликации ДНК

Инициация – образование репликативной вилки

Элонгация – синтез новых цепей

Терминация – завершение синтеза двух дочерних цепей ДНК

Репликация ДНК

22

Этапы репликации

I.Инициация репликации

Убактерий инициация репликации ДНК начинается в уникальном сайте хромосомы, точке репликации - oriC, из которой репликация осуществляется двунаправлено до точки окончания (terminus).

Репликация ДНК

23

Этапы репликации

Оri C – инициирующая последовательность Е. coli длиной 245 пар характеризуется высоким содержанием АТ-пар, которые легко денатурируют. К этому участку присоединяются 10-20 молекул инициаторного белка dnaA и АТР.

Это приводит к плавлению молекулы ДНК и раскрытию цепей. Далее происходит присоединение белков dnaС, dnaВ (хеликазы), ssb-белков и dnaG (праймазы). Формируется репликативная вилка.

Репликация ДНК

24

Компоненты реплисомы

Образование репликативной вилки

Репликация ДНК

25

Этапы репликации

II. Элонгация.

Синтез цепей ДНК происходит в направлении 5′ → 3 ′ растущей

цепи. Очередной нуклеотид присоединяется к свободному 3 ′-ОН концу предшествующего нуклеотидного остатка.

Синтезируемая цепь всегда антипараллельна матричной цепи.

Репликация ДНК

26

Репликация ДНК E.coli

Репликация ДНК

27

Этапы репликации

II.Элонгация

Впроцессе элонгации происходит наращивание дочерних полинуклеотидных цепей ДНК. Каждая репликативная вилка включает, по крайней мере, две молекулы ДНК-полимеразы III (димер), ассоциированные с ДНК-топоизомеразой, которая раскручивает плотно свернутую двойную спираль ДНК, и хеликазой, которая расплетают двухтяжевую ДНК на две цепи.

Репликация ДНК

28

Этапы репликации

II. Элонгация

Ведущая цепь ДНК реплицируется непрерывно в направлении 5ʹ→3ʹ, совпадающим с движением репликативной вилки. Отстающая цепь считывается в

направлении,	противоположном	движению
репликативной	вилки.	Преодоление

антипараллельности цепей ДНК при репликации достигается путем образования петельной структуры. Отстающая цепь ДНК временно образует петли вокруг реплисомы так, что димер ДНК-полимеразы получает

возможность перемещаться одновременно	по обеим
цепям в одном 5ʹ→3ʹ направлении на	короткое
расстояние.

Репликация ДНК

29

На отстающей цепи вначале синтезируются короткие фрагменты новой цепи ДНК, так называемые

фрагменты Оказаки, названные так по
имени их первооткрывателей, впервые
(1968 г.) указавших на прерывистый
характер синтеза ДНК.			Оказаки Рейджи
Каждый фрагмент		начинается	с
короткой РНК-затравки (10 – 12 пар
нуклеотидов),	необходимой		для
функционирования		ДНК-полимеразы.

ДНК-полимераза III достраивает этот праймер до фрагмента ДНК длиной 1000-2000 звеньев.

Оказаки Цунэко