Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Биохимия-лаб..DOC
Скачиваний:
12
Добавлен:
20.07.2019
Размер:
181.76 Кб
Скачать

Опыт 2. Изучение состава фосфопротеидов.

Фосфопротеиды это сложные белки, содержащие в качестве простетической группы фосфорную кислоту. Представителями фосфопротеидов являются казеиноген (белок молока), вителлин (белок желтков яиц), ихтулин (белок икры рыб) и некоторые ферменты.

Важнейший белок молока казеиноген содержится в молоке в виде растворимой кальциевой соли, его изоэлектрическая точка находится при рН 4,7.

  1. Выделение казеиногена из молока.

К 2 мл молока приливают равный объем дистиллированной воды и 2 мл ледяной уксусной кислоты. Выпавший осадок отфильтровывают и промывают на фильтре два раза дистиллированной водой, а затем собирают стеклянной палочкой в две пробирки и используют для дальнейших опытов.

Для доказательства белковой природы казеиногена с одной частью осадка проводят цветные реакции на белки и аминокислоты (биуретовую, реакция Фоля).

Для открытия фосфорной кислоты другую часть осадка подвергают гидролизу. Для этого осадок помещают в пробирку с 2 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия. Пробирку закрывают пробкой со стеклянной трубкой, кипятят 10-15 минут на асбестовой сетке и охлаждают. Гидролизат подкисляют несколькими каплями 10%-ного раствора азотной кислоты в присутствии 1-2 капель спиртового раствора фенолфталеина до обесцвечивания и отфильтровывают в сухую пробирку. К 5 мл фильтрата приливают 20 капель молибденового реактива и кипятят несколько минут. Раствор окрашивается в лимонный цвет, а затем выпадает в осадок такого же цвета.

Опыт 3. Изучение состава гликопротеидов.

Гликопротеиды представляют собой сложные белки, простетическая группа которых образована производными углеводов.

  1. Открытие углеводного компонента в яичном белке.

В сухую пробирку вносят 5 капель раствора яичного белка, с которым проводят реакцию Молиша.

2) Открытие углеводного компонента в муцине слюны.

В пробирку собирают 2-3 мл слюны и добавляют 4-5 капель ледяной уксусной кислоты. При этом выпадает в осадок муцин. Жидкость из пробирки осторожно сливают, а с осадком муцина проводят реакцию Молиша.