3.2.2. Метод определения массовой доли азота летучих оснований

Метод основан на отгонке свободных и связанных летучих оснований с паром и последующем взаимодействии образующегося аммиака с серной кислотой, избыток которой оттитровывается щелочью.

Оборудование и реактивы: весы аналитические класса 2 с пределами измерения от 0 до 200 г; вода дистиллированная; часы механические; аппарат для отгонки вместимостью от 700 до 1000 см³; колба коническая или плоскодонная вместимостью 500 см³; бюретка вместимостью 25 или 50 см³ с делениями на 0,1 см³; электроплитка бытовая; капельница; кислота серная концентрированная и раствор 0,05 моль/ дм³ (0,1 н); натрия гидроксид, раствор 0,1 моль/ дм³ (0,1 н); магния оксид; парафин; метиловый красный, раствор 0,2 г/ дм³ (0,02 %-ный); растворяют 0,02 г метилового красного в 100 см³ спирта 600 г/ дм³ (60 %-ного).

Проведение анализа. Собирают аппарат (рис. 2.1). Навеску исследуемого продукта массой от 9 до 10 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, количественно переносят 250 см³, дистиллированной воды в отгонную колбу 4, туда же добавляют 1 г окиси магния и, во избежание вспенивания, кусочек чистого парафина. Колбу закрывают пробкой с каплеуловителем 3, соединяют с холодильником 5 и парообразователем 2.

Подогревают колбу на слабом огне, пропускают в нее пар и проводят отгонку в течение 30 минут, считая с момента появления капли дистиллята в холодильнике. Дистиллят собирают в приемник 6, в который предварительно внесено 15-25 см³ 0,05 моль/ дм³ раствора серной кислоты. Конец трубки холодильника должен быть в серную кислоту.

За 5-7 минут до окончания отгонки конец холодильника вынимают из раствора.

По окончании отгонки конец трубки холодильника обмывают водой в приемную колбу и избыток кислоты в ней оттитровывают раствором гидроксида натрия 0,1 моль/ дм³ в присутствии 5 капель метилового красного до перехода окраски от розовой до слабожелтой.

Параллельно с рабочим проводят контрольный анализ без навеки исследуемого продукта.

Массовую долю азота летучих оснований в процентах вычисляют по формуле:

, (2.6)

где - объем раствора 0,1 моль/ дм³ гидроксида натрия, израсходованный на титрование серной кислоты в контрольном анализе, см³; - объем раствора 0,1 моль/ дм³ гидроксида натрия, израсходованный на титрование серной кислоты в рабочем анализе, см³; - количество азота, эквивалентное 1 см³ раствора 0,1 моль/ дм³ гидроксида натрия, г; - коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/ дм³ гидроксида натрия; - масса исследуемого образца продукта, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемое расхождение между которыми не должны превышать 0,001 %.

3. 2.3. Метод определения аминного азота методом формольного

титрования

Метод основан на связывании аминогрупп с формалином и косвенном определении их количества по результатам титрования карбоксильных групп.

Оборудование, реактивы: весы аналитические класса 2 с пределами измерений от 0 до 200 г; потенциометр постоянного тока измерительный с пределами измерений значений рН от 0 до 14; стаканы стеклянные лабораторные вместимостью 500 и 100 см³; пипетки вместимостью 2, 10, 20 см³; цилиндр мерный вместимостью 10 см³; колба мерная вместимостью 100, 250 см³; бюретка вместимостью 25 см³; мешалка магнитная; марля медицинская; бумага фильтровальная; ступка фарфоровая с пестиком вместимостью 250 см³; кислота трихлоруксусная 200 г/ дм³ (20 %-ная); вода дистиллированная; хлорид бария; натрия гидроксид, раствор 0,1 моль/ дм³ (0,1 н), 0,02 моль/ дм³ (0,02 н) и 2 моль/дм³ (2 н); кислота соляная 0,5 н раствор; кислота розоловая; формалин, раствор 400 г/ дм³ (40 %-ный) нейтрализованный – формалин нейтрализуется в день анализа раствором 0,1 моль/ дм³ (0,1 н) гидроксида натрия до рН = 7; кислота серная, раствор 0,05 моль/ дм³ (0,1 н); спирт этиловый ректификованный; индикатор смешанный (Таширо) - схема приготовления см. п.2.1.3; бумага лакмусовая, фенолфталеин 1 %-ный спиртовой раствор.

Проведение анализа:

для жидкой навески исследуемого продукта:

Сначала проводят контрольное титрование.

В стеклянный стакан наливают 20 см³ дистиллированной воды, помещают магнит. В стакан помещают электроды, приливают 10 см³ нейтрализованного формалина, включают мешалку и титруют жидкость раствором 0,02 моль/ дм³ гидроксида натрия до рН = 9.

При проведении рабочего анализа в стакан вместимостью 50 см³ помещают 0,2-0,3 г исследуемого продукта, взвешенного с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, и доводят объем дистиллированной водой до 20 см³. В стакан опускают магнит, электроды.

Раствор нейтрализуют 0,1 моль/ дм³ гидроксида натрия до рН = 6,8-7,0.

При работе с очень кислыми продуктами (рН = 1,0) начинать нейтрализацию удобно раствором 1 моль/ дм³ (1 н) гидроксида натрия, постепенно переходя к концентрации 0,1 моль/ дм³ и 0,02 моль/ дм³.

По окончании нейтрализации в раствор добавляют 10 см³ формалина (рН от 4,5 до 5,5) и титруют раствором 0,02 моль/ дм³ (0,02 н) гидроксида натрия до рН = 9.

Массовую долю аминного азота в процентах вычисляют по формуле:

, (3.7)

где - объем раствора гидроксида натрия 0,02 моль/ дм³, израсходованный на титрование исследуемого образца, см³; - объем раствора гидроксида натрия 0,02 моль/ дм³, израсходованный на титрование контрольного образца, см³; - коэффициент пересчета на точный раствор 0,02 моль/ дм³ гидроксида натрия; - количество аминного азота, соответствующее 1 см³ раствора 0,02 моль/ дм³ гидроксида натрия, мг; - коэффициент пересчета в мг в г; - навеска исследуемого образца, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,2 %.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

для всех остальных продуктов:

Делают водную вытяжку из 50 г тщательно измельченного (растертого с дистиллированной водой) в фарфоровой ступке исследуемого продукта и осаждают в ней белки трихлоруксусной кислотой, как описано в п. 2.2.1.

Отфильтровав осадок, отбирают 100 см³ фильтрата и прибавляют к нему для осаждения фосфатов и углекислых солей 2 г сухого хлорида бария и 2 н раствор гидроксида натрия до сильнощелочной реакции на лакмус. После 15-минутного отстаивания жидкость фильтруют через сухой бумажный фильтр в колбу.

Отбирают по 25 см³ фильтрата в три колбы с притертыми пробками. В одну из них вносят 10 капель розоловой кислоты и производят нейтрализацию раствора сначала 0,5 н раствором соляной кислоты, а затем 0,1 н раствором гидроксида натрия. Две другие колбы служат для определения аминного азота формольным титрованием. Для этого в них вносят израсходованное количество 0,5 н раствора соляной кислоты и 0,1 н раствора гидроксида натрия, затем приливают по 15 см³ формалина, предварительно нейтрализованного щелочью, и оттитровывают 0,1 н раствором гидроксида натрия в присутствии фенолфталеина до яркого розового окрашивания.

Массовую долю аминного азота в процентах вычисляют по формуле:

, (2.8)

где - объем 0,1 н раствора гидроксида натрия, израсходованного на титрование, см³; - объем водной вытяжки в мерной колбе, см³; - объем водной вытяжки, взятый для осаждения белков, см³; - объем водной вытяжки, взятый для осаждения белков с учетом объема трихлоруксусной кислоты, см³; - объем фильтрата, взятого для титрования, см³; - коэффициент пересчета на точный 0,1 н раствор гидроксида натрия; - количество азота эквивалентное 1 см³ 0,1 н раствора гидроксида натрия; - масса навески исследуемого продукта, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,2 %.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

Вопросы для самоконтроля

1. Что означают термины «сырой протеин» и «истинный протеин»? На чем основано их определение?

2. Как определяют переводной коэффициент общего азота на общий белок?

3. В каких продуктах определяют аминный азот? На чем основан метод его определения?

4. В мороженой треске азот летучих оснований составляет 45 мг %. Дайте заключение о степени свежести.

5.

ЛАБОРАТОНАЯ РАБОТА № 4