Количественное определение содержания углеводов (по методу Шоорля)

Метод основан на учете количества окисной меди в фелинговой жидкости. Разница в содержании окисной меди между контролем и опытом соответствует количеству восстановленной моносахаридами меди. Учет окисной меди произ-водят йодометрически.

Материалы и оборудование. Растительный материал (овощи, фрукты и т.п.), фелинговая жидкость, 30 %-ный раствор KJ, 25 %-ный раствор H₂SO₄, 1 %-ный раствор растворимого крахмала, 1 %-ный раствор Na₂S₂O₃,1 %-ный раствор HCI, терки, скальпели, кол­бочки плоскодонные на 200 мл, колбочки мерные на 100 мл, во­ронки, пипетки, бюретки, электроплитки, песочные часы.

Ход работы. Растительный материал очищают и измельчают на терке. Берут две навески по 2,5 г (для сахарной свеклы 1 г). Одна навеска используется для определения моно- и дисахаридов, а вторая для определения крахмала.

1. Определение моносахаридов и дисахаридов

Навеску 2,5 г растертого растительного материала переносят в колбочку на 200 мл, добавляют 50 мл дистиллированной воды и настаивают в течение 10 мин., кипятят 5 мин. и фильтруют. Фильтрат переносят в мерную колбу на 100 мл и доводят водой до метки. В фильтрате определяют моно- и дисахариды.

а) Определение моносахаридов

Вытяжку 5 мл переносят в колбочку, добавляют 20 мл дистиллированной воды, затем 10 мл фелинговой жидкости из бюретки, ставят на плитку и после закипания кипятят ровно 2 мин.

Содержимое колбы охлаждают проточной водой, добавляют 5 мл 30 %-ного раствора KJ, приливают 5 мл 25 %-ного раствора H₂SO₄ из бюретки, добавляют 3-5 капель 1 %-ного раствора растворимого крахмала (индикатор). После добавления крахмала желто-золотистый цвет жидкости в колбочке потемнеет, появится зеленоватый оттенок.

Содержимое колбочки титруют 1 %-ным раствором гипосуль­фита натрия до цвета топленого молока. Конец титрования оп­ределяют внесением капли крахмала. Если появляется синее ок­рашивание − титрование не окончено. Записывают количество гипосульфита, пошедшее на титрование моносахаридов (m₁).

Параллельно проводят контрольное титрование. 10 мл фелин­говой жидкости переносят в колбочку, добавляют 25 мл дистил­лированной воды, ставят на плитку и после закипания кипятят ровно 2 мин. Дальнейшее определение проводят вышеописанным способом как для вытяжки моносахаридов. Записывают количес­тво гипосульфита, пошедшего на титрование контроля (m₀).

Содержание моносахаридов определяют по формуле:

С _мон.= a·V·100 /В·Н·1000 (1)

где:

С мон. содержание моносахаридов, % на сырую массу;

а - содержание глюкозы по таблице 1 (m₀-m₁), мг;

V - общий объем полученного фильтрата из пробы, мл;

В - объем вытяжки, взятой для титрования, мл;

Н - навеска, г.

б) Определение дисахаридов.

Вытяжку 5 мл переносят в колбочку, добавляют 10 мл 1 %-ного раствора НСl, колбочку накрывают воронкой, чтобы жид­кость не выкипала, ставят на плитку и кипятят в течение 5 мин. Колбочку охлаждают под проточной водой, добавляют 10 мл дистиллированной воды, приливают 10 мл фелинговой жидкости из бюретки, ставят на плитку и после закипания кипятят ровно 2 мин.

Дальнейшее определение дисахаридов проводят вышеописан­ным способом как для вытяжки моносахаридов. Записывают количество гипосульфита, пошедшее на титрова­ние (m₂).

Содержание дисахаридов определяют по формуле:

С _дис. = А*v*100 /в*н*1000 (2)

где:

С _дис. - содержание дисахаридов, % на сырую массу;

а - содержание глюкозы по таблице 1 (m₀-m₁), мг;

V, В, Н - показатели в соответствии с формулой 2.

Таблица 1