- •Методы частной бактериологии
- •Предисловие.
- •Введение
- •Бактерии рода Bacillus
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Культуральные свойства
- •Профилактика
- •Диагностика
- •Прочие виды, имеющие значение.
- •Питательные среды для культивирования бактерий рода Bacillus
- •Бактерии рода Clostridium
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства возбудителя
- •Морфология колоний
- •Антигенная структура
- •Метаболическая активность
- •Патогенность
- •Токсины и клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Столбнячная палочка
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Антигенная структура
- •Биохимия
- •Патогенность
- •Клинические проявления
- •Иммунитет
- •Лабораторная диагностика
- •Распространение
- •Морфология возбудителя
- •Антигенный состав
- •Биохимические свойства
- •Патогенность
- •Иммунитет
- •Лабораторная диагностика
- •Морфология и культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Биохимические свойства
- •Патогенность
- •Лабораторная диагностика
- •Прочие возбудители анаэробной раневой инфекции
- •Clostridium septicum (палочка Гона-Сакса)
- •Питательные среды для культивирования клостридий
- •Грамположительные, аэробные и факультативные кокки.
- •Микроорганизмы рода Staphylococcus
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования стафилококков
- •Молочено-солевой агар
- •Лактозо-солевой бульон с фенолротом
- •Теллурит-полимиксии-желточный агар Крисли
- •Среда Джиолиотта и Кантони
- •Среда Бэрда-Паркера
- •Желточно-солевой агар Чистовича
- •Среда Чаплина-Бернса
- •Среда Чемпена (для выделения патогенных стафилококков)
- •Микроорганизмы рода Streptococcus
- •Стрептококки группы а.
- •Распространение
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •Стрептококки группы в
- •S. Pneumoniae (пневмококк)
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Негемолитические стрептококки
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Прочие стрептококки
- •Распространение
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования стрептококков
- •Бактерии рода Listeria Общая характеристика возбудителя
- •Дифференциация листерий от микроорганизмов других родов.
- •Внутривидовая дифференциация листерий.
- •Лабораторная диагностика
- •Общие положения
- •Материалы для исследования
- •Порядок исследования материала
- •Оценка результатов бактериологического исследования.
- •Рецепты и способы приготовления питательных сред для выделения листерий
- •Среда с теллуритом калия
- •Среда с теллуритом калия и флоромицином или полимиксином
- •Триптозно-фосфатный бульон (трв).
- •Триптозно-фосфатный бульон с полимиксином в
- •Триптозный агар.
- •Сывороточный агар.
- •Кровяной агар.
- •Бульон Левинталя с трипафлавином и налидиксиновой кислотой
- •Среда с ацетатом таллия и налидиксовой кислотой (tn).
- •Среда с тиоцинатом и налидиксовой кислотой (ptn).
- •Агар с трипафловином и налидиксовой кислотой.
- •Мак Брайда листериозный агар mla
- •Модифицированный листериозный агар Мак Брайда
- •Селективный агар Мак Брайда
- •Обогащенная среда для выделения листерий
- •Агаровая среда для выделения листерий
- •Среда для выделения листерий (lpm)
- •Селективная среда fda
- •Листериозная селективная среда fda/idf-fil.
- •Среда leb
- •Селективно-обогащенная среда для листерий
- •Селективная среда pal cam
- •Селективная среда для выделения листерий (pal cam)
- •Селективная среда для листерий
- •Селективная среда для листерий
- •Селективная среда cnpa
- •Селективная среда
- •Листериозная селективная среда feindt
- •Селективная среда для выделения листерий Oxford
- •Селективная среда uvmi-Broth на основе бульона
- •Бактерии рода Erysipfflothrix
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства
- •Антигенная структура.
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования е. Rhusiopathiae
- •Микроорганизмы рода Actinomyces
- •Распространение
- •Морфология и культуральные свойства возбудителя
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования актиномицетов
- •Микроорганизмы рода Pseudomonas
- •Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка)
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства возбудителя
- •Культуральные свойства
- •Биохимические свойства
- •Пигментообразование
- •Патогенез.
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства
- •Культуральные свойства
- •Биохимия
- •Патогенез поражений
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Pseudomonas (Burkholderia) pseudomallei (палочка Уитмора)
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства
- •Культуральные свойства
- •Биохимическая активность
- •Патогенез
- •Клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования и идентификации псевдомонад
- •Микроорганизмы рода Frаncisella
- •Распространение
- •Морфология
- •Культуральные свойства.
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования франциселл
- •Микроорганизмы рода Yersinia Общая характеристика
- •Морфология
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Клинические проявления человека
- •Лабораторная диагностика
- •Общие положения.
- •Материалы для исследования
- •Порядок исследования материала
- •Оценка результатов бактериологического исследования.
- •Питательные среды для культивирования иерсений Фосфатно-буферный раствор (фбр)
- •Буферно-казеиново-дрожжевая среда (бкд)
- •Дифференциально- диагностическая среда Серова
- •Среда с индикатором бромтимоловым синим (бтс)
- •Универсальный скошенный столбик
- •Щелочной раствор
- •Среда Кларка для аутоагглютинации
- •Микроорганизмы рода Pasteurella
- •Морфология и культуральные свойства
- •Распространение
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования пастерелл
- •Микроорганизмы рода Brucella
- •Распространение
- •Морфология
- •Антигенный состав
- •Биохимические характеристики
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования бруцелл
- •Микроорганизмы рода Haemophilus
- •Haemophilus influenzae (палочка Афанасьева-Пфайффера)
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Питательные среды для культивирования гемофильных бактерий
- •Микроорганизмы рода Campylobacter
- •Группа Campylobocter jejuni (с. Jejuni, с coli, с lari) Культуральные свойства
- •Антигенная структура
- •Патогенез
- •Лабораторная диагностика
- •Распространенность
- •С. Fetus подвид fetus
- •Питательные среды для культивирования и идентификации кампилобактерий
- •Бактерии рода Leptospira
- •Морфология и культуральные свойства
- •Распространенность
- •Патогенез поражений
- •Лабораторная диагностика
- •Питательные среды для культивирования лептоспир
- •Бактерии рода Mycobacterium
- •Mycobacterium tuberculosis (палочка Kоxa)
- •Распространение
- •Морфология и тинкториальные свойства
- •Культуральные свойства
- •Патогенез поражений и клинические проявления
- •Лабораторная диагностика
- •Выделение возбудителя
- •Биологическая проба
- •Серологические исследования
- •Кожные пробы с туберкулином
- •Дополнительные лабораторные методы
- •Лечение
- •Профилактика туберкулеза
- •Питательные среды для культивирования патогенных микобактерий
- •Микрорганизмы рода Mycoplasma
- •Морфология
- •Культуральные свойства
- •Биохимические свойства
- •Антигенная структура
- •Факторы патогенности
- •Патогенез
- •Питательные среды для культивирования микоплазм
- •Группа Rickettsiaceae
- •Морфология патогенных риккетсий (род Rickettsia)
- •Размножение
- •Культуральные свойства
- •Принципы лабораторной диагностики
- •Список литературы
- •Методы частной бактериологии
Распространение
Энтерококки входят в состав микрофлоры ротовой полости, кишечника и мочеполовой системы; так, E. faecium выделяют из испражнений у 25% клинически здоровых лиц. Большинство инфекций, вызванных энтерококками, носит эндогенный характер и обусловлено инвазией микроорганизмов при избыточной колонизации; также показана возможность нозокомиальной передачи микроорганизмов, частота подобных инфекций возрастает на фоне высокой частоты применения цефалоспоринов широкого спектра действия.
Клинические проявления
Энтерококки часто вызывают поражения мочеполовой системы. Также они вызывают 10-20% всех бактериальных эндокардитов и 5% бактериемий. Эндокардиты характеризуются вялым подострым течением с постепенным развитием клапанной недостаточности. Бактериемии могут развиваться как следствие поражений мочевой системы или внутрибрюшинных абсцессов; в 40% случаев источник проникновения бактерий в кровоток остается неизвестным. Гемолизирующие энтерококки также способны вызывать пищевые отравления и дисбактериозы кишечника.
Лабораторная диагностика
Выделение возбудителя обычно не представляет трудностей (рис. 8), т.к. энтерококки хорошо растут на простых средах; на кровяном агаре могут давать зоны полного (редко) или неполного гемолиза. Через 24 ч энтерококки образуют сероватые колонии диаметром 0,4-1 мм; признаками, дифференцирующими их от зеленящих стрептококков, являются способность расти на средах, содержащих 6,5% NaCI, а также способность изменять окраску лакмусового молока или молока с этиленовым синим через 4-6 ч при 37°С.
Рисунок 8. Принципиальная схема бактериологического выделения энтерококков
Питательные среды для культивирования стрептококков
Глюкозо-сывороточный бульон. К свежему стерильному МПБ (рН 7,4-7,6) добавляют 10% нормальной инактивированной сыворотки крови лошади и 1% глюкозы. Сыворотку и глюкозу предпочтительнее стерилизовать фильтрацией.
Глюкозо-кровяной агар. К расплавленному МПА с температурой около 45°С добавляют 1% глюкозы и 5—10% стерильной дефибринированной крови барана или кролика. Приготовленный агар разливают в чашки Петри.
Среда Эдварда (пропись фирмы Oxoid, 1982). В 1 л дистиллированной воды растворяют 10 г пептона, 10 г сухого мясного экстракта, 1 г эскулина, 5 г натрия хлорида, 0,0013 г кристаллвиолета, 0,33 г таллия сульфата и 15 г агара; устанавливают рН 7,4, Стерилизуют при 115° С 20 мин. К охлажденному до 45° С агару добавляют 5% стерильной дефибринированной крови овцы или крупного рогатого скота и разливают в чашки Петри. Среда обладает селективными свойствами. Используют для выделения S. agalactiae.
Кровяной агар с азидом натрия (пропись фирмы Oxoid, 1982). В 1 л дистиллированной воды растворяют 10 г триптозы, 3 г сухого мясного экстракта, 5 г натрия хлорида, 0,2 г азида натрия, 12 г агара; устанавливают рН 7,2, автоклавируют при 121°С 15 мин. К расплавленному агару с температурой 45°С добавляют 5% стерильной крови овцы, перемешивают и разливают в чашки Петри. Среда предназначена для выделения патогенных стрептококков из материалов, контаминированных посторонней микрофлорой. Азид натрия подавляет рост многих грамотрицательных бактерий.
Селективная среда с антибиотиками (пропись фирмы Oxoid, 1982), В расплавленную и охлажденную агаровую среду добавляют 7% дефибринированной крови барана и антибиотики (на 1000 см3 среды): налидиксовой кислоты - 7,5 мг, полимиксина В - 17000 ЕД, неомицина (или неомицина сульфата) - 2,12 мг. Каждый антибиотик предварительно растворяют в 20 см3 стерильной дистиллированной воды, Готовую среду используют в течение 48 ч при хранении в холодильнике (4-8°С). На среде ингибируется рост стафилококков, синегнойной палочки, энтеробактерий, клебсиелл и предотвращается роение протея. Если после засева на поверхность среды положить полоски фильтровальной бумаги (диски), пропитанные бацитрацином (10 ЕД), то можно дифференцировать стрептококки серогруппы А (чувствительные к бацитрацину) от (3-гемолитических стрептококков других групп, устойчивых к бацитрацину (Streatmer et al., 1962).
Молочная среда с полимиксином по Калине (для энтерококков). К 85 см3 расплавленного МПА с температурой 45°С добавляют 1,25 см3 0,01%-ного водного раствора кристаллвиолета, 0,5 см3 10%-ного водного раствора 2,3,5-ТТХ, 15 см3 стерильного обезжиренного молока, 20-40 ЕД/мл полимиксина М. Среда, разлитая в чашки Петри, пригодна для использования в течение 7—10 дн. при условии хранения в холодильнике (4°С). Типичные колонии энтерококков имеют округлую форму, ровные края, блестящую поверхность, диаметр 1,5-2 мм, красноватую окраску с зоной протеолиза на светло-голубом фоне.
Желчно-кровяной агар Беленького (для энтерококков). К 600 см3 3%-ного расплавленного МПА добавляют 400 см3 нативной профильтрованной желчи. Стерилизуют при 115°С 30 мин. К охлажденному до 45°С агару добавляют 5% дефибринированной крови и разливают по чашкам Петри. На среде растут энтерококки, но не растут гноеродные и оральные стрептококки.
Энтерококковая дифференциально-диагностическая среда. К 1000 см3 расплавленного МПА, имеющего температуру 45-50°С, перед употреблением добавляют 0,1 г ТТХ (2,3,5-трифенилтетразолийхлорид), 12,5 см3 0,01%-ного водного раствора кристаллвиолета, 0,1 кислоты, 20% обезжиренного молока, 1% глюкозы, 5% стерильной дефибринированной крови. Компоненты перемешивают и разливают по чашкам Петри. ТТХ и налидиксовую кислоту предварительно растворяют в небольшом количестве МПБ, Колонии S. faecalis вишнево-красного цвета, S. faecium — бесцветные или белого.
Щелочно-полимиксиновая среда Г. П. Калины (для энтерококков). Готовят отдельно три раствора.
Раствор 1: 23 см3 МПБ, 1 г глюкозы, 0,5 г натрия хлорида, 2 г дрожжевого экстракта.
Раствор 2: 25 см3 дистиллированной воды, 0,53 г Nа2СО3.
Раствор 3: 25 см3 дистиллированной воды, 0,25 г двухосновного фосфата калия. Смеси стерилизуют раздельно при 112°С 12 мин.
После стерилизации все три раствора смешивают, устанавливают рН 10-10,2, добавляют воды до 100 см3, 1,6%-ного спиртового раствора бромтимолового синего, 200 ЕД/см3 полимиксина М, Среду разливают по 5 см3 в пробирки.
Среда Эндо (фуксин-сульфитный агар с полимиксином и кристаллвиолетом для энтерококков). К расплавленной среде Эндо добавляют 200 ЕД/см3 полимиксина М и 1,25 см3 0,01%-ного водного раствора кристаллвиолета на 100 см3 среды. Колонии энтерококков ярко-красного цвета.
Желчно-цитратная среда (для энтерококков). К 100 см3 МПА добавляют 20 см3 дрожжевого автолизата, 100 см3 желчи, 40 г цитрата натрия. Смесь кипятят на водяной бане, добавляют 0,1 г трифенилтетразолия хлористого и 200 ЕД/см3 полимиксина М. Колонии энтерококков розово-красного цвета.