Раздел II Типовые патологические процессы.
Тема Воспаление II. Фагоцитоз
Цель занятия:
1. Создать модель фагоцитоза инородных тел макрофагами в перитонеальном экссудате крысы.
2. Наблюдать стадии фагоцитоза инородных клеток макрофагами в перитонеальном экссудате крысы.
Опыт 1.Фагоцитоз птичьих эритроцитов в асептическом экссудате брюшной полости белой крысы (опыт Мечникова), изучение фагоцитоза в окрашенном препарате.
Метод:
Крысе внутрибрюшинно 5 мл взвеси птичьих эритроцитов (Двукратно с интервалом в 15 - 20 мин. Через 45 мин после первого введения эритроцитов взятие экссуда, делается мазок, окрашивается краской Май-Грюнвальд
Результат:
Стадия приближения – эритроциты лежат вблизи макрофага, без контакта с мембраной последнего- не видна, т.к. динамический процесс
Стадия прилипания макрофага к эритроциту — найти макрофага, прилипшего к гусиным эритроцитам.
Стадия погружения — найти макрофаг, поглощающий гусиный эритроцит неизмененной структуры.
Стадия переваривания — найти макрофаг, поглотивший гусиные эритроциты, но еще не переваривший их — эритроциты, в основном, сохраняют свою структуру, однако могут набухать и иметь нечёткие границы. При полном переваривании удаётся найти макрофаг с обломками гусиных эритроцитов.
Зарисовать все стадии фагоцитоза.
Оценка бактерицидной активности фагоцитов проводится путем инкубации фагоцитов пациента в собственной или донорской нормальной сыворотке, содержащей опсонины, с суспензией живых бактерий (стафилококки, кишечные палочки) или убитых дрожжей. У здоровых людей за 2ч фагоциты поглощают и разрушают примерно 95% бактерий. Если в лейкоцитах после инкубации с сывороткой здорового донора обнаруживаются живые бактерии, это свидетельствует о нарушении переваривания, в отсутствие снижения способности к захвату.
Фагоцитоз — способность клеток захватывать и поглощатьпутем рецепторного эндоцитоза при участии микрофиламентов объекты размером более 1 мкм.
Стадия приближения – главный мех-м - положительный хемотаксис
Стадия прилипания - обеспечивается связыванием опсонинов с опсониновыми рецепторами фагоцита.
Стадия погружения - за счет работы цитоскелета фагоцита, путем образования ложноножек или по механизму «застёжки-молнии».
Стадия переваривания - действие кислород-зависимого свободнорадикального механизма альтерации объекта и дополнительный бескислородный литический эффект лизосомальных гидролаз.
Стадия приближения
Механизм миграции:
После маргинации лейкоциты образуют тонкие протоплазматические отростки — псевдоподии, с помощью которых они проникают через межэндотелиальные щели, а затем через базальную мембрану — за пределы кровеносного сосуда. Возможно существует и трансцеллюлярный путь эмиграции лимфоцитов, т.е. через цитоплазму эндотелиальных клеток.
Эмигрировавшие лейкоциты в очаге В. продолжают активное движение (миграцию), причем преимущественно в направлении к химическим раздражителям - хемоатрактантам.
Ими могут быть продукты протеолиза тканей или жизнедеятельности микроорганизмов.
4 хим группы:
1. белковые
2. липидные
3. полисахаридные
4. биогенные амины
См. ниже
Хемотаксис |
|
стимуляторы |
Ингибиторы |
Лизос ферменты |
Трипсин |
Комплемент |
Хемотрипсин |
Активатор плазминогена |
АцХолинэстераза |
Продукты гидролиза ФГена |
Ингибиторы ПМЯ |
ЭХФ эозинофил хемоатрактический Факутор тучн Кл |
Стрептолизин О |
Лимфокины: ИЛ8 |
Алкоголь |
Хемотаксич фактор макрофагов |
Кофеин |
М/о: эндотоксины, ЛПС микробн стенки |
ГКортикоиды |