- •2.4. Який клінічний матеріал може бути використаний при лабораторній діагностиці вірусних інфекцій у живих системах.
- •Вкажіть мішені дії противірусних препаратів у життєвому циклі вірусів.
- •3.1. Особливості росту клітин в культурі.
- •Особенности образования монослоя трансформированными клетками (клетки образуют мультислой)
- •Методи прямої і непрямої імунофлюоресценції.
- •Метод "летающих стекол"
- •Стандартизація лабораторних тварини за генетичними характеристиками.
- •1. Инбредные (линейные):
- •Отбор клинического материала для исследования
- •Основні групи сучасних дезінфікуючих засосбів, їх характеристики, механізми дії.
- •Галоїдовмісні сполуки
- •Альдегідовмісні сполуки
- •Пероксиданти
- •Четвертинні амонієві сполуки
- •Похідні гуанідину
- •Третинні алкіламіни (амфотензиди)
- •Композиційні препарати
- •4.5. Протигерпетичні препарати
- •5.3. Відповідно класифікації всі лабораторні тварини поділяються на 4 категорії
- •Що таке сд50, лд50, мпк, особливості їх визначення у біологічних системах.
- •6.1.Джерела одержання клітинних культур
- •Види клінічного матеріалу, що використовуються у лабораторній діагностиці вірусних інфекцій
- •6.3. Гнотобіоти і гнотобіологія
- •Які існують способи введення інфекційного матеріалу лабораторним тваринам
- •6.5.Категорії дезінфікуючих засобів в залежності від кінцевої мети їх застосування
- •7.2. Підготовка клінічного матеріалу до лабораторних досліджень в біологічних системах.
- •7.3. Стандартні умови утримання і годівлі лабораторних тварин.
- •7.4 За якими ознаками можна визначити, що в організмі лабораторної тварини відбувається репродукція вірусів.
- •7.5. Вимоги до тест-вірусів при дослідженні віруліцидної дії дезінфікуючих засобів.
- •8.1. Живильні середовища для культивування клітинних культур, їх призначення і основні характеристики.
- •8.2. Особливості деконтамінації клінічного матеріалу, що містить складні віруси.
- •8.3. Яке значення має вибір певного виду і кількості лабораторних тварин для валідації вірусологічних досліджень.
- •8.4. .Що таке лд50 та інфекційний титр вірусу, визначений на лабораторних тваринах, як між собою пов’язані ці величини.
- •8.5.Чому необхідно використовувати тест-віруси при дослідженні віруліцидної дії дезінфікуючих засобів.
- •Билет №9
- •Сольові розчини для культивування клітинних культур, їх призначення і основні характеристики.
- •9.2. Що таке стандартні умови утримання лабораторних тварин.
- •Алгоритми дослідження віруліцидної дії дезінфікуючих засобів.
- •Які основні принципи гуманного ставлення до лабораторних тварин викладені у Європейській конвенції про захист лабораторних тварин.
- •13.4.В чому полягають основні методичні прийоми при типуванні вірусів в рн у біологічних системах.
- •13.5.Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів суспензійним методом.
- •Роль ростових факторів при культивуванні культур клітин, джерела їх одержання.
- •14.2.Титрування вірусів в культурі клітин.
- •14.3.Категорій лабораторних тварин відповідно до наявності у них патогенів та умов утримання.
- •14.4.Противірусні препарати розширеного спектру дії.
- •Призначення живильних середовищ в залежності від вмісту в них сироватки.
- •15.2.Який взаємозв’язок існує між генетичним статусом тварин і об’ємом їх вибірки у групах при проведенні вірусологічних досліджень.
- •15.3.Що таке типування вірусів і як воно проводиться на лабораторних тваринах.
- •15.4Алгоритми визначення специфічної дії противірусних препаратів.
- •Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів методом тест-об"єктів.
- •Сироватка тварин як джерело ростових факторів.
- •В чому полягають основні небезпечні чинники при роботі з лабораторними тваринами.
- •16.3 Що є критерієм визначення серотипу вірусу при його типуванні в рн.
- •16.4 Як визначити оптимальний режим дії противірусних хіміопрепаратів у культурі клітин.
- •16.5 Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів при знезаражуванні білизни.
- •Билет 17
- •17.1 Основні етапи підготовки сироватки крові тварин до використання у біотехнології клітинних культур.
- •17.2 Яких правил слід дотримуватись при роботі з кров’ю та біологічними рідинами інфікованих або померлих тварин.
- •17.3 Особливості виділення вірусів з клінічного матеріалу, їх титрування та типування у біологічних системах
- •17.4 Розрахунок хіміотерапевтичного індексу противірусного хіміопрепарату.
- •17.5 Визначення віруліцидної дії дезінфікуючих засобів при знезаражуванні води. (в лекциях просто приведены все методы, именно для воды нету)
5.3. Відповідно класифікації всі лабораторні тварини поділяються на 4 категорії
1. Конвенціональні тварини - тварини, що містяться в конвенциальной системі. Ці тварини, як правило, є носіями різних патогенних бактерій, вірусів та паразитів.
2. Розширене конвенціональні тварини - тварини, позбавлені патогенної мікрофлори (СПФ-тварини), що містяться з елементами бар'єру в поліпшеною конвенціональної системі.
Присутність патогенів
3. Стерильні тварини (гнотобіоти) - отримані шляхом стерильного вилучення плоду з матки, або шляхом інкубації знезаражених яєць комах, птахів та ін З подальшим вирощуванням та утриманням в спеціальних гнотобіотіческіх ізоляторах. Ці тварини вільні як від патогенної, так і від нормальної мікрофлори (НМФ).
4. Тварини-гнотобіоти асоційовані відомими іісследователю мікроорганізмами, які містяться в гнотобіотіческіх ізоляторах.
Гнотобіоти
ідея і перші спроби створення тварин-гнотобіотов були зроблені в кінці XIX ст. У зв'язку з питанням общебиологического значення, висунутим ще л. Пастером: «? Чи можливе життя тварин без мікробів»
лише в кінці 40-х рр.. Х в. Американський вчений дж. Рейнірс і співр. Довів, що можна створити штучні умови, сприятливі для розвитку та розмноження гнотобіотов.
Всебічне вивчення гнотобіотов привело до формування в 60-х рр.. Х в. Самостійної наукової дисципліни - гнотобіологіі.
Методи і принципи гнотобіологіі використовуються також у клінічній медицині для повної ізоляції тотально опромінених хворих, в хірургії або в опікових центрах.
Гнотобіоти
Гнотобіоти важливі для вивчення формування імунітету, травлення, мінливості певних видів бактерій, інфекційного процесу і т.п. При відсутності нормальної мікрофлори (НМФ).
У природних умовах організмам необхідний симбіоз з НМФ, що забезпечує організм тварини вітамінами, амінокислотами, травними ферментами та ін
Гнотобіоти можуть розвиватися нарівні зі звичайними тваринами або гірше них.
Деякі види тварин (наприклад, хом'яки) ще не піддаються стерильному вирощування.
Присутність патогенів
Для тварин 1 та 2 категорій всіх видів неприпустимо наявність патогенів, спільних з людиною - збудників антропонозних інфекцій.
Для тварин 3 і 4 категорій виключається представники будь патогенної, умовно патогенної і сімбіонтной мікрофлори.
для кожної категорії тварин різних видів встановлений свій перелік бактерій, вірусів та паразитів, присутність яких неприпустимо.
5.4.Які методичні підходи існують щодо деконтамінації клінічного Деконтаминация:
Растворителями (эфиром или хлороформом) – только для простых вирусов
Антибиотиками (1000 мкг/мл)
Фильтрованием через миллипоровые фильтры с диаметром пор 0,22 мкм
Що таке сд50, лд50, мпк, особливості їх визначення у біологічних системах.
МПК (максимально переносима концентрація) найбільша концентрація препарату (мкг/мл) , яка ще не викликає дегенерації клітин в жодному з клітинних моношарів, на які він був нанесений для дослідження
СД50 (цитотоксична концентрація) - концентрація препарату (мкг/мл), що викликає дегенерацію половини клітинних моношарів, на які він був нанесений для дослідження;
Процедура визначення СД50 і МПК складається за таких послідовно виконуваних етапів:
Підготовка культури клітин:
Приготування клітинних моношарів у мікропланшетах;
Макроскопічний візуальний контроль якості культур клітину у лунках мікропланшет;
Мікроскопічний контроль якості клітинних моношарів під інвертованим мікроскопом ;
Маркування мікропланшетів;
Відмивання клітинних моношарів сольовим розчином Хенкса (Ерла, фізіологічним розчином хлориду натрію)
Білет №6