- •Гомельский государственный медицинский университет
- •Лекция 25
- •Время 90 минут
- •Оптические методы исследования и воздействие излучением оптического диапазона на биологические объекты. Элементы физики атомов и молекул.
- •Введение
- •Вопрос 1. 19 минут Поглощение света и его законы.
- •Вопрос 2. 23 минут. Показатель поглощение света, коэффициент пропускания света, оптическая плотность. Регистрация спектров поглощения биологических объектов. Фотоколориметрия
- •Вопрос 3. 23 минут. Рассеяние света мутными средами. Нефелометрия.
- •Вопрос 4. 19 минут. Фотобиологические процессы.
- •Ответы на вопросы
Оптические методы исследования и воздействие излучением оптического диапазона на биологические объекты. Элементы физики атомов и молекул.
1 минута
Введение
Интенсивность света при прохождении через вещество уменьшается. Часть энергии световой волны переходит в другие виды энергии (например, в энергию движения атомов, то есть во внутреннюю энергию вещества, процессы ионизации и возбуждения атомов, фотохимические реакции и др.).
Вопрос 1. 19 минут Поглощение света и его законы.
Интенсивность света при прохождении через вещество уменьшается. Часть энергии световой волны переходит в другие виды энергии (например, в энергию движения атомов, то есть во внутреннюю энергию вещества, процессы ионизации и возбуждения атомов, фотохимические реакции и др.). Переход энергии световой волны в другие виды внутренней энергии вещества называется поглощением света.
Уменьшение интенсивности света на пути dl пропорционально величине этого пути и величине самой интенсивности:
dI = - I dl (1)
где - постоянная, зависящая от свойств поглощающего вещества и называемая коэффициентом (показателем) поглощения.
dl
I0
Il
Рис.
1. Схема для вывода закона Бугера.
0
l
Пусть на входе в поглощающий слой интенсивность света равна I0. Найдем интенсивность света I1, прошедшего через слой вещества толщины l. Для этого интегрируем (2.1) и подставляем соответствующие пределы, предварительно разделив переменные:
,
,
,
откуда потенцируя, имеем
. (2)
Формулой выражается закон поглощения света Бугера (открыт в 1729 году).
При интенсивность I оказывается в "e" раз меньше, чем I0. Таким образом, коэффициент поглощения есть величина, обратная толщине слоя, при прохождении которого интенсивность света убывает в "e" раз. Показатель поглощения зависит от химической природы вещества и состояния, а также от длины волны света. Зависимость является источником информации о состоянии вещества.
Большое значение для медиков и биологов имеет изучение поглощения света в растворах. В этом случае поглощение света зависит также и от концентрации "c" молекул, с которыми взаимодействуют фотоны света. Закон поглощения света в разбавленных растворах носит название законом Бугера-Ламберта-Бера:
, (3)
где 1 - показатель поглощения света на единицу концентрации вещества.
В лабораторной практике закон Бугера-Ламберта-Бера обычно выражают через показательную функцию с основанием 10:
; (4)
здесь - показатель поглощения, аналогичный ; 0,43 , так как e 100,43.
Вопрос 2. 23 минут. Показатель поглощение света, коэффициент пропускания света, оптическая плотность. Регистрация спектров поглощения биологических объектов. Фотоколориметрия
Отношение потока излучения, прошедшего сквозь данное тело или раствор, к потоку излучения, упавшего на это тело называют коэффициентом пропускания, или прозрачность раствора. Выразим его как отношение интенсивностей:
. (5)
Десятичный логарифм величины, обратной коэффициенту пропускания, называют оптической плотностью:
. (6)
Ряд фотометрических методов по определению концентрации вещества в окрашенном растворе (концентрационная колориметрия) разработан на основе закона Бугера-Ламберта-Бера В этих методах измеряют световые потоки, прошедшие через раствор, коэффициент пропускания или оптическую плотность. Нижние границы концентраций, определяемых с помощью колориметров, в зависимости от рода вещества составляют 10-3 10-8 моль/л.
Приборы, используемые в концентрационной колориметрии, имеют общее название - колориметры; их подразделяют на субъективные (визуальные) и объективные (фотоэлектроколориметрические). ФЭК используют в клинической практике, в частности, для измерения насыщения крови кислородом, то есть для определения количества оксигемоглобина. Соответствующие приборы называют оксигемометрами или оксигемографами.