- •Биологическая химия
- •Глава I. Лабораторный практикум
- •Раздел 1 белки
- •1.1. Состав и свойства белков
- •Техника безопасности
- •1. Осаждение белков неорганическими осадителями
- •Техника безопасности
- •1.2.Методы количественного определения белков
- •Раздел 2. Ферменты
- •Раздел 3. Витамины
- •Раздел 4. Химия и обмен углеводов
- •Раздел 5. Химия и обмен липидов
- •Раздел 6. Обмен простых белков и аминокислот
- •Раздел 7. Обмен нуклеотидов
- •Раздел 8. Биохимия крови
- •Раздел 9. Биохимия мочи
- •1. Реакция на хлориды
- •2. Реакции на фосфаты
- •3. Реакции на сульфаты и эфиросерные кислоты
- •4. Реакции на кальций и магний
- •5. Реакция на аммонийные соли
- •1. Реакции на мочевину
- •2. Реакции на мочевую кислоту
- •3. Реакции на креатинин
- •Глава 2. Практические занятия
- •Приложения
- •Вариант 1
- •Вариант 12
- •Глава I. Лабораторный практикум……………………… 6
- •Биологическая химия
- •185910, Петрозаводск, пр. Ленина, 33
1. Реакция на хлориды
Катионы натрия, калия, аммония, кальция и магния выделяются с мочой преимущественно в виде хлористых солей. Количество хлоридов в суточной моче здорового человека приблизительно соответствует содержанию поваренной соли в пище и равно 10-15 г. Задержка хлоридов в организме свидетельствует о нарушении водно-солевого обмена и наблюдается при поражениях печени и почек, онкологических заболеваниях, крупозной пневмонии и других болезнях.
Принцип метода. При добавлении к моче, подкисленной азотной кислотой, нитрата серебра выпадает белый осадок хлористого серебра, нерастворимый в азотной кислоте, но растворимый в гидроксиде аммония:
HNO3
NaCl + AgNO3 → AgCl↓ + NaNO3
AgCl + 2NH4OH → [Ag(NO3)2]Cl + 2H2O
комплексное
соединение
Ход работы.В пробирку вносят 2 мл мочи, 2 капли 1%-го раствора азотнокислого серебра и 2 капли 10%-го раствора азотной кислоты, перемешивают и наблюдают появление белого творожистого осадка хлорида серебра, постепенно темнеющего на свету. Примерно половину содержимого отливают в другую пробирку. В первую пробирку добавляют 2-3 капли 10%-го раствора азотной кислоты (осадок не растворяется), а во вторую – 2-3 капли 10%-го раствора гидроксида аммония. Осадок во второй пробирке растворяется.
2. Реакции на фосфаты
Фосфор выделяется с мочой в виде фосфатов калия, натрия, аммония, кальция и магния. Количество фосфора, выделяемого с мочой, отражает интенсивность обмена в организме органических и неорганических фосфатов и в норме у взрослого человека равно 0,5-2 г в сутки. Уровень фосфатов в моче повышается при гиперпаратиреозе, лейкемии, диабете и снижается при рахите, гипопаратиреозе, остеопорозе.
Реакция с гидроксидом аммония
Принцип метода. Двузамещённые фосфаты кальция и магния взаимодействуют с гидроксидом аммония с образованием нерастворимых солей:
3CaHPO4 + 3NH4OH → Ca3(PO4)2↓ + (NH4)3PO4 + 3H2O,
MgHPO4 + NH4OH → Mg(NH4)PO4↓ + H2O.
Ход работы.К 2-3 мл мочи добавляют 1 мл 2%-го раствора гидроксида аммония, перемешивают и наблюдают появление осадка нерастворимых фосфатов кальция и магния. Смесь фильтруют через бумажный фильтр и к фильтрату прибавляют несколько капель магнезиальной смеси (раствор хлоридов аммония и магния в концентрированном растворе гидроксида аммония), которая осаждает другие фосфаты.
3. Реакции на сульфаты и эфиросерные кислоты
Серусодержащие соединения мочи образуются в основном в результате метаболизма аминокислот. Сера выделяется в виде неорганических сульфатов и солей эфиросерных кислот. Небольшая часть серы мочи представлена цистеином, метионином, роданидами, сульфидами и другими веществами. Суточная моча здорового человека содержит в среднем 1,8 г сульфатов (в пересчёте на серу). Количество выделяемых сульфатов зависит от содержания белка в пище. Количество солей эфиросерных кислот в моче в норме невелико (до 0,04 г/сутки), но оно увеличивается при усилении гнилостных процессов в кишечнике, сопровождающихся образованием фенола, крезола, индола и скатола.
Принцип метода. Сульфаты мочи реагируют с хлоридом бария с образованием белого осадка сернокислого бария, нерастворимого в кислотах и щелочах:
Na2SO4 + BaCl → BaSO4↓ + 2NaCl.
После удаления осадка фильтрованием и гидролиза солей эфиросерных кислот образовавшаяся серная кислота реагирует с хлористым барием с выпадением в осадок сульфата бария:
H2SO4 + BaCl2 → BaSO4↓ + 2HCl
Ход работы. В пробирку вносят 1 мл мочи и 5 капель 10%-го раствора соляной кислоты. Затем добавляют по каплям 5%-й раствор хлористого бария до полного осаждения сульфата бария (до тех пор, пока новая капля хлористого бария не приведёт к усилению помутнения). Смесь фильтруют через бумажный фильтр в другую пробирку. Фильтрат, содержащий растворимые соли эфиросерных кислот, помещают в кипящую водяную баню на 10 минут. Жидкость в пробирке мутнеет в результате освобождения серной кислоты и появления новой порции сульфата бария. Образующийся фенол окрашивает реакционную смесь в розоватый цвет.