- •1. Реакция нейтрализации токсина антитоксином. Механизм. Способы постановки, применение.
- •3. Классификация гиперчувствительности по Джейлу и Кумбсу.
- •5. Реакция иммунофлюоресценции. Механизм, компоненты, применение.
- •7. Анафилактический шок и сывороточная болезнь. Причины возникновения. Механизм. Их предупреждение.
- •8. Живые вакцины. Получение, применение. Достоинства и недостатки.
- •9. Реакция агглютинации. Компоненты, механизм, способы постановки. Применение.
- •10. Моноклональные антитела. Получение, применение.
- •11. Реакция преципитации. Механизм. Компоненты. Способы постановки. Применение.
- •12. Понятие об иммуномодуляторах. Принцип действия. Применение.
- •13. Методы приготовления и применения агглютинирующих, адсорбированных сывороток.
- •14.Видовой (наследственный) иммунитет. Неспецифические факторы защиты.
- •15. Структура и функции иммунной системы.
- •16. Иммунокомпетентные клетки. Т- и в-лимфоциты, макрофаги, их кооперация.
- •17. Интерфероны, природа. Способы получения и применения.
- •18 Антитоксический, антибактериальный, стерильный и нестерильный иммунитет.
- •19. Роль и. И. Мечникова в формировании учения об иммунитете. Неспецифические факторы защиты организма.
- •20. Реакция пассивной гемагглютинации. Компоненты. Применение.
- •21. Генно-инженерные вакцины. Принципы получения, применение.
- •22. Понятие об иммунитете. Виды иммунитета.
- •23. Аллергические пробы, их сущности, применение.
- •25. Реакция связывания комплемента. Механизм. Компоненты. Применение.
- •26. Антителообразование: первичный и вторичный ответ.
- •28. Препараты иммуноглобулинов. Получение, очистка, показания к применению.
- •29. Иммунобиологические диагностические препараты, получение, применение.
- •30. Иммунологическая память. Иммунологическая толерантность.
- •31. Типы аллергических реакций по характеру повреждений.
- •32. Первичные и вторичные иммунодефицита. Диагностика и лечение.
- •33. Серологические реакции, используемые для диагностики вирусных инфекций.
- •34. Инактивированные (корпускулярные) вакцины. Получение. Применение. Достоинства. Недостатки.
- •35. Антитоксические сыворотки. Получение, очистка, титрование. Применение. Осложнения при использовании и их предупреждение.
- •36. Иммуноферментный анализ. Механизм, компоненты, применение.
- •37. Аллергены. Классификация их по происхождению и характеру вызываемых аллергических реакций.
- •38. Антигены: определение, основные свойства. Антигены бактериальной клетки.
- •39. Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете.
- •41. Особенности противовирусного иммунитета.
- •42 Реакция Кумбса. Механизм. Компоненты. Применение.
- •43. Анатоксины. Получение, очистка, титрование и применение.
41. Особенности противовирусного иммунитета.
Противовирусный иммунитет. Основой противовирусного иммунитета является клеточный иммунитет. Клетки-мишени, инфицированные вирусом, уничтожаются цитотоксическими лимфоцитами, а также NK-клетками и фагоцитами, взаимодействующими с Fc-фрагментами антител, прикрепленных к вирусспецифическим белкам инфицированной клетки. Противовирусные антитела способны нейтрализовать только внеклеточно расположенные вирусы, как и факторы неспецифического иммунитета — сывороточные противовирусные ингибиторы. Такие вирусы, окруженные и блокированные белками организма, поглощаются фагоцитами или выводятся с мочой, потом и др. (так называемый «выделительный иммунитет»). Интерфероны усиливают противовирусную резистентность, индуцируя в клетках синтез ферментов, подавляющих образование нуклеиновых кислот и белков вирусов. Кроме этого, интерфероны оказывают иммуномодулирующее действие, усиливают в клетках экспрессию антигенов главного комплекса гистосовместимости (МНС). Противовирусная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые, взаимодействуя с вирусами, препятствуют их адгезии на эпителиоцитах.
42 Реакция Кумбса. Механизм. Компоненты. Применение.
Реакция Кумбса.
Принцип.
При наличии неполных (блокирующих) антител на поверхности эритроцитов исследуемого пациента происходит агглютинация эритроцитов при инкубации их с антиглрбулиновой сывороткой (прямой тест Кумбса) или с разведениями сыворотки пациента в реакции с предварительно сенсибилизированными эритроцитами донора (непрямой тест).
Посуда.
Пробирки химические.
Пастеровские пипетки.
Мелкие белые тарелочки.
Реактивы.
Раствор 5 % цитрата натрия.
0,9 % раствор хлорида натрия.
Антиглобулинювая сыворотка (сыворотка . Кумбса) с титром преципитинов не ниже 1:256— 1:512.
НАЗАД ВВЕРХ
Прямая реакция Кумбса.
Ход определения.
3 мл крови берут из локтевой вены исследуемого в одну пробирку с предварительно внесенным 1 мл 5 % раствора цитрата натрий. Эритроциты трижды отмывают в большом объеме изотонического раствора «атрия хлорида путем центрифугирования при 1500 об/мин, в течение 10 мин. Из отмытых эритроцитов готовят 5 % взвесь на изотоническом растворе (1 капля отмытых эритроцитов и 19 капель изотонического раствора). На сухую частую белую тарелку наносяткапяю антиглобулнновой сыворотки, к ней .добавляют каплю 5 % взвеси эритроцитов исследуемого. Сыворотку перемешивают с эритроцитами стеклянной палочкой. Рядом ставят, контроль, используя вместо сыворотки изотонический раствор. Каждую новую серию антиглобулиновой сыворотки ставят аналогичным путем со стандартными сенсибилизированными эритроцитами и с интактными донорскими эритроцитами различной группы. Перемешанные эритроциты с сывороткой слегка покачивают не более 10 мин.
Учет реакции.
Появление агглютинации указывает на наличие неполных антител на поверхности эритроцитов. Реакция может быть проведена в пробирках. В этом случае 2 капли (0,1 мл) различного разведения антиглобулиновои сыворотки (в зависимости, от титра преципитинов) помещают в пробирки и добавляют каплю отмытых эритроцитов. Осторожно встряхивают и инкубируют 30 мин при 37 °С.
Учет реакции проводят после центрифугирования при 1500 об/мин в течение 1 мин (центрифуга ЦЛК-1).
НАЗАД ВВЕРХ
Непрямая реакция Кумбса.
Ход определения.
Из локтевой вены исследуемого берут 3 мл крови в чистую сухую пробирку.
Реакция идет в два этапа:
сенсибилизация стандартных эритроцитов неполными антителами, предположительно находящимися в исследуемой сыворотке;
агглютинация сенсибилизированных эритроцитов антиглобулиновои сывороткой.
Необходимо использовать троекратно отмытую в изотоническом растворе смесь эритроцитов различных аллотипов 0(I) группы резусположительных. Каплю этих эритроцитов вносят в пробирку и на них наслаивают 3 капли исследуемой сыворотки. Пробирки энергично встряхивают и помещают в термостат при 37 °С на 40 мин. Параллельно опыту ставят контрольные пробы. Первая: в пробирку с 2 каплями стандартных отмытых резусположительных эритроцитов 0(1) группы вносят 3 капли антирезусной сыворотки АВ (IV); вторая: в пробирку с 2 каплями отмытых стандартных резусотрицательных эритроцитов 0(1) вносят 3 капли сыворотки AB(IV). Контрольные пробирки помещают, так же как и опытные, в термостат при 37 °С на 40 мин.
После термостатирования из пробирок осторожно отсасывают сыворотку. Эритроциты трижды отмывают в изотоническом растворе натрия хлорида. На сухую чистую тарелку наносят в 3 точках по 1 капле антиглобулиновои сыворотки. В первую каплю добавляют эритроциты, сенсибилизированные сывороткой пациента, во вторую и третью — эритроциты контроля 0(I) резусположительных с антирезусной сывороткой AB(IV) и 0(I) резусотрицательные с антирезусной сывороткой AB(IV). Эритроциты тщательно перемешивают стеклянной палочкой с антиглобулиновои сывороткой. После этого осторожно покачивают тарелку в течение 10 мин, но не более.
Учет реакции.
При наличии в сыворотке пациента неполных антител в опытной смеси будет наблюдаться агглютинация. Контроль с резусположительными 0(I) эритроцитами должен дать агглютинацию. В контроле с резусотрицательными 0(I) эритроцитами агглютинации не должно быть. В ряде случаев неполные антитела вступают в реакцию при низкой температуре (4 °С), о чем необходимо помнить в исследованиях при подозрении на холодовую иммунную цитопению.
Клиническое значение.
Выявление антител к эритроцитам играет ведущую роль в диагностике аутоиммунных гемолитических анемий, эссенциальных или вторичных.
При системных заболеваниях (системная красная волчанка, хронический активный гепатит, болезнь Шегрена) бывает чаще положительной непрямая реакция Кумбса.