Методическое указание для студентов к практическому занятию № 5

Тема: Капсулы у бактерий и методы их выявления.

Цель: Изучение морфологии микроорганизмов, образующих капсулу.

Модуль 1. Морфология и физиология микроорганизмов.

Цель: Освоение практических навыков приготовления препаратов для окраски спор.

Содержательный модуль. Морфология и структура бактерий.

Тема занятия: Капсулы у бактерий и методы их выявления.

Актуальность темы. Знание морфологии имеет большое значение для микроскопического метода лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. Изучение морфологии бактерий осуществляется при микроскопии окрашенных микропрератов. Изучение отдельных компонентов микробной клетки и выявление (капсулы, зерен валютина) играет важную роль в дифференциации патогеных и непатогенных микроорганизмов. Некоторые бактерии образуют капсулы, как в организме человека, так и на питательных средах. Для их выявления существуют специальные методы.

Капсулы у некоторых бактерий – внешний слой оболочки, который переходит в слизистый шар. Эти бактерии выделены в отдельную группу под названием капсульных бактерий. Выявить капсулу возможно по методу Бурри-Гинса, при окраски метиленовой синькою.

Некоторые бактерии (пневмококки, клебсиеллы и др.) образуют капсулу - слизистое образование, прочно связанное с клеточной стенкой, имеющее четко очерченные внешние границы. Капсула различима в мазках-отпечатках из патологического материала. В чистых культурах бактерий капсула образуется реже. Она выявляется при специальных методах окраски, создающих негативное контрастирование вещества капсулы. Обычно капсула состоит из полисахаридов (экзополисахаридов), иногда полипептидов, например у сибиреязвенной бациллы. Капсула гидрофильна, она препятствует фагоцитозу бактерий. Многие бактерии образуют микрокапсулу - слизистое образование, выявляемое при электронной микроскопии. От капсулы следует отличать слизь - мукоидные экзополисахариды, не имеющие четких внешних границ. Бактериальные экзополисахариды участвуют в адгезии (прилипании к субстратам), их еще называют гликокаликсом.

Кроме того, что бактериальные экзополисахариды синтезируются бактериями путем секреции их компонентов, существует и другой механизм их образования - при действии внеклеточных ферментов на дисахариды. В результате этого образуются декстраны и леваны. Капсула и слизь предохраняют бактерии от повреждений, высыхания, так как они гидрофильны и хорошо связывают воду, препятствуют действию защитных факторов макроорганизма и бактериофагов.

Конкретные цели:

• Выявление капсул в микропрепаратах из чистых культур, окраска по Бурри-Гинса.

• Выявление капсул в препаратах-отпечатках из органов, окрашенных метиленовой синькою.

• Делать выводы о микроскопии бактериологических препаратов (капсульных) при использовании иммерсионного микроскопа.

• Описывать дифференциальные признаки расположения спор относительно микробной клетки.

• Проанализировать результаты микроскопического исследования микроорганизмов, образующих капсулу, при окраске их по Бурри-Гинсу и метиленовой синькою.

Уметь:

• Приготовить препараты для выявления капсул;

• Окрашивать капсульные бактерии по Бурри-Гинса, метиленовой синькою;

• Проводить микроскопию микропрепаратов при помощи иммерсионного микроскопа;

• Анализировать морфологию капсульных бактерий.

Теоретические вопросы:

1. Капсулы у бактерий.

2. Химический состав капсул.

3. Микробы, образующие капсулы только в организме, а также за его пределами.

4. Значение капсулообразования у микробов.

5. Использование признака капсулообразования с целью диагностики.

6. Методика выявления капсул в препаратах из чистых культур, окрашенных по Бурри-Гинса.

7. Методика выявления капсул в препаратах-отпечатках из органов.

Практические задачи, которые выполняются на занятии:

1. Приготовление микропрепаратов из капсульных бактерий по методу Бурри-Гинса.

2. Просмотр демонстрационных препаратов, окрашенных по методу Бурри-Гинса.

3. Просмотр препарата-отпечатка, окрашенного метиленовой синькою (возбудитель сибирской язвы).

4. Зарисовка демонстрационных препаратов в протокол.

5. Оформление протокола.

Литература:

1. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунолог-гією.– Київ: Вища школа, 1992.– 431с.

2. Воробьев А.В., Быков А.С., Пашкола Е.П., Рыбакова А.М. Микробиоло-гия.– М.: Медицина, 1998. – 336с.

3. Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского.– М.: ГЄОТАР-МЕД, 2001.– 768 с.

4. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология /Под редак-цией академика А.А. Воробьева,- М.: Медицинское информационное агентство, 2004.– 691с.

5. Конспект лекции.

Дополнительная литература:

1. Збірник завдань для підготовки до тестового екзамену Крок-1. Загальна лікарська підготовка.– Київ.: Медицина, 2004.- С. 300-333.

2. Методические указания для преподавателей к практическим занятиям по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии.– Харьков, 1986.– 125с.

3. Сборник тестовых заданий для самоподготовки по медицинской микро-биологии и вирусологии.– Харьков, 2005.– 28с.

Краткие методические указания к работе на практическом занятии.

В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию.

Самостоятельная работа состоит из приготовления микропрепаратов, окраски их по методу Бурри-Гинса, проведения их микроскопии. Потом студенты зарисовывают микропрепараты и дают необходимые объяснения.

В состав самостоятельной работы входит также микроскопия демонстрационных препаратов и их зарисовка.

В конце занятия проводится тестовый контроль и анализ итогов результатов самостоятельной работы каждого студента.