Иммунофенотипирование и цитохимические исследования при острых лейкозах.

Цитохимическое исследование - основной метод диагностики форм острых лейкозов. Его проводят с целью выявления специфических для различных бластов ферментов. Так, при OJUI определяется положительная ШИК-реакция на гликоген, отрицательная реакция на липиды, пероксидазу, хлорацетатэстеразу. При острых миелобластных лейкозах - положительная реакция на миелопероксидазу, липиды, хлорацетатэстеразу. ШИК-реакция зависит от формы острого миелоидного лейкоза. 

Иммунофенотипирование бластов проводят автоматизированным методом на проточном цитофлюориметре или иммуноферментным методом на стекле с использованием световой микроскопии. Последний имеет то преимущество, что его можно проводить параллельно с цитохимическим исследованием. Иммунофенотипирование позволяет определить с помощью моноклональных AT наличие или отсутствие кластеров дифференцировки бластных клеток (CD-маркёры). Его проведение в первую очередь необходимо для точной диагностики ОЛЛ, а также в трудных случаях дифференциальной диагностики острых лимфобластных и миелобластных лейкозов. Это принципиальный момент, поскольку лечение этих форм разное. 

Цитогенетическое исследование лейкозных клеток позволяет определить хромосомные аномалии и дальнейший прогноз.

========

Специальное иммунологическое исследование – иммунофенотипирование. Иммунофенотипирование проводится методом проточной цитометрии и позволяет определить, к какому подвиду лейкоза принадлежит данное заболевание, что имеет важное значение для выбора оптимальной программы лечения.

Иммунофенотипирование клеток – это определение поверхностных маркеров и, соответственно, принадлежности клеток к той или иной субпопуляции.

========

	ЦХ
Острый миелобластный лейкоз	Специфична положи­тельная миелопероксидазная реакция, положительная реакция с Суданом черным, реакция на кислую фосфатазу и положительная диффузная ШИК-реакция.
Острый лимфобластный лейкоз	Характерны положительная ШИК-реакция в виде крупных глыбок в цитоплазме лимфобластов, непостоянным при­знаком служит положительная реакция на кислую фосфатазу.
Острый промиелоцитарный лейкоз	Положительная миелопероксидазная реакция дает осно­вания отнести его к лейкозу, развитие которого можно связать с властными клетками миелоидного ряда. Существуют и специфические, только для этой формы характерные цитохимические черты - присутствие кислых сульфатироваштых мукополисахаридов.
Острый монобластный лейкоз	Определяется высокий уровень кислой фосфатазы, слабоположительная диффузная ШИК-реакция и положительная альфанафтил эстераза.
Острый миеломонобластный лейкоз	Свойственны цитохимические признаки и миелобластов, и монобластов, но все они выражены слабее, а в некоторых случаях отрицательны. Как и при миелобластном лейкозе, отмечаются положи­тельная реакция на пероксидазу (±), реакция с Суданом черным (±), ШИК-реакция (±) (если положительная, то в диффузном виде). Подобно острому монобластному лейкозу, при этой форме реакция на кислую фосфатазу положительная, но ниже, чем при монобластном лейкозе; реакция на альфанафтил эстеразу положи­тельная, но ниже, чем при монобластном лейкозе.
Не дифференцируемая форма острого лейкоза	Клеточные элементы которого ли­шены положительных цитохимических признаков.
Острый эритромиелоз
Острый плазмобластный лейкоз	При отрицательных цитохимиче­ских признаках тех или иных форм острого лейкоза позволили уставновить острый илазмобластный лейкоз.
Острый мегакариобластиый лейкоз