- •Лекция 12 от 7 декабря 2007 г. Гемостаз
- •1. Понятия «гемостаз», «система регуляции агрегатного состояния крови»
- •Понятие «система регуляции агрегатного состояния крови (раск)»
- •Гемостатический потенциал
- •2. Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз
- •Клинические проявления дефицита факторов сосудисто-тромбоцитарного гемостаза
- •3. Методы исследования сосудисто-тромбоцитарного гемостаза
- •Резистентность (ломкость) капилляров Проба Румпель-Лееде-Кончаловского
- •Время кровотечения
- •Метод Дьюка
- •Метод Айви
- •Подсчет числа тромбоцитов
- •Подсчет в камере Горяева
- •Метод подсчета тромбоцитов в окрашенных мазках крови
- •Автоматический метод подсчета тромбоцитов
- •Ретракция сгустка крови
- •Определение ретенции (адгезивности) тромбоцитов
- •Исследование агрегации тромбоцитов
- •4. Коагуляционный гемостаз: теория а.А.Шмидта–п.Моравитца
- •Теория Шмидта–Моравитца
- •5. Плазменные факторы свёртывания крови
- •Общая характеристика плазменных факторов свёртывание крови
- •Характеристика отдельных плазменных факторов свёртывания крови Фактор I (фибриноген)
- •Фактор II (протромбин)
- •Фактор III (тканевый тромбопластин)a
- •Фактор IV (ионизированный кальций)
- •Фактор V (проакцелерин)
- •Фактор VII (проконвертин)
- •Фактор VIII (антигемофильный глобулин а)
- •Фактор IX (антигемофильный глобулин b или Кристмас-фактор)
- •Фактор X (Стюарта—Прауэра)
- •Фактор XI (плазменный предшественник тромбопластина)
- •Фактор XII (контактный фактор Хагемана)
- •Фактор XIII (фибринстабилизирующий, фибриназа, фактор Лаки-Лоранда)
- •Фактор Флетчера (плазменный прекалликреин)
- •Фактор Фитцжеральда-Фложе — высокомолекулярный кининоген плазмы
- •Образование тромбина (фаза II, общий путь)
- •Образование фибринового тромба (фаза III)
- •Посткоагуляционная фаза
- •Связь внешнего и внутреннего механизмов свертывания крови
- •Феномен паракоагуляции
- •8. Методы исследования гемокоагуляции Общие вопросы
- •Время свертывания крови Метод Моравитца
- •Определение времени свертывания крови (унифицированный двупробирочный метод Ли —Уайта).
- •Определение времени рекальцификации плазмы (унифицированный метод).
- •Активированное частичное (парциальное) тромбопластиновое время (ачтв)
- •Определение толерантности плазмы к гепарину (унифицированный метод Горстмена).
- •Определение протромбинового времени (унифицированный метод Квика).
- •Тромбоэластограмма.
- •Определение времени свертывания цельной нестабилизированной крови
- •Тромбоэластография
- •9. Противосвертывающая система крови
- •Первичные антикоагулянты
- •Вторичные антикоагулянты
- •10. Фибринолиз
- •Плазминовый вариант фибринолиза:
- •Неплазминовый вариант фибринолиза
- •11. Нейрогуморальная регуляция агрегатного состояния крови
- •Добавить Фибринтаймер bf-II
- •Тромбиновое время 712080905
Определение времени рекальцификации плазмы (унифицированный метод).
Принцип: определяют время свертывания цитратной плазмы после добавления хлорида кальция (рекальцификация).
Тест характеризует преимущественно I фазу свертывания. Норма составляет 60 ‑ 120 с.
Оценка результатов: увеличение времени говорит о снижении свертывания крови, снижение времени — об увеличении свертывания крови.
Активированное частичное (парциальное) тромбопластиновое время (ачтв)
Тест АЧТВ является одним из самых информативных и самых распространенных скрининговых тестов, который чувствителен к дефициту всех факторов свертывания крови (кроме ф.VII), к гепарину, к специфическим ингибиторам (антитела к ф.VIII и IX) и к неспецифическим ингибиторам (системная красная волчанка).
Метод моделирования процесса внутреннего свертывания в системе in vitro был предложен в 1953 г. (Langdell, Wagner, Brinhous) и первоначально осуществлялся на стеклянной поверхности.
Однако стекло активировало процесс по-разному в зависимости от марки, методов обработки, применяемого моющего средства. С целью стандартизации в качестве активатора (отрицательно заряженной поверхности) стали использовать каолин, целит, бентонит и ряд других веществ с отрицательно заряженной поверхностью, в последние годы – растворимую в воде эллаговую кислоту.
При проведении теста используют также фосфолипиды растительного и животного происхождения или их смесь и ионы кальция для рекальцификации плазмы после действия цитрата.
С целью стандартизации реакцию проводят при постоянной температуре (37°С).
Принцип метода заключается в определении времени свертывания плазмы в условиях стандартизации не только контактной, но и фосфолипидной (тромбопластиновой) активации факторов свертывания. С этой целью к плазме добавляют смесь каолина и кефалина (тромбопластиновый активатор), а также кальция хлорид и по секундомеру определяют время свертывания плазмы.
До настоящего времени в ряде лабораторий проводят 2 других аналогичных, но лишь частично стандартизированных теста: ЧТВ (частичное тромбопластиновое время или кефалиновое время) и АВР (активированное время рекальцификации или каолиновое время). ЧТВ, кефалиновое время, определяют при добавлении в исследуемую плазму фосфолипидного компонента (кефалина) и кальция хлористого; АВР, коалиновое время, - при добавлении в исследуемую плазму фактора контакта (каолина) и кальция хлористого, тест чувствителен к волчаночному антикоагулянту.
Тест АЧТВ не имеет стандарта ВОЗ, так как для его проведения применяют различные реагенты.
В качестве заменителя тромбоцитарного фактора 3 используют тромбоциты, фосфолипиды животного происхождения (мозг кроликов, быка или человека), растительные фосфолипиды (сои), смесь растительных и животных фосфолипидов, фосфолипиды из мембран эритроцитов человека: эрилид, эритрофосфатид.
АЧТВ-реагенты различаются также по типу и концентрации активатора, типу буфера, присутствию защитных добавок. Было установлено, что именно фосфолипидные реагенты являются тем компонентом, который преимущественно влияет на результаты АЧТВ-теста, и оптимальными являются те реагенты, в которых соотношение фосфатидил-серина и фосфатидил-холина такое же, как в факторе 3 тромбоцитов.
В норме АЧТВ (кефалин-каолиновое время) составляет 35–50 с.
Уменьшение АЧТВ свидетельствует о гиперкоагуляции и склонности к тромбозам, увеличение — о гипокоагуляции крови.
Запомните АЧТВ чрезвычайно чувствительно к дефициту плазменных факторов свертывания, участвующих во внутреннем механизме свертывания (факторы XII, XI, IX, VIII) и не зависит от дефицита тромбоцитов или их функциональной недостаточности (в связи с добавлением кефалина). |
АЧТВ удлиняется также при наличии в крови ингибиторов свертывания (гепарина) и может быть использован как чувствительный тест для контроля за лечением гепарином.