- •Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
- •Методические указания к лабораторно-практическим занятиям по патологической физиологии
- •Тема 1. Физиологическая и патологическая регуляция функций
- •Общая этиология и патогенез. Действие болезнетворных факторов на организм животных
- •Тема 3. Действие повышенной и пониженной температуры окружающей среды на организм
- •Тема 4. Действие лучистой энергии
- •Тема 5. Влияние электрического тока на организм животных
- •Тема 6. Артериальная и венозная гиперемия. Ишемия
- •Тема 7. Тромбоз и эмболия
- •Воспаление
- •Тема 8. Расстройство кровообращения и эмиграция лейкоцитов при остром воспалении
- •Тема 9. Морфологические и биохимические свойства гнойного экссудата
- •Тема 10. Фагоцитоз
- •Болезнетворные факторы
- •Воспаление
- •Тема 11. Зависимость развития патологического процесса от состояния центральной нервной системы, факторов внешней среды и возраста
- •Тема 12. Изучение защитных свойств организма
- •Иммунопатология
- •Тема 13. Аллергия и аллергические заболевания
- •Тема 14. Местные проявления анафилаксии
- •Тема 15. Реакция антигена с антителом
- •1. Получение и обработка испытуемой сыворотки
- •2. Приготовление 2,5% взвеси эритроцитов
- •3. Приготовление гемолизина
- •4. Приготовление комплемента
- •5. Приготовление антигена
- •Тема 16. Лихорадка
- •Тема 17. Отек и водянка
- •Патология системы крови
- •Тема 20. Лейкоцитарная формула и ее изменение при патологии. Лейкозы (2 часа)
- •Патология общего кровообращения
- •Тема 22. Сердечная недостаточность кровообращения (2 часа)
- •Тема 23. Нарушение ритма сердечной деятельности (2 часа)
- •Тема 24. Нарушение внешнего и внутреннего дыхания
- •Тема 25. Нарушение дыхания при поражении головного мозга и грудной полости (2 часа)
- •Патология кровообращения
- •Раздел XII патология пищеварения
- •Тема 26. Патология пищеварения в желудке (2 часа)
- •Тема 27. Кислотность желудочного сока при различных секреторных нарушениях желудка (2 часа)
- •Тема 28. Влияние экстракта содержимого желудка, тонкого и толстого отделов кишечника на кровообращение и дыхание (2 часа)
- •Патология печени
- •Тема 29. Нарушение желчеобразовательной и желче-выделительной функции печени. Желтухи (2 часа)
- •Тема 30. Количественное и качественное изменение мочи при нефрозо-нефритах (2 часа)
- •Тема 31. Влияние на организм нарушений инкреторной функции гипофиза, надпочечников, щитовидной и поджелудочной желез
- •Тема 32. Нарушение движений и чувствительности
- •Тема 1. Физиологическая и патологическая регуляция, функций 4
- •Тема 3. Действие повышенной и пониженной температуры окружающей
Тема 12. Изучение защитных свойств организма
В защите организма от патогенных воздействий важную роль играет ретикуло-макрофагальная система, функциональное состояние которой зависит от нервной деятельности. Основной функцией клеток РМС является способность их поглощать вещества, попавшие в кровь.
Цель занятия: на лабораторных животных познакомиться с некоторыми методами изучения функции ретикуло-эндо-телия.
Опыт 1. Определение конгоротового индекса
Оборудование: центрифуга, центрифужные пробирки, гемометр, пипетки, шприц стерильный, конгорот — 1% р-р, лимоннокислый натр 5%, дистиллированная вода, кролик.
Порядок работы. В две центрифужные пробирки налить по 1 мл лимоннокислого натра. Кролику в ушную вену ввести 4 мл 1 % р-ра конгорота и ровно через 4 мин взять кровь, обозначив ее № 1. Через 30 мин в другую центрифужную пробирку снова взять кровь, в которой также есть раствор лимоннокислого натра. Эту кровь обозначим
45
№ 2. Обе пробирки отцентрифугировать, получить плазму й перенести в пробирки гемометра для колориметрии. Плазму в пробирку берут до метки 20. К плазме № 1 доливать дистиллированную воду до тех пор, пока окраска в обеих пробирках станет одинаковой при рассматривании сбоку. Подсчитать деления добавленной воды и разделить их на 20 (число делений взятой плазмы). Полученное число называется конгоротовым индексом.
Расчет: к плазме № 1 для получения одинаковой окраски добавлено 9 делений 9:20=0,45 (конгоротовый индекс).
Опыт 2. Поглощение клетками РМС полуторахлористого железа
Лягушку фиксируют на дощечке брюшком кверху и открывают доступ к сердцу- Вводят уколом шприца в верхушку сердца 1 мл 1 % р-ра полуторахлористого железа. Лягушку оставляют лежать в течение 10—!1б мин , потом ее вскрывают, нарезают ножницами кусочки всех органов и кладут их в чашку с дистиллированной водой для отмывания от крови. Затем кусочки стеклянной палочкой переносят в чашку с 5% р-м соляной кислоты для отмывания, после чего их переносят в чашку с 5% р-м желтой кровяной соли, а потом переносят на чистый лист бумаги. В результате реакции, происходящей между железом, захваченным клетками PlMC и желтой кровяной солью, в кислой среде образуется краска берлинской лазури, придающая органам зеленую окраску. Сильнее всего окрашиваются кусочки органов, содержащих большое количество клеток ретикуло-макрофа-гальной системы. Интенсивность окраски отмечается крестами: сильная окраска — четырьмя, средняя — тремя, слабая — одним.
Иммунопатология
Тема 13. Аллергия и аллергические заболевания
Цель занятия: получить в эксперименте развитие в организме некоторых аллергических реакций на антигенный раздражитель и изучить их основные механизмы,
46
Аллергия — состояние извращенной чувствительности организма к веществам с антигенными свойствами или даже без них. Одной из форм проявления аллергии является анафилаксия. Анафилаксия может быть как общая, так и местная. Общая анафилаксия проявляется в виде анафилактического шока — это тяжелая своеобразная реакция организма в ответ на воздействие чрезмерных раздражителей, которая сопровождается расстройством нервной регуляции, кровообращения, дыхания, обмена веществ, функции желез внутренней секреции.
Существуют две теории, объясняющие патогенез шока: гуморальная и клеточная.
По течению различают три вида шока: острый, подост-рый и хронический.
Сенсибилизировать животных м'ожно различными путями, а именно: введением антигена подкожно, интраперитоне-ально, интравенозно и т. д.
Анафилаксия — состояние повышенной чувствительности организма к повторному парентеральному введению гомологичного антигена.
Сенсибилизация — повышенная чувствительность организма к антигену.
Десенсибилизация — устранение повышенной чувствительности организма к антигену, ранее введенному в организм, особенно белков.
Аллергены — вещества, вызывающие у животных состояние повышенной чувствительности.
Аутоаллергены — аллергены, образовавшиеся в больном организме из его собственных тканей под влиянием различных повреждающих факторов.
Идиосинкразия — врожденная, а иногда приобретенная повышенная чувствительность организма к некоторым веществам.
Опсонины — белки сыворотки крови, облегчающие макрофагам фагоцитоз бактерий.
Сывороточная болезнь — аллергическая реакция организма в ответ на введение, минуя пищеварительный тракт, чужеродного белка (сыворотки).
47
Опыт 1. Реакция сердца сенсибилизированной лягушки
на антиген
Порядок работы. Лягушек предварительно сенсибилизируют лошадиной сывороткой, вводя в лимфатический мешок но 0,3 мл лошадиной сыворотки (трех-, пятикратное введение с 3—4-дневными промежутками). После фиксации сенсибилизированной лягушки на дощечке брюшком кверху обнажают мышцы грудной стенки. С помощью пинцета захватывают и приподнимают мышцы грудной стенки и грудину в области мечевидного хряща. После удаления нижней половины грудины обнажают сердце от перикарда. Серфи-ном (или крючком), соединенным с плечом рычажка для записи, ^захватывают верхушку сердца. Затем наносят на сердце сенсибилизированной лягушки 5—8 капель лошадиной сыворотки. Наблюдают изменение сокращений сердца: непра- вильный ритм сердца. Кратковременное усиление амплитуды сокращений с последующим ослаблением и. временной
остановкой.
Деятельность сердца может постепенно восстановиться после отмывания его физиологическим раствором.
Опыт 2. Анафилактический шок у морской свинки
(демонстрация)
Порядок работы. Предварительно производят сенсибилизацию морской свинки введением ей подкожно 0,1— 0,05—0,2 мл лошадиной сыворотки. На высоте развития сенсибилизации (18—21-й день, не ранее чем через 8— 10 дней) морской свинке вводят 0,5—1,0—1,5—2,0 мл лошадиной сыворотки внутривенно или в сердце. Наблюдают за . развитием анафилактического шока. Делают запись результатов опыта, анализируют, делают выводы.
Опыт 3. Острый анафилактический шок у кролика
Порядок работы. С целью сенсибилизации кролику вводят под кожу 0,2—0,5 мл антигена (лошадиной сыворотки), инъекции повторяют 5—6 раз через 5—16 дней. Разрешающую дозу антигена в количестве 2—3 мл вводят в яремную вену шприцем. Обычно через 1—2 мин у животного
48
наблюдают анафилактический шок в виде некоторого возбуждения и кратковременного повышения кровяного давления. В дальнейшем отмечаются резкая одышка и падение кровяного давления.
Оснащение: морские свинки, лягушки, кролики, сенсибилизированные лошадиной сывороткой, термометр (электрический), шприцы, аппарат для измерения кровяного давления.
Вопросы к теме
1. Определение аллергии, анафилаксии, анафилактического шока и механизм его развития.
Специфическая и неспецифическая десенсибилизация и антианафилаксия.
Клиническая картина острого и подострого анафилак- тического шока.
Теории анафилактического шока: гуморальная и цел- люлярная.