Задача 2.

1. 2. N.meningitidis -возбудитель менингококковой инфекции

Менингококковая инфекция - острая респираторная инфекция, ха­рактеризующаяся широким диапазоном клинических проявлений. Она может протекать в виде острого фарингита, менингита, менингококкового сепсиса и других клинических форм, но чаще всего бессимптомно.

Возбудитель - менингококк - относится к семейству Neisseriaceae, роду Neisseria, виду N.meningitidis. Это грамотрицательные диплокок­ки, имеющие вид кофейных зерен. По антигенным свойствам подраз­деляются на серогруппы и серовары. На основе группоспецифических полисахаридных капсульных антигенов выделяют 13 серогрупп. Наи­более часто вызывают менингококковую инфекцию представители серогрупп А, В, С, X, Y и W-135.

Единственный источник инфекции - это человек, больной или бактерионоситель. Заражение происходит воздушно-капельным путем при тесном общении, что связано с нестойкостью возбудителя во внеш­ней среде и его локализацией на слизистой оболочке задней стене глотки. Чаще всего менингококковой инфекцией болеют дети и люда молодого возраста.

3. Лабораторная диагностика менингококковых инфекций осуществляется бактериоскопическим, бактериологическим, серологическим методами. Применяются и экспресс-методы диагнос­тики.

Материалы для исследования: слизь из носоглотки, спинномоз­говая жидкость (ликвор), кровь. Ликвор получают с помощью спин­номозговой пункции. При менингите ликвор вытекает из иглы струей (а не каплями, как в норме) и обычно бывает мутным. Носоглоточную слизь берут с задней стенки глотки специальным заднеглоточным там­поном на длинной изогнутой проволоке, не касаясь слизистой полос­ти рта, языка и зубов.

Менингококки во взятых материалах быстро погибают, особен­но при охлаждении, поэтому исследуемые материалы хранят до посе­ва не более 2-3 часов при 37°С.

Бактериостпическаму исследованию подвергают ликвор (луч­ше брать осадок после центрифугирования) и секционный материал (оболочки мозга). Из исследуемого материала готовят мазки, окраши­вают метиленовым синим или методом Грама. При положительном результате в поле зрения видны лейкоциты и диплококки в виде "ко­фейных зерен", расположенные как внеклеточно, так и внутри лейко­цитов. По Граму менингококки окрашиваются в розовый цвет, т.к. они грамотрицательны.

Бактериологический метод диагностики является основным. Он заключается в выделении и последующей идентификации возбу­дителя из носоглоточной слизи, ликвора, крови, геморрагических вы­сыпаний. Посевы осуществляют на плотные питательные среды на чашки Петри. Среды готовятся на основе бульона Хоттингера (или другого высококачественного бульона) с добавлением крови, сыворотки крови или асцитической жидкости. В среду добавляют для подавления роста сопутствующей микрофлоры антибиотик ристомицин, к которому менингококки устойчивы.

Исследуемую кровь в объеме 5-10 мл сначала засевают в колбу с 50 мл 0,1% МПА (полужидким) и инкубируют при 37°С 24 часа, затем пересевают на плотную питательную среду.

Далее проводят макро- и микроскопическое исследование вырос­ших колоний и выделяют чистую культуру на скошенном сывороточном или кровяном агаре (параллельно колонии засевают на обычный скошенный агар, на котором менингококки не должны расти).

Идентификация проводится по антигенным свойствам (в реак­ции агглютинации на стекле) для определения серогруппы и биохи­мической активности (N.meningitidis биохимически малоактивна, разлагает с образованием кислоты без газа глюкозу и мальтозу, не фер­ментирует левулезу, сахарозу, лактозу, не образует индол и H₂S).

Серологический метод используют как для выявления менингококкового антигена в исследуемых материалах, так и для обнаруже­ния противоменингококковых антител в сыворотке крови больного. Применяют следующие серологические реакции - РИГА, РСК, ИФА. РЙФ, встречный иммуноэлектрофорез.

Экспресс-диагностику проводят с помощью реакций коагглютинации и латекс-агглютинации. Обе реакции применяют для выявле­ния как N.meningitidis (в том числе и нежизнеспособных), так и их антигенов.

В реакции коагглютинации специфические противоменингококковые антитела сорбированы на клетках стафилококков, содержащих А-белок, который обладает способностью присоединять Fc-фрагмент IgG антител.

В латекс-агглютинации специфические антитела связаны с час­тицами латекса.

И коагглютинацию, и латекс-агглютинацию ставят на предмет­ных стеклах, добавляя исследуемый материал (чаще всего ликвор) к специфическим противоменингококковым антителам, сорбированным, соответственно на стафилококках или латекс-носителях, Видимый результат - агглютинация - наступает через 15-30 минут в виде обра­зования хлопьев.

Латекс-агглютинацию можно ставить и для обнаружения проти­воменингококковых антител в исследуемых сыворотках. В этом слу­чае используется частицы латекса с сорбированным на них менингококковым антигеном.

4. Специфическая профилактика менингококковых инфекций осуществляется инактивированной химической вакциной, содер­жащей высокоочищенные капсульные полисахариды серогрупп А, С, Y, W-135, каждый из которых формирует лишь групповой иммунитет. Для лечения применяют сульфаниламиды и антибиотики. При генерализованных формах менингококковой инфекции эффективной является пенициллинотерапия большими дозами.