лекции по биологии
.pdfТрансляция складывается из трех стадий:
1.Инициация – начало синтеза полипептида.
2.Элонгация – удлинение полипептида.
3.Терминация – окончание синтеза полипептида.
На этапе инициации меньшая субъединица рибосомы узнает стартовый кодон АУГ м-РНК и прикрепляется к ней. АУГ занимает первую позицию. После этого присоединяется большая субъединица рибосомы и в ней начинается собственно синтез белка. К большой субъединице подходит т-РНК с аминокислотой.
В молекуле т-РНК одна ее часть присоединяет аминокислоту, а другая – антикодон, спаривается с колоном м-РНК, определяющим эту аминокислоту.
В большой субъединице есть: 1 – аминоацильный участок 2 – пептидильный участок
В т-РНК, антикодон которой комплементарен кодону АУГ м-РНК приносит аминокислоту метианин и останавливается в аминоацильном участке.
Стадия инициации контролируется факторами инициации. У прокариот их 3, у эукариот
6-7.
Вторая стадия – элонгации начинается с перемещения т-РНК с метианином в пептидильный участок, а на ее место приходит другая т -РНК с новой аминокислотой. Между двумя аминокислотами образуется пептидная связь. Тем временем рибосома продвигается вдоль м-РНК, на рибосоме оказывается новый кодон, к которому вскоре присоединяется своим антикодоном соответствующая т-РНК.
Все это повторяется многократно, до тех пор, пока рибосома не дойдет до одного из терминальных кодонов (УАА, УАГ, УГА).
Этим кодонам нет антикодона, нет аминокислоты. Наступает фаза терминации. К одной молекуле м-РНК прикрепляется обычно много рибосом и образуются полисомы.
60
В процессе трансляции наряду с факторами инициации и элонгации важное значение имеет фермент, связывающий т-РНК с аминоацильным участком – аминоацил т-РНКаза.
Регуляция экспрессии генов у про- и эукариот
Упрокариот она осуществляется на уровне промотора, оператора
итрансляции.
Уэукариот регуляция происходит на всех этапах экспрессии: транскрипции, процессинга и трансляции.
Подробнее остановимся на регуляции экспрессии генов у бактерий.
Регуляция экспрессии генов у прокариот
Схема регуляции транскрипции структурных генов прокариотической клетки по типу репрессии
Схема регуляции транскрипции структурных генов прокариотической клетки по типу индукции
В 1961 году Жакоб и Моно установили, что у бактерий под контролем генарегулятора синтезируется белок-репрессор, который регулирует активность других ге-
61
нов. Белок-репрессор связывается с геном-оператором и блокирует его, вследствие чего транскрипция (считывание информации) становится невозможной и клетка не может синтезировать соответствующие белки. Но если в клетку проникает какой-либо субстрат, для расщепления которого необходимо синтезировать ферменты, то происходит следующее: субстрат присоединяется к репрессору и лишает его способности блокировать ген-оператор.
К ДНК присоединяются РНК-синтезирующие ферменты и начинается транскрипция генов. Синтез белка-фермента прекращается, если субстрат полностью расщепляется, белок-репрессор освобождается и снова блокирует гены-операторы. Это пример регуляции по типу индукции. Также существует регуляция по типу репрессии: когда конечные продукты биохимической реакции, соединяясь с неактивным белком-репрессором, образуют комплекс, блокирующий работу гена-оператора.
Антитерминация – заключается в том, что происходит игнорирование терминальных кодонов, процесс экспрессии продолжается.
Регуляция у эукариот
1)Регуляция генной активности у эукариот намного сложнее, чем у бактерий. У эукариот она происходит не только на уровне клетки. Существуют системы регуляции организма как целого. Огромную роль в регуляции играют гормоны, но регулируют они процессы синтеза белков лишь в клетках-мишенях. Гормоны связываются с белкамирецепторами, расположенными в мембранах таких клеток и включают системы изменения структуры клеточных белков. Те, в свою очередь, могут влиять как на процессы транскрипции, так и процессы трансляции. Каждый гормон через систему посредников активирует свою группу генов. Так адреналин включает синтез ферментов, расщепляющих гликоген мышц до глюкозы, а инсулин влияет на образование гликогена из глюкозы в печени.
2)На стадии транскрипции белки-гистоны участвуют в процессах регуляции генной активности у эукариот. Непременное условие – это деконденсация участка, где происходит транскрипция.
3)Регуляция на уровне трансляции направлена на сохранение стабильности м-РНК, а эффективность трансляции осуществляется с помощью факторов инициации, элонгации, терминации.
62
Лекция 12.
Изменчивость
План
1.Определение и формы изменчивости: модификационная, комбинативная, мутационная.
2.Мутагенные факторы.
3.Классификация мутаций.
4.Устойчивость и способы репарации генетического материала.
5.Закон гомологических рядов наследственной изменчивости Н.И.Вавилова.
Определение и формы изменчивости
Генетика изучает два основных свойства живых существ - наследственность и изменчивость.
Изменчивость - свойство организмов приобретать новые признаки и особенности индивидуального развития под влиянием факторов среды.
Изменчивость - один из важнейших факторов эволюции, обеспечивающих все многообразие живой природы.
Различают два вида изменчивости:
1. Фенотипическую (ненаследственную, модификационную);
2.Генотипическую (наследственную): а) комбинативную; б) мутационную.
Модификационная изменчивость – форма изменчивости, не связанная с изменением генотипа и вызванная влиянием факторов среды.
Модификационная изменчивость имеет особенности:
- не затрагивает наследственную основу организма и поэтому модификации не передаются по наследству, то есть от родителей к потомству, - изменения направлены, происходят закономерно, их можно предсказать, - имеют адаптивное (приспособительное) значение, - имеют массовый (групповой) и обратимый характер,
- определенный фактор внешней среды вызывает сходное изменение у всех особей данного вида.
Модификационная изменчивость имеет предел. Границы изменчивости признака, обусловленные генотипом называются нормой реакции. Она может быть узкой, когда признак изменяется незначительно (цвет глаз), и широкой, когда признак изменяется в широких пределах (рост, масса тела).
В медицине часто приходится устанавливать норму реакции для оценки max и min количественных показателей (уровень гормонов, ферментов, гемоглобина и др.)
Комбинативная изменчивость – это наследственная изменчивость, обусловленная перекомбинацией имеющихся генов и хромосом, без изменения структуры генов и хромосом (наследственного материала). Этот тип изменчивости проявляется уже на стадии образования половых клеток.
Источниками комбинативной изменчивости являются процессы, происходящие в мейозе и в результате оплодотворения:
1.Рекомбинация генов при кроссинговере в профазе1 мейоза.
2.Рекомбинация хромосом в ходе мейоза (независимое расхождение хромосом и хроматид при мейозе)
3.Комбинация хромосом в результате слияния гамет при оплодотворении (случайное сочетание гамет при оплодотворении).
63
Комбинативная изменчивость обеспечивает генотипическое разнообразие людей, объясняет наличие признаков у детей и внуков от родственников по отцовской и материнской линии.
Мутационная изменчивость – способность генетического (наследственного) материала изменяться и эти изменения наследуются в потомстве.
В основе мутационной изменчивости лежат мутации.
Мутации – это внезапные изменения генетического материала под влиянием среды и передающиеся по наследству.
Частота мутаций зависит от вида организма, от возраста, от фазы онтогенеза, стадии гаметогенеза, может происходить в половых и соматических клетках, иметь рецессивный и доминантный характер. Например, у человека до 6% гамет несут мутантные гены.
Процесс образования мутаций называется мутагенезом. Факторы, вызывающие мутации называются мутагенными.
Мутации первоначально действуют на генетический материал особи, а через генотип изменяется и фенотип.
Мутагенные факторы
Факторы, вызывающие мутации называются мутагенными факторами (мутагенами) и подразделяются на:
1.Физические;
2.Химические;
3.Биологические.
Кфизическим мутагенным факторам относятся различные виды излучений, температура, влажность и др. Наиболее сильное мутагенное действие оказывает ионизирующее излучение – рентгеновские лучи, α-, β-, γ- лучи. Они обладают большой проникающей способностью.
При действии их на организм они вызывают:
а) ионизацию тканей – образование свободных радикалов (ОН) или (Н) из воды, находящейся в тканях. Эти ионы вступают в химическое взаимодействие с ДНК, расщепляют нуклеиновую кислоту и другие органические вещества; б) ультрафиолетовое излучение характеризуется меньшей энергией, проникает только
через поверхностные слои кожи и не вызывает ионизацию тканей, но приводит к образованию димеров (химические связи между двумя пиримидиновыми основаниями одной цепочки, чаще Т-Т). Присутствие димеров в ДНК приводит к ошибкам при ее репликации, нарушает считывание генетической информации; в) разрыв нитей веретена деления;
г) нарушение структуры генов и хромосом, т.е. образование генных и хромосомных мутаций.
Кхимическим мутагенам относятся:
-природные органические и неорганические вещества (нитриты, нитраты, алкалоиды, гормоны, ферменты и др.);
-синтетические вещества, ранее не встречавшиеся в природе (пестициды, инсектициды, пищевые консерванты, лекарственные вещества).
-продукты промышленной переработки природных соединений – угля, нефти. Механизмы их действия:
а) дезаминирование – отщепление аминогруппы от молекулы аминокислот; б) подавление синтеза нуклеиновых кислот; в) замена азотистых оснований их аналогами.
64
Химические мутагены вызывают преимущественно генные мутации и действуют в период репликации ДНК.
Кбиологическим мутагенам относятся:
-Вирусы (гриппа, краснухи, кори)
-Невирусные паразитические организмы (грибы, бактерии, простейшие, гельминты)
Механизмы их действия:
а) вирусы встраивают свою ДНК в ДНК клеток хозяина.
б) продукты жизнедеятельности паразитов-возбудителей болезней действуют как химические мутагены.
Биологические мутагены вызывают генные и хромосомные мутации.
Классификация мутаций
Различают следующие основные типы мутаций:
1. По способу возникновения их подразделяют на спонтанные и индуцированные. Спонтанные – происходят под действием естественных мутагенных факторов внешней среды без вмешательства человека. Они возникают в условиях естественного радиоактивного фона Земли в виде космического излучения, радиоактивных элементов на поверхности земли.
Индуцированные мутации вызываются искусственно воздействием определенных мутагенных факторов.
2. По мутировавшим клеткам мутации подразделяются на генеративные и соматические.
Генеративные – происходят в половых клетках, передаются по наследству при половом размножении.
Соматические – происходят в соматических клетках и передаются только тем клеткам, которые возникают из этой соматической клетки. Они не передаются по наследству.
3. По влиянию на организм:
Отрицательные мутации – летальные (несовместимые с жизнью); полулетальные (снижающие жизнеспособность организма); нейтральные (не влияющие на процессы жизнедеятельности); положительные (повышающие жизнеспособность). Положительные мутации возникают редко, но имеют большое значение для прогрессивной эволюции.
4. По изменениям генетического материала мутации подразделяются на геномные, хромосомные и генные.
Геномные мутации – это мутации, вызванные изменением числа хромосом. Могут появляться лишние гомологичные хромосомы. В хромосомном наборе на месте двух гомологичных хромосом оказываются три – это трисомия. В случае моносомии наблюдается утрата одной хромосомы из пары. При полиплоидии происходит кратное гаплоидному увеличение числа хромосом. Еще один вариант геномной мутации – гаплоидия, при которой остается только одна хромосома из каждой пары.
Хромосомные мутации связаны с нарушением структуры хромосом. К таким мутациям относятся утраты участков хромосом (делеции), добавление участков (дупликация) и поворот участка хромосом на 180° (инверсия).
Генные мутации, при которых изменения происходят на уровне отдельных генов, т.е. участков молекулы ДНК. Это может быть утрата нуклеотидов, замена одного основания на другое, перестановка нуклеотидов или добавление новых.
Устойчивость и репарация генетического материала
Устойчивость к изменениям генетического материала обеспечивается:
65
1.Диплоидным набором хромосом.
2.Двойной спиралью ДНК.
3.Вырожденностью (избыточностью) генетического кода
4.Повтором некоторых генов.
5.Репарацией нарушений структуры ДНК
Наличие механизмов репарации – обязательное условие существования биологических существ.
Репарация генетического материала – это процесс, обеспечивающий восстановление поврежденной структуры молекулы ДНК.
В ДНК клетки ежедневно происходит множество случайных изменений.
Большинство эффективно исправляются (репарируются) с помощью специальных ферментных систем.
Впервые репарация молекулы ДНК была установлена в 1948 году. А в 1962 году был описан один из способов репарации – световая репарация или фотореактивация.
Было установлено, что при ультрафиолетовом облучении вирусов-фагов, бактерий и простейших наблюдается резкое снижение их жизнедеятельности, даже гибель.
Если воздействовать на них видимым светом, то выживаемость их значительно увеличивается.
Оказалось, что под действием ультрафиолета в молекуле ДНК образуются димеры (химические связи между двумя основаниями одной цепочки, чаще Т-Т), образование димеров препятствует считыванию информации.
Видимый свет активирует ферменты, разрушающие димеры.
Второй способ репарации – темновая репарация, была изучена в 50-е годы ХХ века. Темновая репарация протекает в четыре стадии с участием четырех групп ферментов. Ферменты образовались в ходе эволюции и направлены на поддержание стабильности генетической информации клетки.
1.Фермент эндонуклеаза находит поврежденный участок и рядом с ним разрывает нить ДНК.
2.Фермент эктонуклеаза «вырезает» (удаляет) поврежденный участок.
3.ДНК-полимераза по принципу комплементарности синтезирует фрагмент ДНК на месте разрушенного.
4.Лигаза «сшивает» синтезированный фрагмент с основной нитью ДНК.
Доказана возможность репарации ДНК при повреждении обеих ее нитей. При этом информация может быть получена с и-РНК (фермент ревертаза).
Закон гомологических рядов наследственной изменчивости Н.И.Вавилова
Известно, что мутирование происходит в различных направлениях. Однако, это многообразие подчиняется определенной закономерности, обнаруженной в 1920 году Н.И.Вавиловым. Он сформулировал закон гомологических рядов наследственной из-
менчивости: «Виды и роды, генетически близкие, характеризуются сходными рядами наследственной изменчивости с такой правильностью, что зная ряд форм в пределах одного вида, можно предвидеть существование параллельных форм у других видов и родов».
Можно сказать, что у родственных видов, имеющих общее происхождение возникают сходные мутации.
Одни и те же болезни встречаются у животных и у человека. Так, например, альбинизм наблюдается во всех классах позвоночных животных и человека. Брахидактилия (короткопалость) отмечена у крыс, овец, собак, человека. Мышечная дистрофия – у мышей, крыс, лошадей, человека.
66
Закон гомологических рядов позволяет предвидеть возможность появления мутаций, которые могут быть использованы в селекции для создания новых ценных для хозяйства форм.
Лекция 13
Методы изучения генетики человека
План
1.Генеалогический метод.
2.Близнецовый метод.
3.Метод дерматоглифики.
4.Цитогенетический метод.
5.Метод гибридизации соматических клеток.
6.Онтогенетический метод.
7.Популяционно-статистический метод.
8.Метод моделирования.
9.Иммунологический метод.
10.Биохимический метод.
Генеалогический метод
Типы наследования и формы проявления генетических задатков у человека весьма многообразны и для дифференциации между ними требуются специальные методы анализа, в первую очередь – генеалогический, предложенный Ф.Гальтоном.
Генеалогический метод или изучение родословных предусматривает прослеживание признака в семье или роду с указанием типа родственных связей между членами родословной. В медицинской генетике этот метод обычно называют клиникогенеалогическим, поскольку речь идет о наблюдении патологических признаков с помощью приѐмов клинического обследования. Генеалогический метод относится к наиболее универсальным методам в генетике человека. Он широко применяется при решении теоретических и практических проблем:
67
1)для установления наследственного характера признака,
2)при определении типа наследования и пенетрантности генотипа,
3)выявление сцепления генов и картирование хромосом,
4)при изучении интенсивности мутационного процесса,
5)при расшифровке механизмов взаимодействия генов,
6)при медико-генетическом консультировании.
Суть генеалогического метода сводится к выяснению родственных связей и просле-
живанию признака среди близких и дальних прямых и непрямых родственников. Технически он складывается из двух этапов: составления родословных и генеалогического анализа.
Составление родословной
Сбор сведений о семье начинается с пробанда, которым называется лицо, первым попавшее в поле зрения исследователя.
Дети одной родительской пары (родные братья и сестры) называются сибсами. Семьей в узком смысле, или ядерной семьей, называют родительскую пару и их детей. Более широкий круг кровных родственников лучше обозначать термином «род». Чем больше поколений вовлекается в родословную, тем она обширнее. Это влечѐт за собой неточность полученных сведений и, следовательно, неточность родословной в целом. Часто люди не знают даже числа своих двоюродных братьев и сестер, не говоря уже о какихто признаках у них и их детей.
Для наглядности готовят графическое изображение родословной. Для этого обычно пользуются стандартными символами. Если рассматриваемых признаков в родословной много, то можно прибегать к буквенным или штриховым различиям внутри символов. Схема родословной обязательно сопровождается описанием обозначений под рисунком – легендой, что исключает возможность неправильных истолкований.
Генеалогический анализ
Целью генеалогического анализа является установление генетических закономерностей.
1 этап – установление наследственного характера признака. Если в родословной встречается один и тот же признак несколько раз, то можно думать о наследственной его природе. Однако надо прежде всего исключить возможность экзогенного накопления случаев в семье или роду. Например, если один и тот же патогенный фактор действовал на женщину во время всех беременностей, то у нее могут родиться несколько детей с одинаковыми аномалиями. Или же какой-то фактор действовал на многих членов семьи, необходимо сличить действие сходных внешних факторов. С помощью генеалогического метода были описаны все наследственные болезни.
2 этап – установление типа наследования и пенетрантности гена. Для этого используют принципы как генетического анализа, так и статистические методы обработки данных из родословной.
3 этап – определение групп сцепления и картирования хромосом, до недавнего времени основывающегося только на генеалогическом методе. Выясняют сцепленные признаки
ипроцесс кроссинговера. Этому способствуют разработанные математические методы. 4 этап – изучение мутационного процесса. Он применяется в трех направлениях: при изучении механизмов возникновения мутаций, интенсивности мутационного процесса
ифакторов, вызывающих мутации. Особенно широко генеалогический метод применяется при изучении спонтанных мутаций, когда надо различать «спорадически» возникшие случаи от «семейных».
5 этап – анализ взаимодействия генов в клинической генетике был сделан С.Н.Давиденковым (1934, 1947) по анализу полиморфизма заболеваний нервной системы.
68
6 этап – в медико-генетическом консультировании для составления прогноза без генеалогического метода обойтись нельзя. Выясняют гомоили гетерозиготность родителей и рассматривают вероятность рождения детей с теми или иными признаками.
Близнецовый метод исследования
Исследование близнецов – один из основных методов генетики человека. Существуют однояйцевые близнецы, возникающие из одной яйцеклетки, оплодотворенной одним сперматозоидом. Возникают они из-за разделения зиготы на два генетически идентичных друг другу и всегда однополых зародыша.
Разнояйцовые близнецы развиваются из разных яйцеклеток, оплодотворенных разными сперматозоидами. Генетически они различаются как братья и сестры одних родителей.
При помощи близнецового метода можно изучить:
1)Роль наследственности и среды в формировании физиологических и патологических особенностей организма. В частности, изучение наследственной передачи людьми некоторых болезней. Изучение экспрессивности и пенетрантности генов, вызывающих наследственные заболевания.
2)Конкретные факторы, усиливающие или ослабляющие влияние внешней среды.
3)Корреляцию признаков и функций.
Особенно важна роль близнецового метода в изучении проблемы «генотип и среда».
Сравнивают обычно три группы близнецов: ДБ в одинаковых условиях, ОБ в одинаковых условиях, ОБ в разных условиях.
При изучении близнецов определяют частоту, степень совпадения (конкордантности) тех или иных признаков.
При изучении роли наследственности в происхождении того или иного признака производят расчет по формуле К.Хольцингера.
Коэффициент наследуемости - Н Н= % сходства ОБ - % сходства РБ
100 - % сходства РБ При Н=1 вся изменчивость в популяции обусловлена наследственностью.
При Н=0 вся изменчивость вызвана средовыми факторами. Влияние среды С выражается формулой: С=100% - Н, где Н – коэффициент наследуемости. Например, конкордантность монозиготных (однояйцевых) близнецов 3%. Тогда Н =
67 |
– 3 |
= 64 = 0,7 или 70 %. С = 100 – 70 = 30 % |
||
100 |
– 3 |
|
97 |
|
Итак, данный признак на 70% обусловлен наследственностью, а на 30% - влиянием факторов внешней среды.
Другой пример. Группы крови по системе АВО у ОБ =100%, т.е. полностью зависит от наследственности.
Частота совпадения групп крови и некоторых заболеваний у близнецов (в %)
№ п/п |
Признаки или болезни |
ОБ |
РБ |
1 |
группы крови АВО |
100 |
64 |
2 |
корь |
98 |
94 |
3 |
коклюш |
97 |
93 |
4 |
шизофрения |
86 |
14 |
69