Ход работы:

Берут 5 пробирок. В пробирку № 1 налить 5 мл физиологического раствора, в пробирку № 2 - 5 мл дистиллированной воды, в № 3 - 3 мл физиологического раствора и 2 мл хлороформа и в № 4 - 3 мл физиологического раствора и 2 мл нашатырного спирта, в № 5 - 3 мл физиологического раствора и 2 мл эфира. Во все пробирки внести по 5 капель дефибринированной крови, содержимое пробирок тщательно перемешать и поставить в штатив на 30 минут.

Отметить, где произошел гемолиз, объясните механизм гемолиза в каждом отдельном случае.

Результат:

Вывод:

Работа № 2.Определение границ осмотической резистентности эритроцитов.

Если поместить кровь человека или теплокровных животных в изотонический раствор поваренной соли (0,9%), то при концентрации между эритроцитами и солевым раствором устанавливается динамическое равновесие, при котором количество воды, поступающее в эритроциты из раствора и выходящее в раствор, будет одинаковым. В этих случаях форма и объем эритроцита не изменяется. В растворах более высокой концентрации (гипертонические растворы) эритроциты сморщиваются и уменьшаются в объеме вследствие того, что отдают воду в раствор больше, чем получают. Наоборот, в более слабых растворах (гипотонические) эритроциты увеличиваются в объеме, набухают и, наконец, разрушаются, гемоглобин выходит в окружающий раствор, наступает гемолиз. Следовательно, объем и нормальная функция эритроцитов определяется средой, в которой они находятся.

Осмотическая стойкость эритроцитов определяется такой концентрацией солевого раствора, при которой они не подвергаются гемолизу. Эритроциты одной и той же крови обладают неодинаковой осмотической стойкостью по отношению к гипотоническим растворам. Различают минимальную и максимальную осмотическую устойчивость эритроцитов.

Минимальная резистентность эритроцитов соответствует концентрации хлорида натрия (0,7…0,5%), обуславливающей частичный гемолиз эритроцитов, в пробирках жидкость слабо окрашена, на дне пробирок имеется осадок эритроцитов.

Максимальная резистентность эритроцитов соответствует концентрации хлорида натрия (0,4…0,2%), обуславливающей полный гемолиз, в пробирках жидкость прозрачна, окрашивается в ярко красный цвет, осадок эритроцитов отсутствует.

ЦЕЛЬ РАБОТЫ: Определить границу резистентности.

Оборудование: 1% раствор поваренной соли, 9 пробирок, дистиллированная вода, пипетки.

Объект исследования: кровь (дефибринированная) козы или другого животного.

Ход работы:

В штатив берут 9 пробирок и в каждую из них наливают поваренной соли, в убывающей концентрации, согласно схеме.

Содержимое пробирок	Номера пробирок
	1	2	3	4	5	6	7	8	9
1% р-р NaСl, мл	9	8	7	6	5	4	3	2	1
Дистилированая вода, мл	1	2	3	4	5	6	7	8	9
Всего, мл	10	10	10	10	10	10	10	10	10
Концентрация NaCl, %	0,9	0,8	0,7	0,6	0,5	0,4	0,3	0,2	0,1

В каждую пробирку внести по 5 капель дефибринированной крови и, зажав пробирку пальцем, перемешать содержимое и оставить на час. Затем отмечают где минимальная и максимальная резистентность.

Результат:

Вывод:

Занятие № 5.

Тема: Лейкоциты. Свойства и функциональные особенности различных форм лейкоцитов. Методы исследования белой крови.

Лейкоциты обеспечивают иммунитет - защиту организма от любых чужеродных агентов. Увеличение количества лейкоцитов - лейкоцитоз, уменьшение - лейкопения. Процентное соотношение различных форм лейкоцитов называют лейкоцитарной формулой. Анализ лейкоцитарной формулы имеет большое диагностическое и прогностическое значение при оценке функциональной особенности кроветворных органов. Она имеет видовые отличия и характерно изменяется при заболеваниях, поэтому ее изучению придается большое значение в клинике.

При микроскопе окрашенного мазка крови можно обнаружить, что лейкоциты имеют неодинаковые размеры, различную форму ядра, неодинаковую протоплазму. Клетки, содержащие в протоплазме зернистость, относятся к группе гранулоцитов; не содержащие зернистости - к группе агранулоцитов.

Зернистые лейкоциты развиваются (как и эритроциты) в красном костном мозге эпифизов трубчатых костей из особых клеток - гематоцитобластов. Более “молодые” зернистые лейкоциты имеют компактное, несколько вытянутое ядро и называются палочкоядерными; более “зрелых” клеток - сегментированных - ядро расщеплено на несколько соединенных между собой частей.

Зерна в протоплазме красятся основными или кислыми красителями. К зернистым лейкоцитам относятся нейтрофилы, эозинофилы и базофилы.

Незернистые лейкоциты развиваются в ретикулоэдотелиальной ткани лимфатических узлов и селезенки. Сюда относятся лимфоциты - небольшие клетки, почти весь объем, которых, занят плотным синим ядром, окаймленным голубым ободком протоплазмы: моноциты - крупные клетки с бобовидным рыхлым ядром голубовато - серой вуалеобразной протоплазмой.

Существенным показателем физиологического состояния (в частности, реактивности) организма животного служит кроветворная система, чутко реагирующая на воздействие самых разнообразных факторов.

В крови сельскохозяйственных животных и птиц в наибольшем количестве содержатся лимфоциты и нейтрофилы. Изменение лейкоцитарной формулы может быть в сторону, как увеличения, так и в сторону уменьшения тех или иных форм лейкоцитов.

Таблица 1 Лейкограмма животных^*1

Вид животного	Лейкограмма, %
	Б^*2	Э	Ю	П	С	Л	М
Лошадь Крупный рогатый скот Овца Свинья Курица Кролик	0,6 0,7 0,6 1,4 4,0 6,0	4,0 7,0 4,5 4,0 4,0 4,0	- - - - - -	4,0 6,0 1,2 3,0 1,0 -	48,4 25,0 33,0 40,0 26,0 30,0	40,0 54,3 57,7 48,6 59,0 50,0	3,0 7,0 3,0 3,0 6,0 4,0

Примечание: 1) Практикум по физиологии сельскохозяйственных животных: Учеб. пособие / П.Н. Котуранов, В.К. Гусаков, Ю.И. Никитин и др.; Под ред. П.Н. Котуранова. -– Мн.: Ураджай, 2000.

2) Б – базофилы, Э – эозинофилы, Ю - юные нейтрофилы, П – палочкоядерные нейтрофилы, С – сегментоядерные нейтрофилы, Л – лимфоциты, М- моноциты.

Лейкограмма может быть двух типов: нейтрофильная и лимфоцитарная. Нейтрофильная формула, или нейтрофильный характер крови, характерна для лошадей, собак и многих других видов животных с однокамерным желудком: содержание нейтрофилов от 50 до 70%. У жвачных животных в крови преобладают лимфоциты (от 50 до 70%), и такой тип лейкограммы называется лимфоцитарным. У свиней примерно равное количество нейтрофилов и лимфоцитов, их лейкограмма имеет переходный тип.

Цель занятия:

1. Сформировать понятие системы лейкона, ее роли в поддержании гомеостаза.

2. Выяснить изменения в системе лейкона при различных физиологических состояниях.

3. Познакомиться с методами лабораторного исследования лейкоцитов.

Домашнее задание:

1. Написать лейкоцитарную формулу.

2. Перечислить функции лейкоцитов.

3. Нарисовать схему нейрогуморальной регуляции лейкопоэза.

Вопросы для подготовки к занятию:

1. Лейкоциты и их физиологическое значение?

2. Морфологическая и функциональная характеристика различных форм лейкоцитов.

3. Понятие о лейкоцитозе, лейкопении, индекс сдвига.

4. Что такое лейкоцитарная формула и с какой целью она выводится?

Работа № 1. Анализ лейкоцитарной формулы.

Оборудование: микроскоп, иммерсионное масло.

Объект исследования: мазки крови окрашенные по Гимза –

Романовскому.