- •Работа № 6. Биохимическая активность аэробов (дифференциально-диагностические признаки)
- •Основные принципы выделения и идентификации чистых культур бактерий
- •Питательные среды (состав некоторых питательных сред)
- •Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
- •12 3 1 2
- •Методы, основанные на биологических свойствах микроорганизмов
- •Биохимическая активность аэробов
- •1) Что изображено на схеме?
- •2) Что изображено на фотографии?
- •1) Куриный эмбрион
- •2) Культура тканей
- •3) Лабораторные животные
- •Физические методы. Методы основаны на выращивании микроорганизмов в среде без воздуха
- •3) Биологические методы основаны на совместном выращивании анаэробов со строгими аэробами
Техника посева на жидкие и плотные питательные среды
Методы, основанные на механическом разобщении микробов
Метод Дригальского
Берут 3 чашки Петри с МПА, стерильной пипеткой материал помещают на поверхность МПА в чашку № 1
посев шпателем (газоном) посев петлей (штрихом)
Стерильным шпателем материал Чашку Петри с МПА делят на
Тщательно распределяют по 4 сектора. Исследуемый мате-
поверхности агара. Затем, не беря риал стерильной петлей вносят
нового материала и, не обжигая в 1 сектор и делают штрихи,
шпателя, делают посев на 2 и 3 затем такие же линии проводят
чашку МПА. и на других секторах.
На последних секторах вырастают
отдельные колонии.
12 3 1 2
изолированные колонии 4 3
4 сектор - изолированные колонии
Снижение концентрации микробов
Колония – видимое невооруженным взглядом скопление микробов на плотной питательной среде, выросшее из одной клетки.
Колония - это потомство микробов, выросших из одной клетки. Т.к. все микробы в колонии выросли из одной клетки, они относятся к одному виду, т.е. в каждой изолированной колонии (отдельно стоящей, не сливающейся с другими колониями) содержится чистая культура.
Метод фильтрации основан на пропускании исследуемого материала через специальные фильтры с определенным диаметром пор и разделение содержащихся микроорганизмов по величине.
Этот метод применяется для очистки вирусов от бактерий, а также при получении фагов и токсинов (в фильтрате - чистый фаг, очищенный токсин).
Методы, основанные на биологических свойствах микроорганизмов
Метод Шукевича
Техника посева. Исследуемый материал засевают в конденсационную воду скошенного агара. При размножении подвижные формы микробов из конденсационной воды дают «ползущий» рост по скошенному агару. Для получения чистой культуры ее отсевают с верхнего края посева.
Метод прогревания. Позволяет отделить спорообразующие бациллы от не споровых форм. Прогревают исследуемый материал на водяной бане при 80°С 10-15 мин. Вегетативные формы погибают, а споры сохраняются и при посеве на соответствующую питательную среду прорастают.
Бактериостатический метод (метод ингибирования). Основан на избирательном действии некоторых химических веществ и антибиотиков на микроорганизмы. Например, антибиотики позволяют очистить исследуемый вируссодержащий материал от сопутствующей бактериальной флоры. Серная кислота (5% р-р) быстро убивает большинство бактерий, а туберкулезная палочка выживает в этих условиях.
Метод заражения лабораторных животных или растений. Применяют в целях выделения и идентификации патогенных микроорганизмов и отделения их от сапрофитной флоры. Для заражения подбирают наиболее восприимчивые к предполагаемому возбудителю инфекции виды животных или сорта растений.
После появления у зараженных организмов признаков болезни их убивают и производят посев органов и тканей на питательные среды. При выделении в изучении облигатных паразитов этот метод является основным и единственным
Работа № 5