- •Министерство здравоохранения рф
- •Список сокращений
- •Частная микробиология
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Ознакомление с правилами взятия материала для микробиологического исследования
- •Методы диагностических микробиологических исследований Методы обнаружения возбудителя инфекции в материале от больного
- •Иммунохимические методы диагностики возбудителя или его антигенов в материале от больного
- •Биохимические и молекулярно-биологические методы диагностики
- •Серодиагностика и аллергодиагностика
- •Оценка результатов клинико-диагностических микробиологических исследований
- •Микробиологическая диагностика стафилококковых инфекций
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций.
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых гноеродными условно-патогенными грамотрицательными аэробными микроорганизмами.
- •Самостоятельная работа студентов
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 2. Возбудители раневой анаэробной инфекции: анаэробной газовой инфекции, столбняка. Бактероиды.
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Микробиологическая диагностика анаэробной инфекции.
- •Самостоятельная работа студентов.
- •Микробиологическая диагностика столбняка.
- •Самостоятельная работа студентов.
- •4. Ознакомление с биопрепаратами, применяемыми для специфической профилактики и терапии столбняка:
- •Микробиологическая диагностика неклостридиальной анаэробной инфекции
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 3. Возбудители бактериальных зоонозных инфекций: чумы, туляремии, сибирской язвы
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Микробиологическая диагностика чумы.
- •Микроскопический метод
- •Бактериологический метод.
- •Биопроба
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика туляремии
- •Биологический и бактериологический метод.
- •Биопроба
- •Самостоятельная работа студентов
- •2. Серологический метод диагностики туляремии.
- •Микробиологическая диагностика сибирской язвы
- •Бактериологический метод.
- •Микроскопический метод.
- •Биопроба
- •Самостоятельная работа студентов
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 4.Возбудители бактериальных зоонозных инфекций: бруцеллеза, лептоспироза, боррелиозов, листериоза
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Микробиологическая диагностика бруцеллеза
- •Бактериологический метод.
- •Биопроба
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика лептоспироза
- •Микроскопический метод.
- •Бактериологический метод.
- •Биопроба
- •Самостоятельная работа студентов
- •4. Знакомоство с биопрепаратами для профилактики и лечения лептоспироза.
- •Микробиологическая диагностика боррелиозов (возвратные тифы, болезнь Лайма)
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика листериоза
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 5. Микробиология бактериальных кишечных инфекций: сальмонеллы - возбудители брюшного тифа, паратифов и пищевых токсикоинфекций
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов Ознакомиться со схемой лабораторной диагностики брюшного тифа и паратифов
- •Серологический метод
- •Самостоятельная работа студентов
- •1. Бактериологический метод – выделение гемокультуры:
- •2. Серологический метод диагностики тифо-паратифозных заболеваний.
- •Педиатрические аспекты темы
- •Микробиологическая диагностика сальмонеллезов
- •Серологический метод
- •Самостоятельная работа студентов
- •1. Учет посевов сальмонелл на среде Левина и Олькеницкого (демонстрация).
- •3. Идентификация выделенной культуры возбудителя:
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 6. Микробиология бактериальных кишечных инфекций: патогенные кишечные палочки, иерсинии, кампилобактерии, хеликобактерии
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Микробиологическая диагностика эшерихиозов
- •Серологический метод - ра, рнга, ифа с целью выявления антител к эшерихиям и их динамики (исследование парных сывороток) в процессе инфекции.
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика иерсиниозов
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика кампилобактериозов
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика геликобактериоза
- •Самостоятельная работа студентов
- •Тема 7. Микробиология бактериальных кишечных инфекций: возбудители дизентерии, холеры. Пищевые интоксикации бактериальной природы
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Лабораторная диагностика бактериальной дизентерии.
- •Серологический метод. Постановка ра, рнга с целью выявления антител к шигеллам и их динамики (исследование парных сывороток) в процессе инфекции.
- •Самостоятельная работа студентов
- •3. Идентификация выделенной культуры шигелл:
- •Микробиологическая диагностика холеры
- •Серологический метод: Постановка ра, рнга, теста иммобилизации вибрионов с целью выявления антител к холерному вибриону и их динамики (исследование парных сывороток) в процессе инфекции.
- •Самостоятельная работа студентов
- •Пищевые интоксикации бактериальной природы Лабораторная диагностика ботулизма
- •Самостоятельная работа студентов
- •Лабораторная диагностика пищевых интоксикаций стафилококковой этиологии
- •Пищевые интоксикации бактериальной этиологии способны также вызывать:
- •Педиатрические аспекты темы.
- •Тема 8. Возбудители бактериальных воздушно-капельных инфекций: дифтерии, коклюша, гемофильной и пневмококковой инфекции
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Лабораторная диагностика дифтерии
- •Серологический метод
- •Самостоятельная работа студентов
- •4. Биопрепараты для диагностики, профилактики и лечения дифтерии.
- •Микробиологическая диагностика коклюша и паракоклюша
- •Серологический метод - ра и рск с парными сыворотками больных для констатации нарастания титра антител с целью ретроспективного подтверждения коклюша и диагностики его атипичных форм.
- •Самостоятельная работа студентов
- •4. Биопрепараты для диагностики, профилактики и лечения коклюша:
- •Педиатрические аспекты темы
- •Микробиологическая диагностика гемофильной инфекции
- •Микробиологическая диагностика бактериальных пневмоний и острых респираторных заболеваний (орз)
- •Самостоятельная работа студентов
- •Тема 9. Возбудители бактериальных воздушно-капельных бактериальных инфекций: туберкулеза, менингококовой инфекции и актиномикоза
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Лабораторная диагностика туберкулеза и микобактериозов
- •Самостоятельная работа студентов
- •4. Ознакомление с препаратами, применяемыми для диагностики, лечения и профилактики туберкулеза:
- •Микробиологическая диагностика проказы
- •Микробиологическая диагностика менингококковой инфекции
- •Самостоятельная работа студентов
- •4. Биопрепараты для диагностики и профилактики менингококковой инфекции:
- •Микробиологическая диагностика актиномикоза
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 10. Возбудители бактериальных инфекций, передающихся половым путем: гонореи, сифилиса, бактериального вагиноза, урогенитального хламидиоза и микоплазмоза.
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Микробиологическая диагностика бактериальных инфекций, передающихся половым путем
- •Микробиологическая диагностика сифилиса
- •Самостоятельная работа студентов
- •2. Серологическая диагностика сифилиса.
- •3. Ознакомиться с препаратами для диагностики и лечения сифилиса:
- •Микробиологическая диагностика мягкого шанкра
- •Микробиологическая диагностика гонореи
- •Самостоятельная работа студентов
- •3. Изучить препараты для диагностики и лечения гонореи.
- •Микробиологическая диагностика урогенитального микоплазмоза
- •Лабораторная диагностика урогенитального хламидиоза
- •Самостоятельная работа студентов
- •Микробиологическая диагностика бактериального вагиноза
- •Самостоятельная работа студентов.
- •Тема 11. Возбудители риккетсиозов.
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Микробиологическая диагностика риккетсиозов
- •Микробиологическая диагностика эпидемического сыпного тифа.
- •Микробиологическая диагностика эндемического сыпного тифа.
- •Микробиологическая диагностика Ку-лихорадка.
- •Микробиологическая диагностика эрлихиозов
- •Микробиологическая диагностика бартонеллезов
- •Самостоятельная работа студентов
- •3. Серологический метод диагностики сыпного тифа:
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 12. Общая вирусология: морфология и ультраструктура вирусов, методы их культивирования. Экспресс-диагностика вирусных инфекций.
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций
- •Взятие и подготовка материала для вирусологической диагностики
- •Вирусологический метод
- •Выделение вирусов на культурах клеток
- •Выделение вирусов на развивающихся куриных эмбрионах
- •Выделение вирусов на экспериментальных животных.
- •Экспресс-диагностика вирусных инфекций
- •Самостоятельная работа студентов
- •1. Изучение морфологии вирусов по электронограммам.
- •Тема 13. Общая вирусология: диагностика вирусных инфекций. Вирусологический метод исследования. Индикация и идентификация вирусов. Серологический метод диагностики вирусных инфекций.
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Методы выявления (индикация) и идентификации вирусов
- •Индикация вирусов
- •Идентификация вирусов
- •Учет вирусиндуцированных патологических изменений в чувствительных живых системах.
- •Серологический метод диагностики вирусных инфекций
- •Самостоятельная работа студентов
- •2. Индикация вирусов в клетках культуры ткани:
- •3. Выделение и индикация вирусов на ркэ.
- •4. Идентификация вирусов:
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Вопросы для самостоятельного изучения
- •Вирусологическая диагностика острых респираторных вирусных инфекций и гриппа
- •Самостоятельная работа студентов
- •Вирусологическая диагностика натуральной оспы
- •Вирусологическая диагностика герпеса
- •Вирусологическая диагностика кори
- •Вирусологическая диагностика краснухи.
- •Вирусологическая диагностика эпидемического паротита.
- •Самостоятельная работа студентов
- •Тема 15. Пикорнавирусы. Вирусы гепатитов. Ротавирусы
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Вопросы для самостоятельного изучения
- •Вирусологическая диагностика пикорнавирусных инфекций Энтеровирусные инфекции
- •Самостоятельная работа студентов
- •4. Изучить биопрепараты для профилактики, диагностики и лечения:
- •Лабораторная диагностика вирусных гепатитов
- •Гепатит а
- •Гепатит в
- •Другие гепатиты
- •Самостоятельная работа студентов
- •1. Лабораторная диагностика вирусных гепатитов
- •Вирусологическая диагностика ротавирусных гастроэнтеритов.
- •Тема 16. Арбовирусы. Нейровирусы. Онкогенные вирусы. Медленные вирусные инфекции. Ретровирусы
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Вопросы для самостоятельного изучения
- •Вирусологическая диагностика нейровирусных инфекций Арбовирусные инфекции
- •Самостоятельная работа студентов
- •3. Изучить биопрепараты для профилактики, диагностики и лечения клещевого энцефалита:
- •Бешенство
- •Самостоятельная работа студентов
- •2. Изучить биопрепараты, используемые для специфической профилактики и лечения бешенства:
- •Лабораторная диагностика вич-инфекции
- •Самостоятельная работа студентов
- •Вирусологическая диагностика парвовирусных инфекций
- •Вирусологическая диагностика аренавирусных инфекций
- •Вирусологическая диагностика филовирусных инфекций (Марбургская лихорадка и лихорадка Эбола)
- •Тема 17. Патогенные грибы. Возбудители глубоких и субкутанных микозов, дерматомикозов, оппортунистических микозов
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Элементы общей микологии и принципы лабораторной диагностики микозов Биологические свойства грибов
- •Лабораторная диагностика микозов
- •Лабораторная диагностика отдельных микозов Лабораторная диагностика глубоких (системных) микозов
- •Криптокккоз
- •Североамериканский бластомикоз (болезнь Джилкрайста—Стокса)
- •Южноамериканский бластомикоз (паракокцидиоидоз)
- •Гистоплазмоз
- •Кокцидиомикоз
- •Лабораторная диагностика подкожных (субкутанных) микозов Споротрихоз
- •Хромомикоз
- •Лабораторная диагностика эпидермомикозов Рубромикоз (руброфития).
- •Эпидермофития паховая.
- •Эпидермофития стоп.
- •Трихомикозы Трихофития
- •Микроспория.
- •Фавус (парша).
- •Лабораторная диагностика поверхностных микозов
- •Лабораторная диагностика микозов, вызываемых условно-патогенными грибами (оппортунистические микозы)
- •Кандидоз (кандидамикоз)
- •Другие оппортунистические микозы
- •Аспергиллез
- •Пенициллиоз
- •Фикомикоз (мукороз)
- •Пневмоцистоз
- •Самостоятельная работ студентов Лабораторная диагностика эпидермомикозов.
- •Лабораторная диагностика кандидозов.
- •Лабораторная диагностика глубоких микозов.
- •2. Серологический метод:
- •Педиатрические аспекты темы
- •Тема 18. Микробиологическая диагностика протозойных инфекций
- •Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
- •Основные методы лабораторной диагностики протозойных инфекций
- •Малярия
- •Криптоспоридиоз
- •Токсоплазмоз
- •Трипаносомоз
- •Лейшманиоз
- •Лямблиоз
- •Трихомониаз
- •Амебиаз
- •Балантидиаз
- •Самостоятельная работ студентов
- •Педиатрические аспекты темы
- •Приложение 1
- •Правила взятия и доставки биологических материалов для
- •Микробиологических исследований
- •Взятие крови.
- •Взятие спинномозговой жидкости
- •Взятие мочи
- •Взятие желчи.
- •Взятие материала из дыхательных путей
- •Взятие материала из уха.
- •Взятие отделяемого из ран, язв, брюшной полости
- •Взятие материала из глаз.
- •Взятие материала из женских половых органов
- •Взятие материала при аутопсии
- •Взятие, условия хранения и доставки венозной крови для проведения ифа и пцр.
- •Правила взятия и доставки биологических материалов для вирусологических исследований
Вирусологическая диагностика натуральной оспы
Вирус натуральной оспы (Variola virus) относится к семейству Poxviridae, роду Orthopoxvirus, который включает вирусы натуральной оспы, осповакцины, а также вирусы оспы животных (коров, буйволов, верблюдов, овец, обезьян, кроликов и мышей). Этот антропонозный вирус вызывает у человека острую инфекцию с явлениями тяжелой общей интоксикации, лихорадкой и появлением характерной папулезно-пустулезной сыпи на коже и слизистых оболочках. Натуральная оспа является особо-опасной, карантинной инфекцией. В 20 веке оспа была ликвидирована, однако существует угроза применения этого вируса как средства биологического терроризма. Человек может также заразиться вирусом оспы обезьян, при этом клинические проявления сходны с таковыми при натуральной оспе, однако человек, зараженный вирусом оспы обезьян, неопасен для окружающих
Материалом для исследования при натуральной оспе - соскоб с элементов сыпи - макул и папул, содержимое везикул и пустул, корочки оспенных пустул, слюна, носоглоточные смывы, трупный материал, кровь. Исследование на вирус натуральной оспы проводят в специальных лабораториях. Применяются следующие методы лабораторной диагностики.
Экспресс-диагностика - прямое исследование материала от больного с помощью электронной микроскопии, РИФ, РОПГА, РПГ, ИФА.
Сущность РОПГА состоит во взаимодействии антигена, находящегося в исследуемом материале, с бараньими эритроцитами, на поверхности которых фиксированы противооспенные антитела (антительный диагностикум), что приводит к агглютинации эритроцитов.
Вирусологический метод заключается в заражении на ХАО 10-12-дневных РКЭ с последующей их инкубацией в течение 3-5 дней при температуре 350 С. Вирус натуральной оспы образует на ХАО мелкие белые бляшки. Для выделения вируса используют также первично-трипсинизированные и перевиваемые культуры ткани.
Индикацию и идентификацию оспенных вирусов в РКЭ обычно проводят с помощью РН, а в зараженных клеточных культурах - с помощью РИФ, РОПГА, РПГадс. Дифференциация оспенных вирусов от сходных с ними герпесвирусов основывается на обнаружении в клетках, пораженных герпесвирусами, внутриядерных включений, характерного цитопатического действия при отсутствии феномена гемадсорбции.
Серологический метод - постановка РТГА, РСК, РН на куриных эмбрионах и в культурах клеток с парными сыворотками крови больных с целью констатации нарастания титра антител. Учет РН в культуре ткани проводится по ЦПД и РГадс, а на куриных эмбрионах - по образованию бляшек на ХАО и накоплению гемагглютининов, выявляемых с помощью РГА.
Вирусологическая диагностика герпеса
Герпес относится к распространенным рецидивирующим инфекциям с характерными пузырьковыми высыпаниями на коже и слизистых оболочках. Представители семейства Herpesviridae (табл. 22) способны также вызывать врожденные уродства, поражения различных органов и систем (нервной системы, органов дыхания, печени, слизистой оболочки полости рта и половых органов, глазного яблока), онкологические заболевания. Рецидивы герпеса возникают на фоне снижения антиинфекционной резистентности при простуде, гриппе, ОРВИ, других острых инфекционных заболеваниях и т.д..
Материалом для исследования являются содержимое элементов сыпи, корочки, слюна, спинномозговая жидкость, трупный материал (кусочки головного и спинного мозга, печени, лимфатические узлы), кровь и др. Лабораторная диагностика герпетической инфекции включает экспресс-методы, вирусологическое и серологическое исследование (схема 20).
Вирусологический метод – заражение РКЭ на ХАО, культур ткани (почек кролика, фибробластов эмбриона человека или кур, HeLa и др.). При наличии цитомегаловируса в клеточных
культурах через 4-7 дней появляются многоядерные гигантские клетки с признаками дегенерации и внутриядерными включениями, на ХАО РКЭ герпесвирусы вызывают появление характерных бляшек. Вирус ветряной оспы или опоясывающего лишая вызывает на 6-13 сутки очаговое ЦПД с появлением в клетках цитоплазматических и внутриядерных включений.
Таблица 22. Герпесвирусы и вызываемые ими заболевания
Представители |
Заболевания |
α-герпесвирусы Вирус простого герпеса 1 типа (ВПГ-1) |
Лабиальный герпес, герпес кожи и слизистых оболочек, офтальмогерпес, генитальный герпес, герпетические менингиты и энцефалиты |
Вирус простого герпеса 2 типа (ВПГ-2) |
Генитальный и неонатальный (микроцефалия) герпес |
Вирус опоясывающего лишая |
Ветряная оспа у детей, опоясывающий лишай у взрослых |
β-герпесвирусы Цитомегаловирус (ЦМВ) |
Врожденные поражения ц.н.с., ретинопатии, пневмонии, гепатиты |
γ-герпесвирусы Вирус Эпштейна-Барр (ЭБВ) |
Инфекционный мононуклеоз,назофарингеальная карцинома, лимфома Беркитта |
Нетипируемые герпесвирусы Вирус герпеса 6 и 7 типов (ВГ-6, ВГ-7) |
В-клеточная лимфома, лимфома Ходжкина,синдром хронической усталости |
Вирус герпеса 8 типа (ВГ-8) |
Саркома Капоши |
Схема 20. Вирусологическая диагностика герпеса
Материал для исследования:содержимое
элементов сыпи, корочки,
слюна, спинномозговая жидкость, трупный
материал (кусочки головного и спинного
мозга, печени, лимфатические
узлы), кровь и др.
Экспресс-диагностика
-
электронная
микроскопия, РИФ, ИФА - обнаружение
вируса герпеса или его антигенов в
исследуемом материале
Вирусологический
метод –
заражение РКЭ на ХАО, культур ткани.
Индикация вируса по ЦПД, идентификация
с
помощью РН
на мышах, куриных эмбрионах,
в культуре
клеток
Биопроба:
заражение
лабораторных
животных.
Индикация вируса в мазках-отпечатках
с помощью РИФ, выделение - на культуре
ткани или на ХАО куриного эмбриона
Серологический
метод - выявление
нарастания титров антител в парных
сыворотках больных с помощью РН, РСК,
ИФА, РНГА, РТГадс
Генодиагностика:
ПЦР
Идентификацию ВПГ проводят с помощью РН на мышах, куриных эмбрионах, в культуре клеток.
Серологический метод - выявление нарастания титров антител в парных сыворотках больных с помощью РН, РСК, ИФА (реже РНГА, РТГадс) с дифференциацией антител по классам иммуноглобулинов. Первичная герпетическая инфекция характеризуется появлением антител класса IgM.
Биопроба. С целью выделения вируса герпеса производится заражение лабораторных животных (новорожденных грызунов, белых мышей, кроликов, морских свинок, хомяков, хлопковых крыс - обычно в мозг), которые через несколько дней погибают. Вирус от павших животных можно обнаружить в мазках-отпечатках с помощью РИФ, а также выделить на культуре ткани или на ХАО куриного эмбриона.
Генодиагностика. Разработана и широко применяется ПЦР, позволяющая в течение от 4 до 48 часов определить несколько вирусов герпеса.