- •1. Приготовление фиксированного мазка
- •2. Окраска фиксированного мазка простым методом
- •3. Окраска фиксированного мазка по методу Грама:
- •4. Питательные среды:
- •5. Посев по методу Дригальского
- •6. Определение биохимических свойств микробов:
- •7. Определение чувствительности к антибиотикам методом стандартных дисков:
- •8. Качественная проба на бактериофаг по Отто:
- •9. Фаготипирование стафилококков:
- •10. Титрование вируса полиомиелита в цветной пробе Солка:
- •3. Титрованне агглютинирующей сыворотки
- •4. Реакция агглютинации по Видалю с целью серодиагностики брюшного тифа
- •5. Рнга с VI-эритроцитарным диагиостикумом
3. Титрованне агглютинирующей сыворотки
Тип реакции: реакция агглютинации.
Исследуемый материал: сыворотка животного, гипериммунизированного бактериальной взвесью.
Диагоностический препарат: взвесь убитых бактерий, применявшихся для гипериммунизации.
Принцип метода: к серийным разведениям агглютинирующей сыворотки добавляют равные количества взвеси убитых бактерий, применявшихся для получения этой сыворотки.
Положительный результат реакции: образование хлопьев, просветление жидкости. Отрицательный результат: равномерная муть. Применение: для определения титра агглютинирующей сыворотки.
Титр агглютинирующей сыворотки - наибольшее разведение сыворотки, в которой еще наблюдается агглютинация. В данном случае титр агглютинирующей сыворотки равен ...
4. Реакция агглютинации по Видалю с целью серодиагностики брюшного тифа
Для постановки реакции берут:
сыворотку исследуемого больного для определения в ней антител;
О - и Н-диагноста кумы бактерий брюшного тифа, паратифа А и паратифа В;
физиологический раствор.
Кровь для получения сыворотки берут в количестве—15—20 капель путем укола мякоти пальца или 2 —3 мл при помощи венепункции.
Дают крови свернуться в термостате в течение 30—60 минут, затем простерилизованной петлей обводят сгусток, отделяя его от стенки пробирки, и дают отстояться сыворотке на холоду до образования над сгустком прозрачного слоя. Сыворотку помещают пипеткой в отдельную пробирку. Первое разведение (1:50) делают при помощи пипетки—0,1 мл сыворотки + 4,9 мл физиологического раствора. Дальнейшие разведения (1:100— 1:200 — 1 : 400—1:800) готовят по обычной схеме.
Берут 6 рядов пробирок по 6 пробирок в каждом. По 1 мл сыворотки разведения 1: 100 наливают в первую пробирку каждого ряда, 1: 200 — во вторую, 1 : 400 — в третью и т. д.; в шестую, контрольную, пробирку наливают 1 мл физиологического раствора.
Во все пробирки первого ряда добавляют по 1—2 капли брюшнотифозного Н-диагностикума; в пробирки второго ряда — брюшнотифозный 0-диагностикум; в пробирки третьего я четвертого ряда добавляют А-паратифозный, Н - и 0-диагностикумы, а в 5-й и 6-й ряд— В-паратифозный H - и 0-диагностикум. Пробирки ставят в термостат на 2 часа, отмечают результат реакции, затем оставляют при комнатной температуре на сутки; после этого срока дают заключение об окончательном результате реакции.
Возбудителем заболевания считается тот микроб, который агглютинируется сывороткой больного. Реакция считается положителыной, если агглютинация произошла хотя бы в первой пробирке с разведением 1: 100; обычно она наступает в больших разведениях. Если происходит групповая агглютинация с двумя или с тремя антигенами, то за возбудителя болезни принимается тот микроб, с которым произошла агглютинация в наиболее высоком разведении сыворотки.
5. Рнга с VI-эритроцитарным диагиостикумом
Тип реакции - реакция непрямой гемагглютинации.
Исследуемый материал - сыворотка крови обследуемого.
Диагностический препарат - Vi-эритроцитарный диагностикум (взвесь в физиологическом растворе эритроцитов барана с нагруженными на них Vi - антигенами S.typhi ).
Принцип реакции: к разведениям сыворотки обследуемого добавляют Vi-эритроцитарный диагностикум.
Положительный результат – гемагглютинат ("зонтик"); отрицательный результат - плотный осадок эритроцитов на дне лунки ("пуговка").
Диагностический тигр реакции 1/ 40.
Применение: отбор лиц, имеющих титр антител к Vi – антигенам S.typhi выше диагностического.
Трактовка результатов: лица с положительной реакцией в титре выше, чем 1/40 считаются подозрительными на бактерионосительство S.typhi и подлежат бактериологическому обследованию на наличие S.typhi в кале, моче и желчи.
В данном случае...(результат и вывод).