Физико-химические свойства,
Иридоиды - бесцветные кристаллические или аморфные вещества с температурой плавления от 50 до 300" С в большинстве своем легко растворимы в воде и низших спиртах. Однако встречаются иридоидные гликозиды трудно растворимые в воде и лучше в органических растворителях (одонтозид). Агликоны иридоидов лучше растворяются в органических растворителях и плохо в воде. Например, валепотриаты - иридоидные соединения валерианы не образующие гликозидов экстрагируют из сырья хлороформом или смесями хлороформа с этанолом. Иридоиды оптически активны, многие из них очень горького вкуса.
Методы выделения и разделения иридоидов.
В настоящее время не существует универсального метода выделения иридоидов. Анализ научных публикаций по этой теме позволяет сделать следующие обобщения:
Для выделения иридоидных гликозидов пригодно как высушенное, так и свежее растительное сырье.
Экстракцию растительного сырья можно проводить водой, водно-спиртовыми растворами (этанолом или метанолом) на холоду или при нагревании.
Для очистки от липофильных примесей целесообразно промывание водных растворов иридоидных гликозидов растворителями не смешивающимися с водой.
С целью освобождения от сопутствующих фенольных примесей целесообразно фильтрование водных растворов через слой нейтральной Al2O3.
5. Наиболее эффективный метод освобождения от примеси сахаров - адсорбция иридоидных гликозидов из их водных растворов на активированном угле, отмывание водой сахаров и последующая десорбция иридоидных гликозидов с угля водно-спиртовыми растворами.
6. Сгущение растворов иридоидных гликозидов следует проводить при пониженном давлении, минимальном тепловом воздействии и в нейтральной среде.
Разделение очищенных перечисленными методами иридоидных фракций на отдельные гликозиды
проводят хроматографией на колонках с полиамидным сорбентом силикагелем, сефадексом,
целлюлозой.
Качественное обнаружение иридоидов в растительном сырье.
Содержание иридоидных гликозидов в растениях обычно высокое, порядка 1% и более, считая на вес сухого растительного сырья. Уже первым указанием па наличие иридоидов может служить изменение цвета растения (посинение или почернение) происходящее иногда в течение часа после сбора.
Универсального метода в достаточной степени однозначно определяющего наличие иридоидных гликозидов в растениях не существует. В зависимости от структурных особенностей иридоидов наиболее часто используются следующие реакции:
а) С щелочным раствором гидроксиламина и раствором окисного железа в соляной к-те. Эту реакцию дают иридоиды содержащие сложноэфирную связь.
Образовавшийся комплекс хлорида железа с гидроксамовыми к-ми окрашен в красно-фиолетовый цвет.
Эта реакция включена как качественная в ФС на траву пустырника, корневища и корни пиона уклоняющегося, корневища с корнями валерианы.
Другой распространенной реакцией является реакция Трима - Хилла.
Реакция Трима -Хилла (10 мл СН3СООН + 1 мл 0,2% СuS04 + 0,5 НCl (конц.)
При нагревании извлечения с этой смесью образуется синее или фиолетовое окрашивание. Эту реакцию дают аукубин, монотропин, асперулозид, но не дают, например, логанин и каталпол.
Для иридоидов валерианы кроме реакции с гидроксиламином и хлоридом окисного железа, наиболее характерной является реакция с концентрированной СНзСООН и НСl. Образующиеся пирилиевые соли валепотриатов окрашены в синий цвет. Эта реакция, получившая название "галацухром – реакция” включена в измененную редакцию ГФ XI ст. 77 на корни валерианы как качественная.
Чаще качественную идентификацию проводят на ТСХ пластинках. Чаще других используют реактив Шталя (п-ДМБА в смеси фосфорной и уксусной к-т), реактив Бэкона - Эдельмана (раствор бензидина и ТХУК в этаноле) и растворы H2SO4 различной концентрации. После опрыскивания хроматограмм этими реактивами их выдерживают несколько минут в сушильном шкафу при t=100-1050С. Реакция с реактивом Шталя используется в ГФXI для идентификации иридоидов в коре калины (сине-зеленое окрашивание) и в траве пустырника (сиреневое окрашивание). Реакция с разведенной Н2SO4 на ТСХ пластинках включена в ФС на траву пиона уклоняющегося и корневища и корни этого растения (пионифлорин - розовато-сиреневое окрашивание).
Количественное определение,
В зависимости от структурных особенностей иридоидов их можно определять различными методами. Иридоиды имеющие в своей структуре свободные карбоксильные или сложноэфирные группы можно определять методами нейтрализации, соответственно прямым или обратным титрованием. Так, например, предложено определять сумму валепотриатов в корневищах и корнях валерианы.
Йодгидриновый метод применяется для определения иридоидов, содержащих эпоксигруппы (валепотриаты, производные каталпола, унедозида). Метод основан на способности эпоксигрупп легко раскрываться с образованием йодгидринов.
Однако эти методы, возможно, использовать лишь после хроматографической очистки извлечения из растительного сырья.
Из инструментальных методов удобными, быстрыми и точными являются методы хроматоденситометрии и ВЭЖХ.
Однако эти методы пока не нашли широкого распространения в повседневной практике, из-за того, что требуют специального дорогостоящего оборудования (денситометров и жидкостных хроматографов) пока недоступных большинству КАЛ. Кроме того, для этих необходимо иметь стандартные образцы тех соединений, которые определяются. Отечественная промышленность в настоящее время выпускает стандартный образец только одного иридоида - гарпагида ацетата (ТУ -3072-90).
В настоящее время наибольшее практическое применение нашел ФЭК метод, основанный на
измерении оптической плотности окрашенных растворов иридоидов с одним из реактивов рассмотренных выше.
Реакция с гидроксиламином и хлоридом окисного железа используется в методиках количественного определения иридоидов включенных в НД на траву, корневища и корни пиона уклоняющегося и траву пустырника, а также на корневище с корнями валерианы. Количественное определение суммы валепотриатов ФЭК методом по "галацухром - реакции" включено в НД на корневище с корнями валерианы
Предложено также определять сумму иридоидов в коре калины по реакции с реактивом Шталя (п-ДМБА). На этой же реакции основана методика количественного определения аукубина в листьях подорожника.
Лекарственное растение и сырьё,содержащее иридоиды,
Rhizomata cum radicibus Valerianae
Rhizomata cum radicibus Valerianae recens
Сем. Valerianaceae
Валериана лекарственная - двулетнее травянистое растение до 2 м. Растет в разнообразных экологических условиях: на травяных и торфяных болотах, заболоченных и влажных лугах, по берегам водоемов и канав, на лесных полянах и опушка. Имеет европейский тип ареала. Восточная граница проходит по Уралу, южная - через Ростовскую, Саратовскую области и Башкирию. Основными районами заготовки дикорастущей валерианы являлись Украина, Белоруссия, Ростовская, Воронежская, Ульяновская области, Башкирия. Сравнительно недавно в этот перечень входил и Татарстан. Особенно много заготавливали корня валерианы на заливных: лугах Волги и Камы. Однако Куйбышевское и Нижнекамское водохранилища поглотили эти местообитания валерианы и всего несколько лет назад валериана лекарственная в нашей республике относилась к числу охраняемых.
В азиатской части страны - в Сибири и на Дальнем Востоке встречаются близкие виды валериана очереднолистная и заенисейекая. Они заготавливаются наравне с официнальным видом.
Потребность в сырье - 3,5тыс. т. в год. Валериана введена в культуру. Выращивают ее в 12 специализированных хозяйствах АПК «Эфирлекраспром» и в настоящее время большая часть сырья заготавливается с культивируемых плантаций.
Химический состав
Содержит до 2,5% иридоидов называемых валепотриатами. Основными из них являются валтрат, изовалтрат, ацевалтрат и дидровалтрат.
кроме этого к действующим веществам валерианы относится эфирное масло, которое может накапливаться до 2,4%. Основным компонентом эфирного масла является борнилизовалерианат.
Заготовка, первичная обработка, сушка.
Уборку корневищ с корнями валерианы проводят поздней осенью (конец сентября - середина октября), когда завершается прирост корневой массы. При весенней уборке значительно снижается качество и урожай сырья (практически вдвое). Уборку сырья в хозяйствах ведут валерианоуборочным комбайном ВК-3 или картофелекопалками. Толстые корневища режут вдоль, быстро промывают водой. Сушат или на воздухе в тени или в тепловых сушилках при t= 35-40 0С.
Стандартизация
Качество высушенного сырья регламентируется ГФXI ст. 77, свежего - ФС 42-1530-89.
Согласно изменению №1 от 13.09.93 в статью оыла включена качественная реакция на залепотрнаты и количественная стандартизация по содержанию валепотриатоЕ в пересчете на валтрат (должно быть не менее 1,4%). Для сырья, используемого для получения препарата Валеран, содержание валепотрнатов определяют ФЭК методом при длине волны 595 нм, рассчитывая содержание либо по удельному показателю поглощения, либо по калибровочному графику, построенному по растворам 2,6-днхлорфенолиндофенолзта Ка, имеющего синию окраску. Все остальное сырье, включая и свежее стандартизируется по содержанию экстрактивных веществ, извлекаемых 70% спиртом, которых: д.б. не не менее 25% и суммы сложных эфиров в персчете на этиловый эфир валериановой кислоты (не менее2%).
Применение
Препараты валерианы применяются как успокаивающие средства при нервном возбуждении, бессонице, неврозах сердечно-сосудистой системы
Для приготовления настоя используют цельное и измельченное сырье, брикеты и порошок в фильтр-пакетах. В заводских условиях получают настойку на 70% спирте, которая применяется индивидуально и входит в состав комплексных препаратов: Валокормид, капли ландышево-валериановые, капли ландышево-валериановые с NaBr и другие. Настойка из свежих корневищ и корней входит в состав препарата Кардиовален. Выпускается экстракт валерианы густой (таблетки - Татхимфармпрепараты). Масляный экстракт - препарат Валеран.
Измельченный порошок входит в состав комплексного препарата «Микройод» применяющегося при зобе (обеспечивает седативный эффект).
В некоторых литературных источниках указывается, что наибольший эффект вызывает настой из свежего сырья валерианы.
Herba Paeoniae anomale.
Rhizomata en radices Paeoniae anomalae.
Paeonia anomala
Сем. Paeoniaceae.
Пион уклоняющийся - травянистый многолетник высотой до 1 м с коротким многоглавым корневищем и отходящими от него мясистыми корнями. Стебли прямостоячие, многочисленные, листья очередные дважды тройчатораздельные с широкими ланцетными долями. Цветки одиночные пятичленные, крупные до 13 см в поперечнике. Лепестки розово-красные. Плод многолистовка. Цветет с конца мая до конца июня, плоды созревают в конце августа - начале сентября. Широко распространен в Сибири, на европейскую часть заходит только на севере (республика Коми, Архангельская, Мурманская области).
Растет преимущественно в лесах, предпочитая богатые гумусом почвы. У пиона одновременно используется и подземная и надземная части, составляющих при заготовках соотношение 1:1 (по массе сухого сырья). Потребность в сырье составляет 47 т в год. В культуру не введен. Основные районы заготовки Красноярский край, Томская, Новосибирская и Горно-Алтайская области.
Хим. состав.
Содержит иридоиды до 2,3% - основной из которых пинифлорин. В корнях содержится эфирное масло до 1,6%, содержащее метилсалицилат.
Заготовка, первичная обработка, сушка,
Надземную часть собирают во время цветения, корни можно заготавливать в любое время вегетационного периода, но обычно их добывают одновременно с травой. Корневища и корни выкапывают лопатой, отряхивают от земли, моют в воде и режут на куски. Надземную часть отделяют от корневищ. Чтобы обеспечить соотношение сухой массы подземных и надземных органов 1:1, необходимо на каждые 100 кг сырых корней заготовить около 200 кг сырой травы. На каждом участке,
где ведется заготовка сырья, у части экземпляров собирают только траву, для обеспечения возобновления заросли. Чтобы не повредить почки возобновления надземную часть не срывают, а срезают ножом.
Сушат сырье пиона на чердаках под навесами. Досушивать его можно в сушилках при t=45-6ОС. подземную и надземную часть сырья сушат раздельно.
Внешние признаки,
Корневища и корни представляют собой куски различной формы длиной до 1,5см. Снаружи темно-коричневые или желтовато-бурые, продольно-морщинистые. Излом неровный, беловато-желтоватый. На поперечном срезе резко выступающие желтоватые клиновидные участки древесины перемежаются светлыми участками сердцевидных лучей. Вкус сладковато жгучий. Характерен сильный, своеобразный запах метилсалицилата.
Трава пиона представляет собой смесь стеблей, листьев, цветков и бутонов.
Стандартизация
Качество сырья регламентируется требованиями ФС 42-531-98 (корневища и корни) и ФС 42-99-98 (трава). Стандартизируется по содержанию иридоидов в пересчете на пеонифлорин, которых в корнях д.б. от 0,3 до 0,8%. Определяется ФЭК методом по реакции с гидроксиламином и хлоридом окисного железа при 512 нм, используя удельный показатель поглощения.
Применение.
Для приготовления настойки (на 40% спирте из корневищ с корнями и травы, взятых в соотношении 1:1), которая назначается в качестве седативного средства при неврастении, бессоннце.
Herba Leonuri Leonurus cardiaca
L. quinquelobatus Сем. Lamiaceae
Пустырники - это довольно крупные многолетние травы, достигающие 150 см в высоту. Пустырник сердечный отличается от пятилопастного тем, что у него пятилопастными являются только нижние листья, средние листья - трехлопастные, а верхние почти цельные. Часть ботаников считает, что пустырника 5-лопастного не существует, и рассматривают его как одну из форм пустырника сердечного.
Пустырникн встречаются почти по всей европейской части страны. В азиатской части встречается ограниченно, в основном на юге Западной Сибири. В Татарстане пустырник 5-лопастной широко
распространенное растение. Особенно большие заросли пустырника находятся в Апастовском, Тетюшском и Чистопольском районах. Растет пустырник по пустырям, вдоль дорог, на выгонах и пастбищах, в огородах, по заборам.
Введен в культуру и возделывается в хозяйствах объединения «Эфирлекраспром». Потребность в сырье - 1500 т. большую часть сырья планируется получать за счет культуры.
Хнм, состав
Содержатся иридоиды - аюгол, аюгозид, галиридозид
Другой группой действующих веществ считаются флавоноиды - рутин, квинквелозид. Заготовка, первичная обработка, сушка.
Собирают траву в фазу бутонизации и начала цветения (июнь), срезая верхушки стеблей до 40 см. на плантациях траву убирают жатками. Сушат на чердаках или под навесами. В тепловых сушилках сушат при t=50-бОС.
Стандартизация
Согласно действующей на сегодняшний день ст.54 ГФXI изменение №5 от 16.06.99 трава пустырника предназначенная для получения настойки стандартизируется по содержанию суммы иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат, которых д. б. не менее 0,3%. В статье также сохранен показатель экстрактивные вещества, извлекаемые 70% спиртом - не менее 15%.
Применение.
Для получения настоя и настойки, которые применяют как седативное средство при повышенной нервной возбудимости, сердечно-сосудистых неврозах я начальных стадиях гипертонической болезни. Для приготовления настоя сырье выпускается в измельченном виде, в фильтр-пакетах и в виде брикетов.
Folia Menyanthidis trifoliatae Menyanthes trifoliata Сем.Menyanthaceae
Вахта - водно-болотное растение с длинным ползучим корневищем приподнимающимся в верхней части и несущим очередные глубокотрехраздельные листья.
Имеет голарктический тип ареала, распространена по всей европейской части страны, за исключением южных районов и почти по всей азиатской части России за исключением крайнего севера.
Местами обитания являются сфагновые и торфяные болота, берега стоячих и слабопроточных водоемов, заболоченные, и топкие берега озер, рек, заболоченные луга и болотистые леса.
Потребность в сырье 76 т в год. Она полностью удовлетворяется заготовками дикорастущего сырья. На территории России основные заготовки ведутся в Волгоградской, Мурманской, Омской, Томской области и республике Карелия. В Татарстане встречается ограниченно, является охраняемым растением.
Хим. состав
Основные действующие вещества иридоиды с горьким вкусом - логанин, сверозид, мениантин.
Заготовка, первичная обработка, сушка.
Заготавливают развитые листья в июле - августе после отцветания растения (цветет в мае - июне). Собранное сырье сушат на чердаках, сараях или в тепловых сушилках при t=40-50 С.
Стандартизация
По ГФ XI ст. 19 сырье стандартизируется по содержанию суммы флавоноидов в пересчете на рутин, которых д.б. не менее 1%.
Для вахты давно были установлены основные действующие вещества, однако не были разработаны методы их количественного определения, и разработчики фармакопейной статьи предложили стандартизировать сырье по сопутствующим веществам. Этот же подход был применен и в случае другого фармакопейного сырья, содержащего иридоидные гликозиды горького вкуса (генциопикрин) - травы золототысячника (ГФ XI ст.48), которая стандартизируется по содержанию суммы ксантанов (не менее 0,9%).
Применение.
Применяется в форме настоя как средство, повышающее аппетит и усиливающее желудочно-кишечную секрецию.
Herba Centaurii
Centaurium erythaea, C. umbellatum, C. minus, Erythraea centarium
Centaurium pulchellum, E.pulchella
Сем. Gentianaceae
Золототысячник обыкновенный достигает высоты 50 см, стебель четырехгранный с тупыми ребрами. Нижние листья образуют долго сохраняющуюся розетку, цветки пятичленные с ярко-розовым венчиком. Золототысячник красивый отличается меньшими размерами (высота до 20 см), отсутствием прикорневой розетки листьев, остроребристым стеблем и темно-розовым венчиком цветков.
Первый вид распространен преимущественно в европейской части страны, второй встречается также в Западной Сибири. В Татарстане очень редко встречается только золототысячник обыкновенный, является охраняемым растением.
Хим. состав. Все растение содержит секоиридоиды - генциопикрин, амарогентин, сверциамарин и др. имеющие очень горький вкус. Наиболее горькими являются цветки золототысячника. В траве также содержатся ксантоны (алпизарин и др.), по которым стандартизуется сырье.
Заготовка, первичная обработка, сушка. Траву заготавливают в фазу цветения, высушивают при 40 -50 С.
Стандартизация. По ГФ XI ст. определяется общее содержание ксантонов в пересчете на аплизарин не менее 0,9%.
Применение.
Применяется в форме настоя как средство, повышающее аппетит и усиливающее желудочно-кишечную секрецию. Входит в состав горькой настойки.