Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Биохимия-лаб..DOC
Скачиваний:
12
Добавлен:
20.07.2019
Размер:
181.76 Кб
Скачать

Опыт 10. Получение триацетата целлюлозы (тяга!).

В химический стакан емкостью 25 мл помещают небольшой кусочек гигроскопической ваты (0,4 г), заливают его дистиллированной водой и выдерживают в течение 3-5 минут. Затем вату вынимают из воды, отжимают в фильтровальной бумаге, расщипывают и погружают небольшими порциями при размешивании стеклянной палочкой в коническую колбу (50 мл), в которой находится смесь 5 мл уксусного ангидрида, 5 мл ледяной уксусной кислоты и 1-2 капли концентрированной серной кислоты (катализатора). При внесении в колбу влажной ваты происходит разогревание реакционной смеси, поэтому колбу охлаждают в бане с холодной водой. Когда саморазогревание смеси прекратится (через 5-10 минут), колбу помещают в нагретую водяную баню и тщательно перемешивают реакционную смесь стеклянной палочкой до полного растворения целлюлозы. Полученный раствор выливают тонкой струей при перемешивании в стакан с 250 мл холодной воды. Выпадает осадок ацетата целлюлозы в виде хлопьев. В условиях опыта получается преимущественно триацетат целлюлозы.

Напишите уравнение реакции получения триацетата целлюлозы.

Опыт 11. Качественная реакция на полисахариды (реакция Подобедова-Молиша)

В одну пробирку наливают 1-2 мл 1%-ного раствора крахмального клейстера, а в другую – 1 мл дистиллированной воды с небольшим кусочком ваты. Затем в обе пробирки добавляют по 3 капли 10-15%-ного спиртового раствора α-нафтола (или тимола). Наклонив пробирки, по стенкам из пипетки осторожно приливают по 1 мл концентрированной серной кислоты.

На границе двух жидкостей (внизу – серная кислота, сверху – водный слой) появляется кольцо фиолетового окрашивания. Если вместо α-нафтола взять такое же количество 10-15%-ного спиртового раствора тимола, то образуется красное кольцо.

Объясните опыт.

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №4.

ЦВЕТНЫЕ РЕАКЦИИ НА БЕЛКИ

Присутствие белка в исследуемом веществе можно обнаружить с помощью цветных реакций на структурные компоненты белка и его функциональные группы.

Существующие методы определения аминокислотного состава белков можно разделить на три группы:

1) Универсальные методы основываются на наличии в молекулах всех аминокислот аминных и карбоксильных групп (реакция Ван-Слайка, формолтитрование по Зеренсену, нингидриновая проба).

К этим методам можно отнести также реакцию на пептидную группу в белках (биуретовая реакция).

2) Групповые методы основываются на специфических особенностях структуры молекул некоторых аминокислот (осаждение моноаминодикарбоновых кислот в виде кальциевых солей, осаждение диаминомонокарбоновых кислот в виде фосфовольфраматов, определение ароматических аминокислот ксантопротеиновой пробой).

3) Специфические методы основываются на наличии определенных функциональных групп у некоторых аминокислот (реакция Миллона на тирозин, реакция Адамкевича на триптофан, реакция Сакагучи на аргинин, реакция Фоля на цистеин и цистин).

Некоторые цветные реакции характерны не только для белков, но и для других веществ. Например, биурет дает положительную биуретовую реакцию. Фенол, как и тирозин белка, дает розово-красное окрашивание с реактивом Миллона. Поэтому для установления присутствия белка недостаточно проводить только одну цветную реакцию.