Масляная иммерсия
Для того чтобы получить более сильное увеличение, чем при работе с обычным объективом большого увеличения (х400), необходимо использовать масляно-иммерсионную линзу. Способность линзы собирать свет в значительной степени усиливается, если между линзой объектива и покровным стеклом поместить жидкость. Жидкость должна иметь тот же коэффициент преломления, что и сама линза. Поэтому в качестве жидкости обычно используют кедровое масло.
Положите препарат на предметный столик и сфокусируйте изображение
так же, как при работе с обычным большим увеличением.
Вместо объектива с линзой большого увеличения установите объектив с масляно-иммерсионной линзой.
Капните каплю кедрового масла на покровное стекло непосредственно над исследуемым объектом.
Снова сфокусируйте изображение теперь уже под малым увеличением, затем поворотом револьверной головки установите объектив с масляно-иммерсионной линзой так, чтобы его кончик касался капли масла.
Глядя в микроскоп, очень осторожно сфокусируйте линзу с помощью винта тонкой настройки. Помните, что фокусная плоскость линзы находится всего в 1 мм от поверхности покровного стекла.
Закончив работу, сотрите с линзы масло мягкой тряпочкой.
Когда работа с микроскопом окончена, конденсор немного опускают, поворотом револьвера устанавливают слабый объектив и опускают тубус вниз настолько, чтобы объектив слегка вошел в отверстие предметного столика, куда предварительно кладут чистую белую тряпочку.
Предметное и покровное стекла. При работе с микроскопом используют предметные и покровные стекла. Предметные стекла имеют четырехугольную форму. Размеры их следующие: длина 76 мм, ширина 26 мм, толщина 1—2 мм.
Покровные стекла обычно бывают квадратной формы с размерами сторон 18X18 мм или 20X20 мм, толщиной не более 0,2 мм (лучше 0,17 мм)'.
Стекла должны быть бесцветными с ровной поверхностью, без пузырьков воздуха. Для специальных исследований применяют предметные стекла с лунками.
Предметные стекла, не бывшие в употреблении, предварительно моют в горячей воде с мылом, а затем протирают мягким полотенцем. Покровные стекла сначала обмывают смесью равных объемов спирта и эфира, затем бензином и вытирают мягкой чистой тряпочкой.
Стекла после употребления опускают на несколько часов в хромовую смесь (если на стеклах находится кедровое масло, его предварительно удаляют), затем их тщательно моют водой, протирают полотенцем и опускают в банку с притертой пробкой со смесью спирта и эфира (равные части) или с денатурированным спиртом.
В повседневной работе после употребления стекла моют с мылом, затем обмывают чистой водой и вытирают насухо чистой мягкой тряпочкой -
Рис. . Предметное и покровное стекла
Чисто вымытые и вытертые стекла можно обезжиривать эфиром (смочить ватку и протереть). Чистые предметные стекла хранят в стаканах, покрытых картонными крышками; покровные стекла лучше хранить в чашках Петри.
Чистоту стекол проверяют водой. На хорошо обезжиренном стекле капля расплывается ровным слоем и легко размазывается по поверхности; на жирном стекле капля не меняет шаровидной формы. Чистые стекла следует брать за ребра, а не за поверхность.
Выполнение работы:
Изучить:
устройство микроскопа;
правила обращения с микроскопом.
Составить:
алгоритм работы с микроскопом на малом увеличении (для рассматривания более крупных объектов –клеток чешуи лука, среза алоэ, волоса, плесневых грибов);
алгоритм работы на больших увеличениях и с применением масляной иммерсии.
Оформление отчета
Оформить отчет о выполнении лабораторной работы:
зарисовать увиденные объекты - клетку лука, алоэ, строение плесневых грибов, отметив при этом технические характеристики, при которых были рассмотрены объекты ( увеличение объектива и окуляра, общее увеличение, апертура и предел разрешения).
Подготовиться к защите лабораторной работы по вопросам:
Какие виды микроскопов существуют? В чем их отличие?
Принципиальная схема получения изображения в электронном микроскопе.
Общее устройство оптического микроскопа
Устройство и назначение механической части микроскопа? Правила обращения с микроскопом.
Устройство и назначение оптической части микроскопа?
Принципиальная схема получения изображения в оптическом микроскопе.
Правила работы с микроскопом на малом увеличении?
Правила работы с микроскопом на большом увеличении?
Паспортные технические характеристики микроскопа. Как по ним выбрать микроскоп для работы?
Основные характеристики увеличивающих и разрешающих способностей микроскопа.
Роль и значение коэффициента преломления среды при микроскопировании.
Дополнительные вопросы:
1. Каково максимальное увеличение оптического микроскопа и электронного?
2. Как определяется общее увеличение микроскопа?
3. Кто изобрел простейший микроскоп?
4.Чем отличаются изображения, полученные из ТЭМа и СЭМа?
5.Что выполняет роль светового потока в электронном микроскопе?