- •Cафу им. М.В.Ломоносова
- •Кафедра ботаники и общей экологии
- •Рабочая тетрадь по «Экологии микроорганизмов»
- •Занятие 1-2 Морфология бактерий. Приготовление препаратов микроорганизмов
- •Работа 1. Получение накопительных культур микроорганизмов
- •1.1. Получение накопительной культуры сенной палочки (Bacillus subtilis)
- •1.2. Получение культуры картофельной палочки (Bacillus mesentericus)
- •Работа 4. Приготовление мазка. Простая окраска Цель работы: овладеть методикой приготовления мазка; изучить морфологические формы бактерий
- •Занятие 3 Работа 1. Анализ микрофлоры воздуха
- •Санитарно-гигиенические показатели воздуха
- •9. Консистенция ( маслянистая, тестообразная, вязкая, пленчатая).
- •Занятие 4 Работа 1.Количественный учет бактерий в воде
- •Занятие 5 Работа 1. Маслянокислое брожение
- •Работа 2. Молочнокислое брожение
- •Работа 3. Нитрификация
- •Качественная реакция на nо2ˉ
- •Качественная реакция на nо3ˉ
Занятие 5 Работа 1. Маслянокислое брожение
Маслянокислое брожение – сложный процесс превращения углеводов в масляную кислоту и другие продукты, совершаемой группой анаэробных спороносных бактерий.
Схематично процесс может быть изображен в виде уравнения:
C6H1`2O6 → CH3 – CH2 – CH2 – COOH + 2 CO2 + 2 H2 + 495 кдж
Дата закладки опыта -
Материалы и оборудование: средняя и большая пробирки, резиновая пробка, пинцет, скальпель, водяная баня, спиртовка, пробиркодержатель; мел в порошке, р-р Люголя, 5% р-р хлорида железа; клубни картофеля
Ход работы:
Неочищенный картофель нарезать ломтиками, которые могут легко войти в пробирку.
Пробирку на 1/3 объема заполнить ломтиками картофеля, добавить щепотку мела и налить воду почти до верха.
Поставить пробирку в водяную баню (t = 80˚С) на 10-15 минут.
Пробирку закрыть пробкой и поставить в термостат с t = 35˚С на 2-3 суток.
В культуральной жидкости обнаруживают бактерии маслянокислого брожения, главным образом - Clostridium pasteurianum – подвижные палочки с закругленными концами, одиночные и парные. В старых культурах у одного из концов клетки обнаруживают спору.
Дата снятия опыта-
Задание: Приготовить фиксированный и окрашенный микропрепарат микроорганизмов:
Микрофлора маслянокислого брожения.
Рассмотреть микропрепараты при увеличении микроскопа МИ-90х, сделать рисунки с обозначениями.
Провести качественную реакцию на масляную кислоту:
к 5 мл культуральной жидкости добавить 2 мл 5% р-ра FeCl3. При нагревании
Работа 2. Молочнокислое брожение
Молочнокислое брожение – анаэробный процесс разложения углеводов ферментами молочнокислых бактерий с образованием молочной кислоты и другими продуктами.
При гомоферментативном брожении молочный сахар образует только молочную кислоту:
C6H1`2O6 → 2CH3 – CНОH –COOH + 75,6 кдж
При гетероферментативном брожении кроме молочной кислоты образуются другие продукты – летучие кислоты, спирты, эфиры.
Возбудителем гомоферментативного брожения являются:
Streptococcus lactis, имеющие вид овальных кокков диаметром 0,5 – 1,0 мкм. Располагаются кокки в культуре попарно (диплококки) или короткими цепочками (стрептококки), реже - одиночными клетками;
Streptococcus cremoris – клетки расположены более длинными цепочками;
Lactobacterium bulgaricum (болгарская палочка) – крупная грамположительная бактерия (длиной 4 – 5 мкм), неподвижная, располагается в виде отдельных клеток и коротких цепочек (стрептобактерия). Оптимальная температура ее развития 40 - 45˚С;
Lactobacterium acidopfilum (ацидофильная палочка) по морфологии близка к болгарской, но имеет другой температурный оптимум развития - 37˚С;
Lactobacterium cucumeris (огуречная палочка) короткая грамположительная бактерия, неподвижная. Располагается парами или цепочкой. Опт. температура ее развития 20-25˚С.
Микроорганизмы гомоферментативного брожения чаще встречаются в заквашенных овощах и силосе. К ним относятся Lactobacterium brassicae fermentatae (капустная палочка), Betabacterium breve, Leuconostoc mesenteroides и др.
Ход работы:
Задание: 1. Приготовить фиксированные и окрашенные микропрепараты микроорганизмов:
Микрофлора кефира.
Микрофлора простокваши.
Микрофлора капустного рассола.
Рассмотреть микропрепараты при увеличении микроскопа МИ-90х, определить виды, сделать рисунки с обозначениями.
Провести качественную реакцию на молочную кислоту:
к 2 мл фильтрата добавить 5 мл конц. Н2SO4 и 10 капель насыщ. р-ра CuSO4. Нагревать при потряхивании на водяной бане при 100˚С в течение 5 минут. После охлаждения добавить 3-5 капель 0,2% спиртового р-ра тиофена. В присутствии молочной кислоты возникает вишнево-красное окрашивание.