- •Cафу им. М.В.Ломоносова
- •Кафедра ботаники и общей экологии
- •Рабочая тетрадь по «Экологии микроорганизмов»
- •Занятие 1-2 Морфология бактерий. Приготовление препаратов микроорганизмов
- •Работа 1. Получение накопительных культур микроорганизмов
- •1.1. Получение накопительной культуры сенной палочки (Bacillus subtilis)
- •1.2. Получение культуры картофельной палочки (Bacillus mesentericus)
- •Работа 4. Приготовление мазка. Простая окраска Цель работы: овладеть методикой приготовления мазка; изучить морфологические формы бактерий
- •Занятие 3 Работа 1. Анализ микрофлоры воздуха
- •Санитарно-гигиенические показатели воздуха
- •9. Консистенция ( маслянистая, тестообразная, вязкая, пленчатая).
- •Занятие 4 Работа 1.Количественный учет бактерий в воде
- •Занятие 5 Работа 1. Маслянокислое брожение
- •Работа 2. Молочнокислое брожение
- •Работа 3. Нитрификация
- •Качественная реакция на nо2ˉ
- •Качественная реакция на nо3ˉ
Работа 3. Нитрификация
Окисление аммиака и солей аммония с образованием азотистой и азотной кислот получило название процесса нитрификации.
Процесс нитрификации протекает в две фазы и ведут его соответственно две группы нитрифицирующих бактерий.
I фаза нитрификации заключается в окислении аммиака до азотистой кислоты. Этот процесс ведут нитрозные бактерии. Наиболее изучен Nitrosomonas europea, характерный для почв Европы – клетки кокковидные или овальные, размером 0,5 – 1,5 мкм, подвижные, с длинным полярно расположенным жгутиком.
II фаза нитрификации заключается в окислении азотистой кислоты до азотной кислоты. Этот процесс ведут нитратные бактерии рода Nitrobacter – мелкие палочки, округлые, яйцевидные или грушевидные, размером 1,0 – 1,2 мкм, неподвижные, одиночные или соединенные в небольшие группы, окруженные слизистой капсулой.
Дата закладки опыта -
Материалы и оборудование: колбы со средами для I и II фазы нитрификации, конические колбы, предметные стекла, пипетки, фарфоровая палетка, полоски фильтровальной бумаги, микробиологическая петля, скальпель, пинцет; микроскоп; 20% серная кислота, концентрированная серная кислота, дифениламин, реактив Несслера, реактив цинк-иод-крахмал, водный раствор генцианвиолета или фуксина.
Ход работы:
Для накопления нитрифицирующих бактерий пользуются питательной средой С.Н.Виноградского (в г на 1 л дистиллированной воды):
Для I фазы нитрификации: Для II фазы нитрификации:
(NH4)2SO4 - 2,0 NaNO2 - 1,0
K2HPO4 - 1,0 Na2CO3 - 1,0
Mg SO4 - 0,5 NaCl - 0,5
NaCl - 2,0 K2HPO4 - 0,5
Fe SO4 - 0,4 Mg SO4 - 0,5
CaCO3 - 5,0 Fe SO4 - 0,4
Среды разливают в конические колбы слоем 1 - 1,5 см и заражают комочками парниковой земли. Колбы закрывают ватными пробками и помещают в термостат при температуре 25 – 28 ˚С на 14 – 21 сутки.
Дата снятия опыта -
2. Качественная реакция на NH4+ или NH3
В фарфоровую палетку к 3 каплям исследуемой жидкости добавляют 1 каплю реактива Несслера. В присутствии NH4+ или NH3 жидкость окрашивается в желтый цвет; при высокой концентрации может выпасть коричневый осадок.
Степень окраски отмечают крестами:
+ + + + - интенсивное окрашивание, осадок
+ + + - сильное окрашивание; выпадает небольшое количество осадка
+ + - окрашивание в интенсивно желтый или оранжевый цвет; осадка мало
+ - - окрашивание в желтый цвет; осадка нет
- окрашивание отсутствует